ẢNH HƯỞNG của THUỐC KHÁNG SINH lên các CHỈ TIÊU HUYẾT học của cá TRA (pangasianodon hypophthalmus) NHIỄM edwardsiella ictaluri

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN LÊ NGỌC LAN VÂN ẢNH HƯỞNG CỦA THUỐC KHÁNG SINH LÊN CÁC CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) NHIỄM Edwardsiella ictaluri LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN 2009 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com LỜI CẢM TẠ Xin gởi lời cảm ơn đến cô Đặng Thụy Mai Thy, Đặng Thị Hồng Oanh chị Nguyễn Thị Thúy Liễu tận tình hướng dẫn em suốt thời gian thực đề tài Mình xin chân thành cảm ơn người bạn thân yêu lớp Bệnh học thủy sản khóa 31 ln gắn bó, quan tâm, giúp đỡ năm đại học Lời cảm ơn cuối xin gởi đến cha mẹ, cha mẹ nguồn động viên lớn giúp cho vượt qua lúc khó khăn , giúp có đủ tự tin học tập sống Chân thành cảm ơn! LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com TÓM TẮT Đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri” nhằm mục tiêu xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra nhiễm E ictaluri Cá tra giống mua có biểu bệnh mủ gan, tiến hành bố trí thí nghiệm với nghiệm thức có nghiệm thức sử dụng kháng sinh, nghiệm thức – Amoxicilin, nghiệm thức – Flofenicol, nghiệm thức – Docycilin, nghiệm thức – Flofenicol Amoxicillin, nghiệm thức – Flofenicol Doxycilin nghiệm thức Amoxicillin Doxycilin, nghiệm thức đối chứng không sử dụng kháng sinh Theo dõi tỉ lệ chết cá, tiến hành phân lập vi khuẩn lấy máu xác định tiêu huyết học cá có biểu lờ đờ Kết thí nghiệm cho thấy tỉ lệ chết nghiệm thức cao (100% cá chết vào ngày thứ thí nghiệm), nghiệm thức đối chứng (93,3%), nghiệm thức (93%), nghiệm thức (47%), nghiệm thức (43%), nghiệm thức (30%) Kết phân lập vi khuẩn xác định cá nhiễm bệnh E.ictaluri Trong máu tìm loại tế bào: hồng cầu, lympho, tiểu cầu, bạch cầu đơn nhân, bạch cầu trung tính Ngồi cịn tìm thấy hồng cầu nhiều nhân không nhân Hồng cầu định loại dung dịch Natt – Herick, bạch cầu phương pháp nhuộm Wright & Giemsa Số lượng hồng cầu cá sau điều trị kháng sinh 1,6x106 tế bào/mm3 thấp hồng cầu cá nhiễm bệnh trước sử dụng kháng sinh 1,8x106 tế bào/mm3, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Lympho sau sử dụng kháng sinh thấp trước sử dụng kháng sinh bạch cầu đơn nhân bạch cầu trung tính sau sử dụng kháng sinh cao trước sử dụng kháng sinh Đối với nghiệm thức, lympho bạch cầu trung tính nghiệm thức khơng sử dụng kháng sinh có số lượng thấp (13,3x103 tế bào/mm3 7,3x103 tế bào/mm3), số lượng lympho cao nghiệm thức (53,8x103 tế bào/mm3) bạch cầu trung tính cao nghiệm thức (16,6x103 tế bào/mm3) Số lượng bạch cầu đơn nhân cao nghiệm thức với 12,8x103 tế bào/mm3 tiểu cầu cao với số lượng 24.6x103 tế bào/mm3 nghiệm thức Nghiệm thức có số bạch cầu đơn nhân thấp (5,1x103 tế bào/mm3) nghiệm thức có số tiểu cầu thấp (5,3x103 tế bào/mm3) i LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com MỤC LỤC Tóm tắt i Mục lục ii Danh sách bảng iv Danh sách hình v CHƯƠNG I: GIỚI THIỆU CHƯƠNG II: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tình hình dịch bệnh cá tra 2.2 Tình hình bệnh mủ gan cá tra 2.3 Bệnh mủ gan cá 2.4 Tình hình quản lý sử dụng kháng sinh giới Việt Nam 2.5 Kháng sinh 2.5.1 Khái niệm 2.5.2 Cơ chế tác động thuốc kháng sinh 2.5.3 Các loại thuốc kháng sinh thường dùng thủy sản 2.6 Những nghiên cứu kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn E.ictaluri 2.7 Các tiêu huyết học 2.7.1 Hồng cầu ( Erythrocyte) 2.7.2 Bạch cầu đơn nhân 2.7.3 Bạch cầu trung tính ( Neutrophil) 2.7.4 Tiểu cầu ( Thrombocyte 2.7.5 Tế bào lympho ( lymphocyte) 10 CHƯƠNG III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 ii LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 3.1 Thời gian thực 11 3.2 Địa điểm nghiên cứu 11 3.3 Vật liệu nghiên cứu 11 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 11 3.3.2 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu 11 3.3.3 Hóa chất 11 3.4 Phương pháp nghiên cứu 12 3.4.1 Chuẩn bị thí nghiệm 12 3.4.2 Bố trí thí nghiệm 12 3.4.3 Các tiêu thu thập 12 3.5 Định danh vi khuẩn 13 3.6 Phương pháp lấy mẫu máu quan sát tiêu huyết học 13 3.6.1 Phương pháp lấy mẫu máu, nhuộm đếm hống cầu 13 3.6.2 Phương pháp lấy mẫu máu, nhuộm đếm bạch cầu 14 3.7 Xử lý số liệu 15 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ THẢO LUẬN 16 4.1 Dấu hiệu bệnh lý 16 4.2 Kết thí nghiệm 16 4.3 Kết phân lập vi khuẩn 17 4.4 Kết phân tích huyết học 18 4.4.1 Hồng cầu 18 4.4.2 Bạch cầu 20 CHƯƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 24 5.1 Kết luận 24 5.2 Đề xuất 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 25 iii LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com Phụ lục 28 iv LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 So sánh độ nhạy loại kháng sinh vi khuẩn E.ictaluri phân lập cá tra bệnh gan thận mủ (nguồn: Nguyễn Đức Hiền) Bảng 3.1 Các loại thuốc liều lượng kháng sinh sử dụng cho nghiệm thức thí nghiệm 12 Bảng 4.1 Sự biến đổi số lượng loại bạch cầu trước sau sử dụng kháng sinh 20 Bảng 4.2 Số lượng loại bạch cầu nghiệm thức sau sử dụng kháng sinh 21 v LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Cá tra bệnh xuất nhiều đốm trắng gan (G), thận (Th) tỳ tạng (Tt)) Hình 2.2 Tế bào hồng cầu Hình 2.3 Bạch cầu đơn nhân Hình 2.4 Bạch cầu trung tính Hình 2.5 Tiểu cầu 10 Hình 2.6 Tế bào lympho 10 Hình 3.1 Buồng đếm hồng cầu 13 Hình 3.2 Thao tác lấy mẫu máu trải mẫu 14 Hình 4.1 Biểu đồ thể tỉ lệ chết nghiệm thức trogn trình thí nghiệm 16 Hình 4.2 Khuẩn lạc môi trường TSA 17 Hình 4.3 Kết nhuộm gram 18 Hình 4.4 Kết kiểm tra loai đường 18 Hình 4.5 Hồng cầu nhiều nhân (100X) 18 Hình 4.6 Hồng cầu khơng nhân (100X) 18 Hình 4.7 Biểu đồ mật độ hồng cầu cá tra trước, sau sử dụng kháng sinh không sử dụng kháng sinh 19 Hình 4.8 Tế bào lympho (100X) 20 Hình 4.9 Tiểu cầu (100X) 20 Hình 4.10 Bạch cầu trung tính (100X) 20 Hình 4.11 Bạch cầu đơn nhân (100X) 20 vi LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com vii LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com CHƯƠNG I GIỚI THIỆU Nghề nuôi trồng thuỷ sản ngày phát triển trở thành ngành có đóng góp đáng kể kim ngạch xuất Hiện tại, nhu cầu cá tra cho xuất tiêu thụ nước tăng cao Giải pháp quan trọng để tạo thêm nhiều sản phẩm nuôi công nghiệp tập trung Song song với phát triển đó, vấn đề dịch bệnh cá tra nuôi ngày trở nên trầm trọng Tình hình dịch bệnh xuất nhiều vào mùa mưa, chủ yếu bệnh gan thận có mủ, trắng gan, trắng mang Theo thống kê Bộ nông nghiệp phát triển nơng thơn, diện tích ni cá tra ĐBSCL giảm trước, tính đến ngày15/8/2008, diện tích thả ni tỉnh An Giang 1.392 ha, Cần Thơ - 1.250 ha, Đồng Tháp - 630 ha, Bến Tre - 563 ha, Vĩnh Long - 221 ha, Sóc Trăng - 212 ha, Hậu Giang - 171 Tiền Giang - 118 (Dương Long Trì, 2008) Để hạn chế dịch bệnh người nuôi sử dụng số loại kháng sinh Việc dùng kháng sinh trị bệnh thường tốn hiệu không cao Theo điều tra Nguyễn Tấn Duy Phong ( 2008) tình hình sử dụng thuốc thú y thủy sản tỉnh Cần Thơ An Giang cho thấy chi phí cho việc sử dụng thuốc thú y thủy sản lớn, chiếm 7% tổng chi phí sản xuất Hơn lượng tồn dư kháng sinh không ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm, mà ảnh hưởng đến sức khoẻ người tiêu dùng Việc dùng kháng sinh tùy tiện, không loại, liều lượng cách thức điều trị đưa đến hiệu điều trị kháng sinh ngày giảm tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc Từ thực tế nêu trên, đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri” thực với mục tiêu xác định ảnh hưởng loại kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra khỏe cá bị nhiễm E ictaluri Nội dung đề tài: - Xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra nhiễm E ictaluri LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 61 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 62 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 63 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 64 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 65 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 66 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 67 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 68 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 69 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 70 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 71 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 72 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 73 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 74 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com 75 LUAN VAN LUONG : add luanvanchat@agmail.com PDF created withCHAT FinePrint pdfFactory Prodownload trial version http://www.fineprint.com ... “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri? ?? nhằm mục tiêu xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra. .. hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri? ?? thực với mục tiêu xác định ảnh hưởng loại kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra khỏe cá bị nhiễm E ictaluri Nội dung đề tài: - Xác định ảnh. .. cách thức điều trị đưa đến hiệu điều trị kháng sinh ngày giảm tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc Từ thực tế nêu trên, đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)