Tái sinh chồi từ lá mầm cây dưa leo nếp ta

Nghiên cứu Tái sinh chồi từ lá mầm cây dưa leo nếp ta được thực hiện để phát triển quy trình tái sinh hiệu quả cho giống dưa leo Nếp ta (Cucumis sativus L. cultivar Nep ta) thông qua nuôi cấy mô lá mầm. Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả khử trùng hạt, sự tái sinh chồi và phát triển cây in vitro được khảo sát. Mời các bạn cùng tham khảo!

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 Screening drought tolerance of Vietnamese rice landraces in the laboratory and net house condition Advanced Studies in Biology, 13: 21-28 Vu T.T.H., Le D.D., Ismail A.M., Le H.H., 2012 Marker-assisted backcrossing (MABC) for improved salinity tolerance in rice (Oryza sativa L.) to cope with climate change in Vietnam Australian Journal of Crop Science., 6: 1649-165 Zhang M., Lu Q., Wu W., Niu X., Wang C., Feng Y., Xu Q., Wang S., Yuan X., Yu H., Wang Y and Wei X., 2017 Association mapping reveals novel genetic loci contributing to ooding tolerance during germination in Indica rice Frontiers in Plant Science, 8: 1-9 doi: 10.3389/fpls.2017.00678 Coleoptile elongation - characteristics determining the ability of rice anaerobic germination tolerance Nghi Khac Nhu Abstract Flooding or submergence is one of the natural calamities which a ects the growth and development of rice, especially at the germination stage Rice is the only crop in the cereal group capable of germinating in submerged conditions e rice anaerobic germination tolerance is characterized by the capacity of rice coleoptile elongation underwater Over the last several decades, many great studies have been conducted to elucidate the mechanism controlling this characteristic TPP7 gene has been found to play an important role in the anaerobic germination of rice variety Khao Hlan On Besides, the role of some hormones such as Auxin related to elongation ability of rice coleoptile has also been reported Because of labor shortage for rice production in the Mekong Delta, the farming method has changed almost entirely from transplanted rice to direct sown rice (dry sowing, underground sowing) Studying and utilizing the rice varieties with the ability of rice anaerobic germination tolerance is extremely important In this review, we documented the latest reports on the ability of anaerobic coleoptile elongation of rice and the mechanisms behind this trait as well as discussing perspectives of rice breeding to improve rice anaerobic germination tolerance in Vietnam Keywords: Rice (Oryza sativa), coleoptile, anaerobic germination tolerance Ngày nhận bài: 31/3/2022 Ngày phản biện: 17/4/2022 Người phản biện: PGS.TS Trần Đăng Khánh Ngày duyệt đăng: 30/5/2022 TÁI SINH CHỒI TỪ LÁ MẦM CÂY DƯA LEO NẾP TA Phan Lê Trâm Anh1, Nguyễn ị anh ảo1, Lý Triệu Minh1, Dương Hoa Xơ1, Nguyễn Xn Dũng1* TĨM TẮT Dưa leo (Cucumis sativus L.) rau ăn trồng phổ biến Việt Nam Các nghiên cứu trước cho thấy tái sinh dưa leo phụ thuộc vào kiểu gen đáp ứng tái sinh không giống giống dưa leo Nghiên cứu thực để phát triển quy trình tái sinh hiệu cho giống dưa leo Nếp ta (Cucumis sativus L cultivar Nep ta) thông qua nuôi cấy mô mầm Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu khử trùng hạt, tái sinh chồi phát triển in vitro khảo sát Kết cho thấy hạt nảy mầm tốt khử trùng với javen nồng độ 40% thời gian 15 phút Lá mầm ngày tuổi nuôi cấy môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA thích hợp cho tái sinh chồi Môi trường MS MS bổ sung 0,1 mg/L BA phù hợp tương ứng cho tạo rễ tăng trưởng chồi Kết tiền đề quan trọng cho nghiên cứu sản xuất phát triển giống dưa leo Nếp ta Từ khóa: Giống dưa leo Nếp ta, nuôi cấy mô mầm, tái sinh chồi Trung tâm Cơng nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh * Tác giả liên hệ: E-mail: nguyenxandung294@gmail.com 62 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 I ĐẶT VẤN ĐỀ Dưa leo (Cucumis sativus L.) rau ăn quan trọng, trồng phổ biến sử dụng cho nhiều mục đích khác Việt Nam nước giới Bệnh virus gây làm giảm suất, dẫn đến thiệt hại kinh tế nghiêm trọng vùng trồng dưa leo giới, đặc biệt nước phát triển (Akbar et al., 2015) Việc phát triển giống dưa leo kháng virus dựa tảng công nghệ gen vấn đề quan tâm Điều kiện tiên để chuyển gen vào dưa leo phải tạo hệ thống tái sinh hiệu (Bhardwaj et al., 2017) Sự tái sinh dưa leo thực thành công nhiều loại quan khác nhau, bao gồm rễ (Trulson et al., 1986), mầm (Chee, 1990; Chee and Slightom, 1991; Lin et al., 2011; Venkatachalam et al., 2018), trụ hạ diệp (Nishibayashi et al., 1996), cuống (Sarmento et al., 1992), mầm quan sử dụng phổ biến Tuy nhiên, nghiên cứu nhận thấy hiệu tái sinh dưa leo phụ thuộc vào kiểu gen (Grozeva and Velkov, 2014) Điều cho thấy giống dưa leo khác có đáp ứng tái sinh khác Do đó, việc nghiên cứu xây dựng quy trình tái sinh cho giống dưa leo cụ thể điều cần thiết II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Hạt giống dưa leo Nếp ta cung cấp Công ty TNHH Nông nghiệp Smile Seeds 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ Javen thời gian lên hiệu khử trùng hạt Hạt dưa leo làm cách rửa với nước - lần xà phịng lỗng 15 phút bình tam giác Sau rửa xà phòng, hạt ngâm với nước - để làm mềm vỏ hạt, tạo thuận lợi cho việc tách vỏ Tiếp theo, đưa bình tam giác chứa hạt vào tủ cấy lắc mẫu với cồn 70o 30 giây, sau tiến hành khử trùng hạt với dung dịch Javen thương mại (chứa 5% NaOCl) nồng độ 30, 40 50% (v/v) 10, 15 20 phút Cuối cùng, hạt rửa nước cất vô trùng lần tiến hành tách vỏ trước cấy vào môi trường ½ MS (Murashige and Skoog, 1962) bổ sung mg/L GA3 Mẫu cấy đặt tối ngày trước chuyển ni cấy í nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, bao gồm nghiệm thức, nghiệm thức có hạt, lặp lại ba lần eo dõi ghi nhận tỷ lệ mẫu vô trùng tỷ lệ hạt nảy mầm sau ngày nuôi cấy 2.2.2 Khảo sát ảnh hưởng tuổi mầm lên tái sinh chồi Lá mầm dưa leo in vitro 3, ngày tuổi tách khỏi trụ hạ diệp, loại bỏ cuống lá, cắt thành mẫu cấy vào môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, nghiệm thức có mẫu, lặp lại ba lần eo dõi ghi nhận tỷ lệ tái sinh chồi sau tuần nuôi cấy 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng BA lên tái sinh chồi từ mầm Lá mầm dưa leo in vitro ngày tuổi tách khỏi trụ hạ diệp, loại bỏ cuống lá, cắt thành mẫu cấy vào môi trường MS bổ sung BA nồng độ 1,0; 2,0; 3,0 mg/L í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, nghiệm thức có mẫu, lặp lại ba lần eo dõi ghi nhận tỷ lệ tái sinh chồi sau tuần nuôi cấy 2.2.4 Khảo sát ảnh hưởng BA lên tăng trưởng chồi Chồi dưa leo (4 tuần tuổi, tái sinh từ mầm môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA) cấy sang môi trường MS bổ sung BA nồng độ 0,0; 0,1; 0,5 1,0 mg/L í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, nghiệm thức có chồi, lặp lại ba lần eo dõi ghi nhận số lượng chồi/mẫu chiều cao trung bình chồi sau tuần nuôi cấy 2.2.5 Khảo sát ảnh hưởng NAA lên tạo rễ chồi Chồi dưa leo (cao 1,0 cm) tách khỏi cụm chồi cấy vào môi trường MS bổ sung NAA nồng độ 0,0; 0,05; 0,1 0,5 mg/L í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, nghiệm thức có chồi, lặp lại ba lần eo dõi ghi nhận tỷ lệ tạo rễ sau tuần nuôi cấy 2.2.6 Điều kiện nuôi cấy Mẫu cấy đặt điều kiện ánh sáng 2.500 ± 500 lux, nhiệt độ 25 ± 2°C, độ ẩm 55 ± 5%, thời gian chiếu sáng 16 giờ/ngày 63 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 2.2.7 Xử lý thống kê III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Các số liệu nghiên cứu phân tích ANOVA, so sánh khác biệt mức p ≤ 0,05 tiến hành phân hạng (nếu có) theo Duncan phần mềm SPSS 20 3.1 Ảnh hưởng nồng độ javen thời gian lên hiệu khử trùng hạt 2.3 ời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ tháng 10 năm 2020 đến tháng 10 năm 2021 Phịng thí nghiệm Cơng nghệ Sinh học ực vật, Trung tâm Công nghệ Sinh học thành phố Hồ Chí Minh Sau ngày ni cấy, tất nghiệm thức thu hạt vô trùng Trong đó, nghiệm thức xử lý dung dịch javen nồng độ 30% thời gian khử trùng 10 phút cho tỷ lệ hạt vô trùng thấp (93,33%) Tất nghiệm thức cịn lại có tỷ lệ hạt vô trùng đạt mức cao (100%) (Bảng 1) Bảng Ảnh hưởng nồng độ Javen thời gian khử trùng lên nảy mầm hạt dưa leo in vitro sau ngày nuôi cấy Nồng độ Javen (%) 30 40 50 ời gian (phút) Tỷ lệ hạt vô trùng (%) Tỷ lệ hạt nảy mầm (%) 10 93,33 62,22cd 15 100a 60,0d 20 100a 71,11bcd 10 100a 73,33bcd 15 100a 88,89a 20 100a 77,78ab 10 100a 75,56abc 15 100a 82,22ab 20 100a 73,33bcd b Ghi chú: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Kết khảo sát khả nảy mầm cho thấy tỷ lệ nảy mầm hạt đạt mức 50% Trong đó, nghiệm thức sử dung javen 40% thời gian khử trùng 15 phút cho tỷ lệ hạt nảy mầm cao (88,89%) Điều cho thấy dung dịch javen nồng độ 40% thời gian khử trùng 15 phút thích hợp cho việc khử trùng hạt thu nhận dưa leo in vitro (Hình 1) Sự khác biệt tỷ lệ nảy mầm nghiệm thức có lẽ thay đổi ẩm độ hạt ẩm độ yếu tố có ảnh hưởng quan trọng đến tỷ lệ nảy mầm hạt (Shaban, 2013) Ẩm độ hạt thay đổi đạt mức độ khác sau ngâm dung dịch nồng độ thời gian khác nhau; từ đưa đến đáp ứng khác nảy mầm hạt Điều thể rõ với kết tỷ lệ nảy mầm hạt có xu hướng tăng lên theo gia tăng nồng độ dung dịch thời gian ngâm hạt, đạt mức cao nồng độ 40% thời gian 15 phút, sau giảm xuống đạt mức thấp nồng độ 50% thời gian 20 phút 64 Hình Hạt dưa leo nảy mầm tăng trưởng điều kiện in vitro thời điểm nuôi cấy khác Ghi chú: a, b, c: 2, 5, ngày nuôi cấy 3.2 Ảnh hưởng tuổi mầm lên tái sinh chồi Sau tuần nuôi cấy môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA, tất mô mầm có biểu đáp ứng với mơi trường Tuy nhiên, có mơ mầm ngày tuổi có tạo mơ sẹo tái sinh Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 chồi Mơ mầm ngày tuổi có tỷ lệ tái sinh chồi cao so với mô mầm ngày tuổi (66,6% so với 1,1%) (Bảng 2, Hình 2) Kết cho thấy khả tái sinh chồi chịu ảnh hưởng tuổi (trạng thái sinh lý) mầm Tỷ lệ tái sinh giảm mạnh tuổi mầm gia tăng Tỷ lệ tái sinh đạt mức cao với mầm ngày tuổi Kết hoàn toàn phù hợp với quan điểm cho hiệu tái sinh mô thực vật phụ thuộc vào trạng thái sinh lý mô cấy (Bùi Trang Việt, 2016) Bảng Ảnh hưởng tuổi mầm lên tái sinh chồi từ mầm dưa leo Tuổi mầm (ngày) Tỷ lệ tái sinh chồi (%) 66,6a 1,1b 0,0b Ghi chú: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Hình Sự tái sinh chồi từ mầm dưa leo độ tuổi môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA sau tuần nuôi cấy Ghi chú: A, B, C: 3, 5, ngày tuổi Kết giải phẫu hình thái cho thấy có xuất cấu trúc chồi vùng ngoại biên mô ngày tuổi mô ngày tuổi hồn tồn khơng có cấu trúc (Hình 4) Điều cho thấy chồi tái sinh trường hợp có nguồn gốc từ phát sinh quan trực tiếp Phù hợp với kết này, Burza Malepszy thông báo tái sinh chồi trực tiếp từ dưa leo (Burza and Malepszy, 1995) Kết cho thấy tái sinh chồi dưa leo xảy tốt theo đường tái sinh trực tiếp so với gián tiếp (thông qua mô sẹo) Hình Sự phát sinh hình thái mơ mầm môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA sau tuần nuôi cấy Ghi chú: (A, B, C) Mô mầm 3, 5, ngày tuổi 3.3 Ảnh hưởng BA lên tái sinh chồi từ mầm Sau tuần nuôi cấy, mẫu mầm tất mơi trường có bổ sung BA có tái sinh chồi Tỷ lệ tái sinh chồi đạt mức cao (55,5%) mơi trường có bổ sung 1,0 mg/L BA sau giảm xuống nồng độ BA tăng lên Tỷ lệ tái sinh chồi đạt mức thấp (8,8%) mơi trường có bổ sung mg/L BA (Hình 5) 65 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 Chồi tái sinh thường xuất mẫu dạng cụm chồi vị trí vết cắt vị trí bị tổn thương (Hình 6), nơi mà hoạt động phân chia tế bào sau dẫn đến phát sinh hình thái diễn mạnh mẽ Trong nghiên cứu khác, BA nồng độ 1,0 mg/L sử dụng cho mục đích tái sinh chồi từ mô mầm dưa leo ngày tuổi (Vasudevan et al., 2007) Những kết cho thấy BA nồng độ 1,0 mg/L phù hợp cho tái sinh chồi từ mô mầm dưa leo giai đoạn khơng q ngày tuổi Hình Ảnh hưởng BA lên tái sinh chồi từ mầm dưa leo Ghi chú: Các chữ khác kèm số liệu sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Hình Sự tái sinh chồi từ mầm dưa leo môi trường MS bổ sung BA nồng độ sau tuần nuôi cấy Ghi chú: A, B, C, D: 0,0; 1,0; 2,0; 3,0 mg/L 3.4 Ảnh hưởng BA lên tăng trưởng chồi nuôi cấy hai loại mơi trường khơng có bổ sung BA nồng độ từ 0,1 - 1,0 mg/L tạo cụm với số lượng từ - chồi/mẫu Tuy nhiên, chồi nuôi cấy môi trường khơng bổ sung BA có thân ngắn nhỏ so với mơi trường có bổ sung BA Trong nồng độ thử nghiệm, BA nồng độ 0,1 mg/L giúp chồi tăng trưởng chiều cao tốt (Bảng 3, Hình 7) Mơi trường bổ sung BA nồng độ 1,0 mg/L giúp mầm tái sinh chồi hiệu lại không phù hợp cho tăng trưởng chồi Chồi tái sinh tạo cụm mà khơng tăng trưởng thành nên cần tìm mơi trường thích hợp cho tăng trưởng chồi sau tái sinh Kết thử nghiệm cho thấy chồi Bảng Ảnh hưởng BA lên tăng trưởng chồi dưa leo Nồng độ BA (mg/L) Số lượng chồi/mẫu Chiều cao chồi (mm) 0,0 3,38 4,78d 0,1 3,78b 16,61a 0,5 4,33a 12,76b 1,0 3,50b 9,32c b Ghi chú: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Kết cho thấy việc giảm nồng độ BA (tăng tỷ lệ auxin/cytokinin) môi trường nuôi cấy giúp cải thiện khả tăng trưởng chồi dưa leo tái sinh Một số nghiên cứu cho thấy 66 việc tăng tỷ lệ auxin/cytokinin môi trường nuôi cấy (thông qua việc bổ sung NAA) giúp cho chồi phát triển tốt (Vasudevan et al., 2007; Lin et al., 2011; Venkatachalam et al., 2018) Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 Hình Sự tăng trưởng chồi mơi trường MS bổ sung BA nồng độ khác sau tuần nuôi cấy Ghi chú: A, B, C, D: 0,0; 0,1; 0,5; 1,0 mg/L 3.5 Ảnh hưởng NAA lên tạo rễ chồi Sau tuần nuôi cấy, chồi nuôi cấy tất môi trường có tạo rễ Tỷ lệ chồi tạo rễ chiều dài rễ đạt mức cao (100% 9,3 cm) môi trường MS Việc bổ sung NAA vào môi trường nuôi cấy làm giảm tỷ lệ chồi tạo rễ chiều dài rễ Nồng độ NAA tăng, tỷ lệ chồi tạo rễ chiều dài rễ giảm (Bảng 4) Bảng Ảnh hưởng NAA lên tạo rễ chồi dưa leo Nồng độ NAA (mg/L) Tỷ lệ tạo rễ (%) Chiều dài rễ (cm) 0,0 100,0a 9,3a 0,05 86,6b 5,3b 0,1 80,0b 1,8c 0,5 6,6c 1,0d Ghi chú: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Chồi ni cấy mơi trường khơng có NAA (MS) tạo rễ mảnh, dài, có nhiều rễ thứ cấp, chồi ni cấy mơi trường có NAA tạo rễ lớn, ngắn dày, đồng thời có tạo mơ sẹo gốc chồi (Hình 8) Kết cho thấy tạo rễ chồi dưa leo xảy tốt với môi trường không bổ sung chất điều hòa sinh trưởng Sự tạo rễ dưa leo thông báo xảy tốt mơi trường khơng bổ sung chất điều hịa sinh trưởng (Hoàng ị Huyền Trang ctv., 2021) Tuy nhiên, số nghiên cứu khác lại cho việc bổ sung IBA cần thiết cho tạo rễ chồi dưa leo (Venkatachalam et al., 2018; Vasudevan et al., 2007; Lin et al., 2011) Sự khác biệt có lẽ hàm lượng auxin nội sinh khác giống dưa leo nghiên cứu Auxin có vai trị quan trọng với giai đoạn tạo rễ Ở nồng độ phù hợp, auxin kích thích tạo sơ khởi kéo dài rễ, nhiên nồng độ thấp hay cao auxin ngăn cản tạo sơ khởi kéo dài rễ (Bùi Trang Việt, 2016) Đối với giống có auxin nội sinh cao, tạo rễ xảy không cần bổ sung auxin Việc bổ sung auxin trường hợp không làm gia tăng mà ngăn cản tạo rễ Điều thể kết mà auxin bổ sung với nồng độ từ 0,1 - 0,5 mg/L làm giảm tỷ lệ tạo rễ chiều dài rễ (Bảng 4) Trái lại, với giống có auxin nội sinh thấp, cần bổ sung auxin ngoại sinh để đạt nồng độ thích hợp cho tạo rễ cơng bố nêu Hình Chồi dưa leo tạo rễ môi trường MS bổ sung NAA nồng độ khác sau tuần nuôi cấy Ghi chú: A; B; C; D: 0,0; 0,05; 0,1; 0,5 mg/L 67 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 Các kết thu cho thấy nhóm nghiên cứu thiết lập quy trình tái sinh hiệu từ mầm giống dưa leo Nếp ta Do tái sinh dưa leo phụ thuộc vào kiểu gen nên việc thực thành cơng tái sinh cho giống có nhiều điểm ưu việt dưa leo Nếp ta kết có tính có ý nghĩa cho công tác nghiên cứu sản xuất giống dưa leo Chee P.P and Slightom J.L., 1991 Transfer and expression of Cucumber mosaic virus coat protein gene in the genome of Cucumis sativus Journal of the American Society for Horticultural Science, 116 (6): 1098-1102 IV KẾT LUẬN Lin Y.T., Lin C.W., Chung C.H., Su M.H., Ho H.Y., Yeh S.D., Jan F.J and Ku H.M., 2011 In vitro regeneration and genetic transformation of Cucumis metuliferus through cotyledon organogenesis Hortscience, 46 (4): 616-621 Sự tái sinh chồi in vitro dưa leo Nếp ta đạt thơng qua nuôi cấy mầm Tỷ lệ tái sinh chồi đạt mức cao mầm ngày tuổi nuôi cấy môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BA Chồi tạo rễ tăng trưởng tốt môi trường MS MS bổ sung 0,1 mg/L BA Các chồi tạo rễ hoàn chỉnh nguồn vật liệu cần thiết để nghiên cứu hóa dưa leo giai đoạn hậu cấy mơ nhằm hồn thiện quy trình tái sinh dưa leo Nếp ta TÀI LIỆU THAM KHẢO Hoàng ị Huyền Trang, Hoàng Khánh Linh, Nguyễn ị Linh, Trịnh Đình Duy, Lê ị Như ảo, Phạm Bích Ngọc, Chu Hồng Hà, Đỗ Tiến Phát, 2021 Nghiên cứu khả tái sinh chuyển gen thị vào giống dưa chuột Choka F1 TNU Journal of Science and Technology, 226 (01): 83-91 Bùi Trang Việt, 2016 Giáo trình Sinh lý học ực vật, Phần 2: Phát triển Nhà xuất Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, 333 trang Akbar, A., Ahmad, Z., Begum, F., Ubairah, Raees, N., 2015 Varietal reaction of cucumber against Cucumber mosaic virus American Journal of Plant Sciences, (7): 833-838 Bhardwaj A., Pradeepkumar T., Varun Roch C., 2017 In vitro regeneration of parthenocarpic cucumber (Cucumis sativus L.) International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, 6(7): 1711-1720 Burza W and Malepszy S., 1995 Direct plant regeneration from leaf explants in cucumber (Cucumis sativus L.) is free of stable genetic variation Plant Breeding, 114 (4): 341-345 Chee, P.P., 1990 High frequency of somatic embryogenesis and recovery of fertile cucumber plants Hortscience, 25: 792-793 68 Grozeva S and Velkov N., 2014 In vitro plant regeneration of two cucumber (Cucumis sativum L.) genotypes: e ects of explant types and culture medium Genetica, 46 (2): 485-493 Murashige T and Skoog F., 1962 A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiologia Plantarum, 15: 473-497 Nishibayashi S., Kaneko H., and Hayakawa T., 1996 Transformation of cucumber (Cucumis sativus L.) plants using Agrobacterium tumefaciens and regeneration from hypocotyl explants Plant Cell Reports, 15: 809814 Sarmento G.G., Alpert K., Tang F.A., Punja Z.K., 1992 Factors in uencing Agrobacterium tumefaciens mediated transformation and expression of kanamycin resistance in pickling cucumber Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 31(3): 185-193 Shaban M., 2013 E ect of water and temperature on seed germination and emergence as hydrothermal time model International Journal of Advanced Biology and Biomedical Research, 1(12): 1686-1691 Trulson A.J., Simpson R.B and Shahin E.A., 1986 Transformation of cucumber (Cucumis sativus L.) plants with Agrobacterium rhizogenes eoretical and Applied Genetics, 73: 11-15 Vasudevan, A., Selvaraj, N., Ganapathi, A., Choi, C.W., Manickavasagam, M., Kasthurirengan, S., 2007 Direct plant regeneration from cucumber embryonal axis. Biologia Plantarum, 51(3): 521-524 Venkatachalam, P., Jinu, U., Sangeetha, P., Geetha, N., & Sahi, S.V., 2018 High frequency plant regeneration from cotyledonary node explants of Cucumis sativus L cultivar ‘Green Long’ via adventitious shoot organogenesis and assessment of genetic delity by RAPD-PCR technology. 3 Biotech, 8(1): 1-12 doi: 10.1007/s13205018-1083-8 Epub 2018 Jan 11 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 04(137)/2022 Shoot regeneration from cotyledon of cucumber variety Nep ta Phan Le Tram Anh, Nguyen i anh ao, Ly Trieu Minh, Duong Hoa Xo, Nguyen Xuan Dung Abstract Cucumber (Cucumis sativus L.) is a popular vegetable in Vietnam Previous studies showed that the regeneration of cucumber based on genotype and the regenerative response is not the same for various cucumber varieties is study was performed to develop an e cient procedure for shoot regeneration in Cucumis sativus L cultivar Nep ta via cotyledon tissue culture Factors a ecting the e ciency of seed sterilisation, shoot regeneration and in vitro plant growth were investigated e results showed that the seeds germinated best when sterilized with Javen at 40% concentration for 15 minutes e 3-day-old cotyledons cultured on MS medium supplemented with 1.0 mg/L BA were suitable for shoot regeneration MS medium and MS supplemented with 0.1 mg/L BA were suitable for rooting and shoot growth, respectively is nding is an important premise for studying the production and development of the Nep ta cucumber variety Keywords: Cucumber variety Nep ta, cotyledon tissue culture, shoot regeneration Ngày nhận bài: 05/4/2022 Ngày phản biện: 25/4/2022 Người phản biện: TS Nguyễn Ngày duyệt đăng: 30/5/2022 anh Nhung TỐI ƯU ĐIỀU KIỆN SẤY HÀNH ĐEN BẰNG CÔNG NGHỆ BƠM NHIỆT Trần Phương Chi1*, Nguyễn Tân Hoàng ị Lệ Hằng2 , Trần Đình ành1, ắng TĨM TẮT Nghiên cứu có mục đích xác định điều kiện tối ưu trình sấy bơm nhiệt nhằm nâng cao hiệu suất thu hồi hàm lượng tổng phenolic avonoid từ hành đen khảo sát số thành phần dinh dưỡng í nghiệm thiết kế theo phương pháp bề mặt (RSM) - phương án cấu trúc có tâm (CCD) Kết xây dựng mơ hình tối ưu quy trình sấy bơm nhiệt với ba yếu tố nhiệt độ sấy (X1), thời gian sấy (X2) tốc độ tác nhân sấy (X3); ba hàm mục tiêu tổn thất hàm lượng tổng phenolic (Y1, %) tổn thất hàm lượng tổng avonoid (Y2, %), độ ẩm sau sấy (Y3, %) Các thông số tối ưu trình sấy bơm nhiệt nhiệt độ sấy 53oC, tốc độ tác nhân sấy 2,3 m/s thời gian sấy 20 Ở điều kiện này, tổn thất hàm lượng tổng phenolic thấp 11,45 ± 0,05%, tổn thất hàm lượng tổng avonoid thấp 12,80 ± 0,04% độ ẩm sản phẩm 13,11 ± 0,05% Từ khố: Hành đen (Allium ascalonium), quy trình sấy bơm nhiệt, điều kiện sấy I ĐẶT VẤN ĐỀ Hành đen sản phẩm từ củ hành tím (Allium ascalonicum), loại gia vị thuốc sử dụng lâu đời ẩm thực y học dân gian Việt Nam, chế biến cách ủ nhiệt hành môi trường nhiệt độ độ ẩm có kiểm sốt ơng qua q trình ủ nhiệt, hợp chất ổn định có mùi khó chịu chuyển thành hợp chất bền không mùi Sản phẩm thu có trạng thái dẻo, màu đen, vị eo Moreno-Rojas cộng tác viên (2019), số thành phần polyphenol, avonoid, axit amin, Viện CN Hóa sinh Môi trường - Trường ĐH Vinh Viện Nghiên cứu Rau Đại học Công nghiệp thành phố Hồ Chí Minh * Tác giả liên hệ: E-mail: phuongchi53@gmail.com 69 ... lên tái sinh chồi từ mầm dưa leo Tuổi mầm (ngày) Tỷ lệ tái sinh chồi (%) 66,6a 1,1b 0,0b Ghi chú: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê mức α ≤ 0,05 Hình Sự tái sinh chồi từ mầm dưa leo. .. lập quy trình tái sinh hiệu từ mầm giống dưa leo Nếp ta Do tái sinh dưa leo phụ thuộc vào kiểu gen nên việc thực thành công tái sinh cho giống có nhiều điểm ưu việt dưa leo Nếp ta kết có tính... mg/L sử dụng cho mục đích tái sinh chồi từ mô mầm dưa leo ngày tuổi (Vasudevan et al., 2007) Những kết cho thấy BA nồng độ 1,0 mg/L phù hợp cho tái sinh chồi từ mô mầm dưa leo giai đoạn khơng q ngày