TỔNG QUAN về sắc ký LỎNG TƯƠNG tác THÂN nước HILIC

BỘYTẾ BỘYTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRƯỜNG -ĐẠIHỌC -DƯỢC HÀ NỘI ĐINH THÙY LINH 1201319 TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC-HILIC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2017 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat BỘYTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - ĐINH THÙY LINH 1201319 TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC-HILIC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà ThS Vũ Ngân Bình Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất HÀ NỘI - 2017 www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khố luận này, tơi nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cơ, gia đình bạn bè Cho đến khố luận hồn thiện, tơi xin phép bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc chân thành đến họ Đầu tiên, xin phép được gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS - Trường Đại học Dược Hà Nội, người tận tình hướng dẫn, bảo, động viên tơi suốt chặng đường khó khăn thực khóa luận Tơi www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com xin cảm ơn PGS.TS Vũ Đặng Hoàng - Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất thầy dành thời gian tra cứu giúp đỡ tơi q trình tìm tài liệu Tơi xin cảm ơn thầy Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất tạo điều kiện cung cấp cho tài liệu cần thiết để giúp tơi hồn thành khóa luận Tơi xin cảm ơn Ban giám hiệu, phịng ban, thầy giáo cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội-những người dạy bảo trang bị cho kiến thức khoa học tảng suốt năm học qua mái trường Và cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn thân thương đến ba mẹ, gia đình, bạn bè cảm ơn tập thể lớp M1K67 quan tâm, giúp đỡ nhiều thời gian học tập thực khóa luận Một lần nữa, xin chân thành cảm ơn tất tình cảm giúp đỡ mà thầy cơ, gia đình, bạn bè dành tặng cho tơi suốt thời gian khó khăn vừa qua DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Phạm Thị Thanh Hà ThS Vũ Ngân Bình- Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất Hà Nội, ngày 18 tháng năm 2017 Sinh viên Đinh Thùy Linh Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước 1.2 Nguyên lý sắc ký lỏng tương tác thân nước 1.2.1 Pha động 1.2.2 Pha tĩnh 1.2.3 Cơ chế tách yếu tố ảnh hưởng 15 1.2.4 Hệ thống phát (Detector) 20 1.3 Ưu nhược điểm HILIC 22 1.3.1 Ưu điểm 22 1.3.2 Nhược điểm 24 CHƯƠNG 2: ỨNG DỤNG THỰC TẾ CỦA SẮC KÝ HILIC 25 2.1 Ứng dụng HILIC phân tích acid amin, peptid protein 25 2.2 Ứng dụng HILIC phân tích kháng sinh 27 2.3 Ứng dụng HILIC phân tích nucleotid, nucleosid, nucleobase 28 2.4 Ứng dụng HILIC phân tích phospholipid 29 DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN ĐẶT VẤN ĐỀ 2.5 Ứng dụng HILIC phân tích carbohydrat 30 2.6 Ứng dụng HILIC phân tích chất dẫn truyền thần kinh 31 2.7 Ứng dụng HILIC đối tượng phân tích khác 32 2.8 Thực tế ứng dụng HILIC Việt Nam 32 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 34 Kết luận 34 Đề xuất 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox:nguyenthanhtuteacher@hotmail.com PHỤ LỤC www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên tiếng An ACN Acetonitrile APCI Atmospheric CAD Charged Aer DMF Dimethyl Fo ELSD Evaporative Detector DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Chemical Ion ESI Electrospray HILIC Hydrophilic Chromatgrap HPLC High Perform Chromatogra LOD Limit of Det LOQ Limit of Qua MP Mobile Phas MS Mass Spectro NPLC Normal Phas Chromatogra RID Refrective In RPLC Reversed Ph Chromatogra TFA Trifluoroacet THF Tetrahydrofu SPE Solid Phase E UHPLC Utra-High Pe Chromatogra Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các cấu trúc khác pha tĩnh áp dụng cho việc phân tách HILIC Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Bảng 1.2 Các loại tương tác chất phân tích, pha tĩnh pha động 16 www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơ chế phân tách hệ thống HILIC 18 www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Hình 1.2 Lớp điện tích kép bề mặt pha tĩnh liên kết 20 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com ĐẶT VẤN ĐỀ Trong nhiều năm gần đây, kỹ thuật sắc ký nói chung sắc ký lỏng nói riêng áp dụng nhiều lĩnh vực khác hóa sinh, sinh học, phân tích mơi trường, phân tích thuốc, lâm sàng Trong số kỹ thuật sắc ký lỏng, sắc ký phân bố kỹ thuật thông dụng chia làm hai loại dựa độ phân cực tương đối pha tĩnh pha động: sắc ký pha thuận - NPLC (normal phase liquid chromatography) sắc ký pha đảo - RPLC (reverse phase chromatography) Tuy nhiên có thêm nhiều kỹ thuật sắc ký lỏng khác nghiên cứu, sử dụng để mở rộng ứng dụng nhiều đối tượng phân tích khắc phục nhược điểm kỹ thuật sắc ký truyền thống Một số kỹ thuật sắc ký lỏng tương tác thân nước - HILIC (hydrophilic interaction liquid chromatography) HILIC lần đề xuất Alpert vào năm 1990 Kỹ thuật sắc kí sử dụng pha tĩnh phân cực với dung môi pha động phân cực So với NPLC, HILIC cải thiện khả hịa tan chất phân tích nhờ sử dụng pha động chứa nước so với pha động hữu sắc ký pha thuận So với RPLC, HILIC phân tích chất phân cực, khơng lưu giữ cột sắc ký pha đảo Nhờ ưu điểm mà HILIC ngày nhận nhiều quan tâm dần trở nên phổ biến giới Tuy nhiên kĩ thuật số lượng nghiên cứu nước Vì vậy, việc có hiểu biết đầy đủ kỹ thuật cần thiết để áp dụng kĩ thuật HILIC cách phù hợp hiệu Vậy nên, khóa luận thực với mong muốn đem đến nhìn tổng quan HILIC, cung cấp hiểu biết khả ứng dụng phân tích đặc biệt nghành Dược, nhằm tạo tảng cho việc ứng dụng kỹ thuật sắc ký HILIC điều kiện thực tế Việt Nam Khóa luận thực hiên với ba mục tiêu sau: Tìm hiểu nguyên lý, chế tách sắc ký HILIC DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Bảng 2,5 Ứng dụng HILIC phân tích carbohydrat STT Nền mẫu Đối tượng phân tích Heparin Oligosaccharid Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Sữa non dê oligosaccharid có nguồn gốc tự nhiên dẫn xuất huỳnh quang maltooligosaccharid không dẫn xuất dẫn xuất với 2aminobenzoic acid, 2aminobenzamid, 2aminopyridin 8aminonaaphthalen1,3,6-trisulfonic acid Các oligosaccharid carbohydrat www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Sản phẩm trình biến glycerol, arabitol mannitol đổi sinh học glycerol Dịch chiết iminosugar carbohydrat phân tử lượng thấp Aglaonema sp Penicillium sp Các Glycosaminogly Oligosaccharid dextran oligosaccharid Saccharid Galactooligosaccharid Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com 10 Tế bào thực vật Oligosaccharide 11 Mô Arabidopsi s thaliana Các chất chuyển hóa liên quan đến carbohydrat: hợp chất có chứa glucose (gluc), sucrose (Suc), 12 Heparan raffinose, verbascose, mannitol, maltitol, glucose-6-phosphate (Glc6P) trehaloseDisaccharid 6-phosphate (Tre6P ) sulfate (HS) chondroitin sulfate / dermatan sulfate (CS / DS) 13 glycosamin oglyACNs (GAGs) Chất làm nhân aspartam (ASP), alitame (ALI), neotam Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com tạo (NEO), acesulfam (ACS), saccharin (SAC), cyclamat (CYC), sucralos (SCL) Neohesperidin 14 dihydrochalcon (NHDC) carbohydrat Bia PL-26 www.facebook.com/daykemquynhonofficial Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Bảng 2,6 Ứng dụng HILIC phân tích chất dẫn truyền thần kinh STT Nền mẫu Đối tượng phân tích Nước tiểu người Mô não chuột Não chuột Chất dẫn truyền thần kinh monoamin (dopamin, norepinephrin, epinephrin serotonin) với tiền chất chất chuyển hóa tương ứng chúng Acid glutamic, glutamin, acid pyroglutamic, GABA theanin Chất dẫn truyền thần kinh monoamin nội sinh serotonin, dopamin, epinephrin norepinephrin Dịch ốc sên Lymnaea stagnalis Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú 20 hợp chất bao gồm chất dẫn truyền thần kinh, tiền chất chất chuyển www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com hóa Mẫu sinh học Acetylcholin, serotonin, dopamin, norepinephrin, glutamat, GABA glycin Các chất dẫn truyền thần kinh monoamin Não chuột Acetylcholin nội sinh Thực phẩm acetylcholin, betain, cholin, glycerophosphocholin, lysophosphatidylethanolam in, phosphatidylcholin, Mô người phosphatidylethanolamin, phosphatidylinositol, phosphocholin sphingomyelin Acetylcholine, cholin Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com butyrobetain, (3carboxypropyl) trimethylammoni) 10 Microdialys Acetylcholine ate mô da 11 Tế bào nuôi cấy Acetylcholine 12 Dịc ngoại chất dẫn truyền thần bào từ nao khỉ kinh: acetylcholin, serotonin, dopamin, acid γaminobutyric (GABA), glutamat aspartat PL-29 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-30 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial ... CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước Kể từ đời sắc ký công cụ thiếu phân tích Dựa vào khác chế tách người ta chia sắc ký lỏng thành... CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước 1.2 Nguyên lý sắc ký. .. nhiều loại sắc ký phân bố, sắc ký hấp phụ, sắc ký ion, sắc ký rây phân tử, sắc ký lực-miễn dịch Trong đó, phổ biến sắc ký phân bố khả ứng dụng rộng rãi nhiều đối tượng phân tích Sắc ký phân bố