NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG

NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI DƯƠNG THỊ THUẤN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN ỨNG DỤNG DÙNG ĐƯỜNG UỐNG CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM & BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 9720202 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI – 2022 Cơng trình hồn thành tại: - Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội - Bộ môn Công nghiệp Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội - Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia - Trường Đại học Dược Hà Nội - Viện nghiên cứu Dược - Đại học Tartu – Estonia - Trung tâm Sinh học – Đại học Helsinki – Phần Lan - Khoa Y sinh - Đại học Helsinki – Phần Lan - Viện Vật lý - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam - Viện Hóa học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam - Viện Vệ sinh dịch tễ Trung Ương - Trung tâm đánh giá tương đương sinh học- Viện Kiểm nghiệm thuốc TW Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Phạm Thị Minh Huệ GS.TS Jyrki Tapio Heinämäki Phản biện 1: PGS TS Trần Việt Hùng- Viện Kiểm nghiệm Thuốc thành phố Hồ Chí Minh Phản biện 2: PGS TS Vũ Bình Dương - Trung tâm nghiên cứu ứng dụng sản xuất thuốc, Học viện Quân Y Phản biện 3: TS Đào Danh Sơn - Công ty cổ phần tập đoàn MERAP Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá Luận án cấp trường họp tại: Phòng Hội đồng, trường Đại học Dược Hà Nội Vào hồi: 13 30 ngày 09 tháng năm 2022 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Thư viện trường Đại Học Dược Hà Nội DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Duong, T.T.; Isomäki, A.; Paaver, U.; Laidmäe, I.; Tõnisoo, A.; Yen, T.T.H.; Kogermann, K.; Raal, A.; Heinämäki, J.; Pham, T.-M.-H (2021), “Nanoformulation and Evaluation of Oral Berberine-Loaded Liposomes”, Molecules (IF=3,267), 26, 2591 https://doi.org/10.3390/molecules26092591 Duong, T.T.; Yen, T.T.H; Nguyen, T.L.; Nguyen, T.-D.; Nguyen, T.-Q.-T.; Nghiem, T.-H.-L.; Pham, T.H., Raal, A.; Heinämäki, J.; Pham, T.-M.-H (2022), “Berberine-loaded liposomes for oral delivery: Preparation, physicochemical characterization and in-vivo evaluation in an endogenous hyperlipidemic animal model”, International Journal of Pharmaceutics (IF=5,875), 616, https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2022.121525 121525 Chữ viết tắt DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết đầy đủ AUC Area under the curve (Diện tích đường cong) α-TP α-tocopherol BBR Berberin Cmax Nồng độ đỉnh huyết tương Cryo-EM Cryogenic electron microscopy (Kính hiển vi điện tử đông lạnh) DLS Dynamic light scattering (Nhiễu xạ ánh sáng động) DSPG Distearoyl phosphatidylglycerol EMA European Medicines Agency (Cơ quan Y tế Châu Âu) FDA FTIR HDL-C HSPC HPLC KTTP LC-MS/MS LDL-C Food and Drug Administration (Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ) Fourier transform infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại Fourier) High density lipoprotein cholesterol (Cholesterol tỉ trọng cao) Hydrogenated soy phosphatidylcholin Sắc ký lỏng hiệu cao (High performence liquid chromatography) Kích thước tiểu phân Liquid Chromatography with tandem mass spectrometry (Sắc ký lỏng kết hợp hai lần khối phổ) Low density lipoprotein cholesterol (Cholesterol tỉ trọng thấp) MRT Mean retention time (Thời gian lưu trú trung bình) NaDC Natri deoxycholat NTA Nanoparticle tracking analysis (Phân tích vết hạt nano) PDI Polydispersity index (Chỉ số đa phân tán) RSD Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) SEM Scanning electron microscopy (Kính hiển vi điện tử quét) SKD Sinh khả dụng TC Total cholesterol (Cholesterol tồn phần) TEM Transmission electron microscopy (Kính hiển vi điện tử truyền qua) TG Triglycerid Tmax Thời gian đạt nồng độ đỉnh huyết tương MỞ ĐẦU Tính cấp thiết luận án Sử dụng thuốc qua đường uống lựa chọn hàng đầu cho bệnh nhân dễ sử dụng, dễ kiểm soát liều, thuận lợi điều trị bệnh mạn tính Tuy nhiên, số thuốc khơng thể sử dụng đường uống tính thấm kém, độ tan thấp, khơng ổn định đường tiêu hóa bị chế bơm ngược thuốc Có nhiều biện pháp nghiên cứu để tăng SKD đường uống, có liposome, biết đến hệ mang thuốc, tương đồng sinh học, làm tăng sinh khả dụng cho nhiều dược chất Berberin (BBR) dược chất sử dụng từ lâu để điều trị chỗ số bệnh đường tiêu hóa Gần đây, nhiều nghiên cứu cho thấy BBR có tiềm cao điều trị số bệnh như: tăng lipid máu, tiểu đường, Tuy nhiên, để có tác dụng này, BBR cần hấp thu vào tuần hoàn Trong đó, BBR có tính thấm kém, có 10% BBR hấp thu qua niêm mạc ruột Những hạn chế sinh khả dụng đường uống BBR khắc phục sử dụng hệ mang dược chất liposome Hiện chưa có nghiên cứu sử dụng hệ mang dược chất liposome để bào chế liposome BBR ứng dụng cho điều trị tăng lipid máu Vì vậy, nghiên cứu bào chế liposome BBR, đánh giá sinh khả dụng tác dụng hạ lipid máu dùng đường uống vấn đề cần thiết nhằm phát triển dạng bào chế mới, có tiềm tăng giá trị sử dụng cho BBR Mục tiêu luận án - Xây dựng cơng thức quy trình bào chế liposome berberin proliposome berberin quy mơ phịng thí nghiệm - Đánh giá sinh khả dụng đường uống liposome berberin tác dụng hạ lipid máu nội sinh liposome berberin động vật thực nghiệm Những đóng góp luận án Xây dựng cơng thức quy trình bào chế liposome BBR phương pháp tiêm ethanol hydrat hóa film Xác định cấu trúc số đặc tính liposome BBR như: KTTP nhỏ (KTTP trung bình < 200 nm) phân bố KTTP hẹp (PDI < 0,3), hiệu suất liposome hóa cao (>85%), giải phóng dược chất kéo dài môi trường đệm phosphat pH 6,8 12 Xây dựng công thức quy trình bào chế proliposome BBR phương pháp bao hạt thiết bị bao tầng sôi nhằm tăng độ ổn định, thuận lợi mở rộng quy mô hướng tới ứng dụng vào dạng thuốc dùng qua đường uống Proliposome BBR sau phân tán vào nước tạo thành liposome có đặc tính tương tự liposome BBR bào chế phương pháp hydrat hóa film, có hàm lượng dược chất cao hơn, khắc phục nhược điểm ổn định liposome Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng BBR huyết tương chuột cống Phương pháp có tính khả thi, áp dụng cho nghiên cứu SKD BBR chứng minh liposome BBR với liều tương ứng BBR 100 mg/kg có khả cải thiện SKD BBR dùng đường uống chuột cống (Cmax cao gấp 2,46 lần, AUC0-36 h cao gấp 6,28 lần so với hỗn dịch quy ước BBR) Đã chứng minh liposome BBR có khả làm hạ lipid máu nội sinh chuột nhắt tốt so với BBR tự Liposome BBR liều tương ứng với BBR 50 mg/kg 100 mg/kg làm giảm cholesterol tỉ trọng thấp (LDL-C) mức 54,11% 57,0% so với lô chứng bệnh (p < 0,001), giảm triglycerid (TG) mức 37,7% 38,2% (p < 0,05) Cấu trúc luận án - Luận án gồm 155 trang, 46 bảng, 46 hình, 165 tài liệu tham khảo Bố cục gồm: Đặt vấn đề (2 trang); tổng quan (28 trang); nguyên liệu, trang thiết bị, nội dung phương pháp nghiên cứu (25 trang); kết nghiên cứu (71 trang); bàn luận (27 trang); kết luận đề xuất (2 trang); danh mục cơng trình cơng bố liên quan đến luận án (1 trang); tài liệu tham khảo (15 trang); phụ lục (50 trang) Chương TỔNG QUAN Phần tổng quan trình bày nội dung: Khái quát chung berberin, liposome, proliposome; nghiên cứu bào chế liposome berberin proliposome berberin; nghiên cứu đánh giá SKD tác dụng hạ lipid máu in-vivo BBR, liposome BBR proliposome BBR dùng đường uống Chương NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 2.1.1 Nguyên vật liệu - Nguyên liệu, hóa chất, tá dược sử dụng nghiên cứu đạt tiêu chuẩn Dược Điển Việt Nam V, BP, USP tinh khiết phân tích dùng cho HPLC LC-MS/MS 2.1.2 Thiết bị Sử dụng thiết bị bào chế đánh giá: máy cất quay R-300, thiết bị đùn tay mini extruder, máy bao tầng sôi Mini-Glatt, máy bao tầng sôi Diosna-Minilab, máy khuấy từ, bể siêu âm, bể điều nhiệt, tủ vi khí hậu Binder KBF P, tủ sấy chân khơng, máy đo KTTP Zetasizer, thiết bị thử độ hịa tan Erweka-DT, kính hiển vi điện tử đơng lạnh cryo-EM FEI Talos Artica, kính hiển vi điện tử quét Regulus 8100, kính hiển vi điện tử truyền qua Jeol-Jem1010, kính hiển vi điện tử huỳnh quang photon Leica TCS SP8, máy đo nhiễu xạ tia X Equinox 5000, máy quang phổ hồng ngoại FTIR Spectrum TwoTM, máy sắc ký lỏng hiệu cao Agilent HPLC 1200, máy sinh hóa TC 3300 plus Teco Diagnosis, hệ thống sắc ký lỏng Acquity H-class kết hợp khối phổ Xevo TQD-Waters số thiết bị khác 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Thẩm định phương pháp định lượng berberin quang phổ UVVis, sắc ký lỏng hiệu cao sắc ký lỏng kết hợp khối phổ - Nghiên cứu tiền công thức - Nghiên cứu bào chế đánh giá số đặc tính liposome berberin - Xây dựng cơng thức quy trình bào chế proliposome berberin, nghiên cứu nâng cấp quy mô bào chế proliposome berberin từ 25 g/mẻ lên 200 g/mẻ, đánh giá số đặc tính proliposome liposome tạo thành từ proliposome, theo dõi độ ổn định xây dựng số tiêu chất lượng proliposome berberin - Đánh giá sinh khả dụng in-vivo động vật thí nghiệm liposome berberin tạo thành từ proliposome berberin - Đánh giá tác dụng hạ lipid máu nội sinh động vật thí nghiệm liposome berberin tạo thành từ proliposome berberin 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3.1 Thẩm định phương pháp định lượng 2.3.1.1 Thẩm định khoảng nồng độ tuyến tính phương pháp định lượng berberin quang phổ hấp thụ UV-Vis Xác định bước sóng cực đại hấp thụ, xây dựng đường chuẩn biểu diễn mối tương quan độ hấp thụ nồng độ BBR 2.3.1.2 Thẩm định phương pháp định lượng sắc ký lỏng hiệu cao Phương pháp định lượng BBR HPLC lựa chọn với điều kiện sắc ký: cột sắc ký Inertsil®-ODS3, 250 x 4,6 mm, kích thước hạt nhồi µm Pha động hỗn hợp acetonitril : dung dịch đệm KH2PO4 0,033M = 48:52, lọc qua màng lọc kích thước lỗ lọc 0,45 µm Tốc độ dịng: 1,0 ml/phút Thể tích tiêm mẫu: 10 µl Detector UV-Vis phát bước sóng 350 nm Thẩm định phương pháp định lượng dựa vào tiêu: tính thích hợp hệ thống, tính chọn lọc-độ đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ độ xác 2.3.1.3 Thẩm định phương pháp định lượng berberin huyết tương chuột cống Phương pháp kết tủa protein sử dụng để chiết BBR huyết tương Chuẩn nội glibenclamid Định lượng BBR huyết tương phương pháp LC-MS/MS Điều kiện sắc ký gồm có cột C18 với kích thước cột 50 x 2,1 mm, kích thước hạt nhồi 1,7 μm, nhiệt độ cột 40oC Pha động hỗn hợp acetonitril : acid formic 0,1% (60:40) Tốc độ dòng 0,2 ml/phút Thể tích tiêm mẫu μl Thẩm định phương pháp định lượng: tiến hành theo hướng dẫn EMA FDA định lượng dược chất dịch sinh học dựa tiêu chí: phù hợp hệ thống, tính chọn lọc - đặc hiệu phương pháp, khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, độ đúng, độ xác ngày khác ngày, độ xác pha loãng, tỉ lệ thu hồi, ảnh hưởng mẫu, độ ổn định Mơ hình gây tăng lipid máu nội sinh: Vào ngày thứ 10, chuột nhóm tiêm phúc mạc nước muối sinh lý, chuột nhóm cịn lại tiêm dung dịch poloxame 407 2% nước muối sinh lý với liều 200 mg/kg cân nặng Phương pháp lấy mẫu xử lý mẫu: lấy 0,25 ml máu tĩnh mạch xoang mắt cho vào ống Eppendorf 2ml, để lắng 30 phút ly tâm 3500 vòng/phút thời gian 15 phút oC, lấy huyết chuyển sang ống Eppendorf khác bảo quản – oC q trình phân tích thơng số lipid máu Phương pháp định lượng: Nồng độ TC, LDL-C, HDL-C TG định lượng sử dụng kít enzym với thiết bị phân tích hóa sinh bán tự động TC-3300 Plus Phương pháp phân tích số liệu: Số liệu nồng độ TC, LDL-C, HDL-C TG huyết phân tích phần mềm Microsoft excel, SPSS 20.0 So sánh khác biệt lô thử so với lô chứng kiểm định student t-test Các giá trị p < 0,05 coi khác có ý nghĩa thống kê Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG 3.1.1 Thẩm định khoảng nồng độ tuyến tính phương pháp định lượng berberin quang phổ hấp thụ UV-Vis Kết thẩm định cho thấy có phụ thuộc tuyến tính mật độ quang nồng độ BBR bước sóng 350 nm (dung mơi ethanol 96%) bước sóng 343 nm (dung mơi nước cất) khoảng nồng độ khảo sát với hệ số tương quan r = 0,995 cho dung môi Như vậy, sử dụng phương pháp UV-Vis để định lượng nhanh nồng độ BBR nghiên cứu bào chế 10 3.1.2 Thẩm định phương pháp định lượng berberin phương pháp HPLC Kết thẩm định phương pháp định lượng BBR HPLC cho thấy phương pháp có tính thích hợp hệ thống độ đặc hiệu với BBR Trong khoảng nồng độ khảo sát, có tương quan tuyến tính diện tích pic nồng độ BBR Phương pháp có độ cao (phần trăm tìm lại từ 100,0% -101,1%) độ xác với RSD < 2% Như vậy, phương pháp HPLC sử dụng để định lượng hàm lượng BBR mẫu nghiên cứu, xây dựng tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định 3.1.3 Thẩm định phương pháp định lượng berberin huyết tương chuột phương pháp sắc ký lỏng kết hợp khối phổ (LC-MS/MS) Phương pháp định lượng BBR huyết tương chuột LCMS/MS có tính thích hợp, tính chọn lọc-độ đặc hiệu, khoảng tuyến tính (0,2 -25 ng/ml), giới hạn định lượng dưới, độ đúng, độ xác ngày khác ngày, độ xác pha lỗng, tỷ lệ thu hồi, ảnh hưởng mẫu, độ ổn định đáp ứng yêu cầu phương pháp phân tích nồng độ thuốc dịch sinh học 3.2 NGHIÊN CỨU TIỀN CÔNG THỨC 3.2.1 Kết đánh giá số đặc tính dược chất BBR tồn dạng tinh thể, gây nhiễu xạ đặc trưng với vạch nhiễu xạ sắc nhọn, cường độ từ trung bình đến mạnh vị trí 9,1o; 9,7o; 13,4o, 16,7o; 25,8o 2θ Phổ hồng ngoại BBR thể dao động đặc trưng chủ yếu nhóm chức oxyd thơm, vịng ni-tơ cạnh ether oxyd BBR có khả phát huỳnh quang với phổ phát quang môi trường nước bước sóng từ 460 nm đến 800 nm mơi trường ethanol từ 470 nm-670 nm 11 3.2.2 Kết nghiên cứu tương tác dược chất với tá dược Sau tháng bảo quản điều kiện theo dõi, chưa có tương kỵ ảnh hưởng đến độ ổn định dược chất BBR với tá dược HSPC, DSPG, alpha-tocopherol, NaDC, manitol 3.3 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ LIPOSOME BERBERIN 3.3.1 Thiết kế công thức Công thức bào chế liposome thiết kế cách phối hợp dược chất BBR với tá dược theo tỉ lệ mol khác BBR : lipid : NaDC : -tocopherol (9 : : : 0; : : : 3; : : : 2; : : : 0; : : : 0; : : : 3) Trong thành phần lipid gồm HSPC DSPG với tỉ lệ mol thay đổi từ 7:3 đến 6:4 3.3.2 Bào chế liposome berberin phương pháp tiêm ethanol Kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng thuộc quy trình bào chế lựa chọn thông số bào chế sau: nhiệt độ phối hợp pha 65oC, loại bỏ dung môi với khoảng nhiệt độ cất quay từ 60-65oC, áp suất cất quay 180 mbar Kết khảo sát yếu tố thuộc cơng thức cho thấy, mẫu có tham gia NaDC -tocopherol hiệu suất nạp có xu hướng tăng, KTTP nhỏ, phân bố KTTP hẹp Tỉ lệ mol BBR tăng hiệu suất nạp dược chất giảm từ 64,9% đến 55,9% Tỉ lệ mol HSPC:DSPG có ảnh hưởng đến hiệu suất nạp dược chất, tỉ lệ cho hiệu suất nạp cao HSPC:DSPG = 4:6 3.3.3 Bào chế liposome berberin phương pháp hydrat hóa film Kết khảo sát ảnh hưởng thành phần cấu tạo liposome cho kết tương tự phương pháp tiêm ethanol: tham gia NaDC -tocopherol làm giảm KTTP liposome Tuy nhiên KTTP phân bố KTTP liposome bào chế phương 12 pháp hydrat hóa film lớn so với phương pháp tiêm ethanol nên nghiên cứu lựa chọn biện pháp làm giảm KTTP đùn 60 lần qua màng lọc polycarbonat kích cỡ lỗ lọc 400 nm (sau đùn KTTP < 250nm phân bố KTTP 85% Đề xuất số tiêu chuẩn chất lượng Bảng 3.27 Dự kiến tiêu chuẩn chất lượng proliposome BBR dựa kết lô liên tiếp Chỉ tiêu Hình thức Mất khối lượng làm khơ Dự kiến tiêu chuẩn Hạt màu vàng Cảm quan ≤ 5,0 Theo Dược điển Việt (%) Khối lượng riêng biểu kiến nam V, phụ lục 9.6 ≥ 0,350 (g/ml) Định tính Phương pháp thử Theo Dược điển Việt nam V, phụ lục 9.13 Sắc ký đồ mẫu thử Sắc ký lỏng hiệu phải có pic có thời gian cao lưu trùng với thời gian lưu pic BBR chuẩn Hàm lượng BBR 13,5 – 16,5 Sắc ký lỏng hiệu proliposome (%) Phần trăm giải phóng dược chất môi trường pH 6,8 cao Trong đầu: < 40% Phép thử giải phóng Trong đầu: 50-65% dược chất qua màng Sau 10 giờ: ≥ 70% thẩm tích Liposome BBR hồn ngun từ proliposome BBR: ≤ 500 (d.nm) Tán xạ ánh sáng động + PDI ≤ 0,5 Phương pháp siêu lọc + Hiệu suất liposome hóa (%) ≥ 70 kết hợp với ly tâm + KTTP trung bình 19 3.4.5 Nghiên cứu độ ổn định proliposome berberin Sau tháng bảo quản điều kiện thực điều kiện lão hóa cấp tốc, proliposome BBR giữ hình thái cấu trúc bề mặt Trạng thái lý hóa, khối lượng làm khơ khơng thay đổi Hàm lượng BBR có thay đổi nằm giới hạn cho phép Giải phóng dược chất, KTTP hiệu suất liposome hóa liposome tạo thành không thay đổi so với ban đầu A B Hình 3.34 Hình thái liposome tạo thành từ proliposome BBR sau tháng bảo quản điều kiện thực (A) điều kiện LHCT (B) quan sát kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM), độ phóng đại 20.000 lần 3.5 ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VIVO CỦA LIPOSOME BERBERIN Kết đánh giá SKD in-vivo cho thấy giá trị thông số dược động học giai đoạn hấp thu nhóm uống liposome BBR cao đáng kể so với nhóm uống hỗn dịch quy ước BBR (Cmax cao gấp 2,46 lần, AUC0-36 h cao gấp 6,28 lần, AUC0-∞ cao gấp 5,53 lần ) 20 Hình 3.35 Đường biểu diễn nồng độ trung bình BBR huyết tương chuột theo thời gian nhóm uống hỗn dịch quy ước BBR nhóm uống liposome BBR liều tương đương 100 mg/kg 3.6 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ LIPID MÁU NỘI SINH CỦA LIPOSOME BERBERIN Kết đánh giá tác dụng làm giảm lipid máu nội sinh liposome BBR cho thấy liposome BBR với liều tương ứng BBR 50 mg/kg cân nặng có tác dụng làm giảm số lipid máu chuột nhắt với LDL-C giảm 54,1% (p