CHƯƠNG 3 Bệnh Sài sốt Chó Để biết thêm thông tin, truy cập địa chỉ http www grectiousdiseases com về tài liệu tham khảo, hình ảnh, bảng biểu và các phụ lục TÁC NHÂN GÂY BỆNH (ETIOLOGY) Virus.CHƯƠNG 3 Bệnh Sài sốt Chó Để biết thêm thông tin, truy cập địa chỉ http www greenectiousdiseases com về tài liệu tham khảo, hình ảnh, bảng biểu và các phụ lục TÁC NHÂN GÂY BỆNH (ETIOLOGY) Virus.
CHƯƠNG Bệnh Sài sốt Chó Để biết thêm thơng tin, truy cập địa http://www.greeneinfectiousdiseases.com: tài liệu tham khảo, hình ảnh, bảng biểu phụ lục TÁC NHÂN GÂY BỆNH (ETIOLOGY) Virus bệnh sài sốt chó (canine distemper virus – CDV) thành viên giống (genus) Morbillivirus thuộc họ (family) Paramyxoviridae có liên quan gần với virus khác (xem Bảng Trang mạng 3-1) CDV có đường kính tương đối lớn, biến thiên (150 đến 250 nm) với RNA kết sợi đơn chiều âm (single negative-stranded RNA) bao bọc vỏ bao nucleocapsid có đối xứng xoắn ốc (helical symmetry) Vỏ bao bọc lớp lipoprotein lấy từ màng tế bào kết hợp với glycoproteins H virus (là dạng protein bám dính) protein F (là dạng protein tan chảy) (Hình 3-1 Bảng Trang mạng 32) Các virus CDV mã hóa cho proteins có khả tích hợp vào màng tế bào, làm cho tế bào bị nhiễm trở nên dễ tổn thương trình dung giải tế bào qua trung gian miễn dịch CDV thúc đẩy tan chảy tế bào (cellular fusion, trình hình thành hợp bào – syncytial formation) Quá trình thúc đẩy hợp bào bao gồm tương tác phức tạp protein virus với protein tế bào ký chủ 316 xảy dịng CDV có khả gây chết tế bào theo lập trình (cellular apoptosis) 211 CDV tương tác tế bào xem xét để giải thích hậu khác nhiễm CDV Phân tử mang tín hiệu kích hoạt tế bào lâm ba(signaling lymphocyte activation molecule –SLAM hay CD 150) glycoprotein màng thụ thể cho morbilliviruses, phân tử bộc lộ bề mặt tế bào hệ thống miễn dịch bao gồm tế bào tuyến giáp chưa thành thục (immature thymocytes), tế bào lâm ba (lymphocytes) bạch cầu đơn nhân (monocytes) kích hoạt, tế bào trình bày kháng ngun chín muồi (mature dendritic cells) CDV có độc lực kết nối chọn lọc đến SLAM tế bào miễn dịch qua protein H F, giúp cho chúng phát tán nhanh chóng mơ lâm ba(lymphoid tissues) 312 Ức chế miễn dịch xảy không dung giải tế bào virus, mà cịn CDV có độc lực ức chế tế bào lâm ba đáp ứng chất tiết bạch cầu (interferon – IFN) chất tiết tế bào (cytokine), qua thể gen P sinh protein độc lực V C 312 Trong não, CDV kết nối với thụ thể chưa biết rõ305 gây bệnh nhiễm dai dẳng không dung giải tế bào 229,230 Trong đáp ứng với nhiễm CDV cấp tính, xảy điều chỉnh tăng SLAM tế bào miễn dịch chó xâm nhập đến hệ thần kinh trung ương, mà có thểlàm khuyếch đại thêm q trình nhân virus não.315 Ngược lại với CDV có độc lực, dịng CDV vaccin làm thích nghi với tế vào Vero (Vero-cell adapted CDV vaccine strains) có khả gây bệnh thấp kết nối đến thụ thể giống tế bào gan (heparin-like cell receptors) thấy tế bào không tạo miễn dịch, tế bào nuôi cấy từ mô biểu bì 98 Do tế bào khơng có thụ thể thích hợp, CDV có độc lực khơng phát triển tốt lớp tế bào nuôi, tế bào Vero, làm khó khăn cho việc phân lập phịng xét nghiệm 163,165 Hơn nữa, dịng CDV có độc lực gây bệnh nhiễm mãn tính dai dẳng nội bào hệ thần kinh trung ương, cách giảm tan chảy hợp bào giảm dung giải tế bào.229,230 Xem nội dung viêm não bán cấp tính đến mãn tính phần Sinh bệnh học Ngược lại, dịng Onderstepoort dùng chế tạo vaccin, dễ dàng cấy truyền ngoại mơi trường, có cấu trúc protein F khác biệt gây tan chảy hợp bào mạnh mẽ, dẫn đến dung giải tế bào Sự gia tăng nhân phóng thích virus từ tế bào dẫn đến đáp ứng kháng thể tiêu diệt virus vaccin ký chủ, bệnh nhiễm tự khỏi hay bị nhiễm dạng nhược độc (attenuated infection) nhiễm virus vaccin Ngược lại, việc giảm thể gen F phóng thích khỏi tế bào dịng CDV có độc lực dẫn đến virus tồn dai dẳng xâm nhập đến tế bào thần kinh, với mức độ chậm thể dấu hiệu thần kinh.229 Các tái tổ hợp biến đổi gen di truyền để gia tăng thể gen F dẫn đến nhược độc CDV có độc lực với chồn áp dụng tương lai để phát triển dịng virus vaccin.15 Dù có khác biệt nhỏ gen di truyền, dòng phân lập (isolate) CDV tương đồng huyết học (serologically homogeneous) Tuy nhiên, dòng khác khác khả gây bệnh, ảnh hưởng đến mức độ nặng nề thời gian hay dạng bệnh lâm sàng Một số dòng phân lập, Snyder Hill, A75/17, R252, có độc lực cao có hướng tế bào thần kinh (neurotropic) Dòng Snyder Hill gây viêm chất xám (polioencephalomyelitis) não tủy sống, dòng R252 gây tổn hại vỏ bao thần kinh (demyelination) Các dịng khác có khả khác gây bệnh tích hệ thần kinh trung ương Ngồi protein F nêu trên, đặc tính protein mà hóa gen N M ảnh hưởng đến khả tồn virus 282 khả gây bệnh hệ thần kinh trung ương CDV có nhạy cảm với tia cực tím, lớp protein bao ngồi hay chất chống oxy hố môi trường sống chúng giúp bảo vệ khỏi bị bất hoạt CDV mẫn cảm nhiệt khô hạn, bị tiêu diệt nhiệt độ từ 50° C đến 60° C 30 phút Trong mẫu mơ hay dịch tiết, virus sống sót 37° C 20° C (nhiệt độ phịng) Trong khí hậu ấm nóng, CDV khơng tồn lâu dài chuồng ni sau chó bị nhiễm chuyển Các thời gian sống sót bảo quản lâu nhiệt độ lạnh Ở gần nhiệt độ đông đá (0°C đến 4°C), virus sống môi trường đến hàng tuần Ở nhiệt độ đông đá, virus bền bỉ, sống sót -65° C năm Đông khô (lyophilization) làm giảm độ bền bỉ virus phương cách tốt cho dự trữ virus để chế tạo vaccin thương mại sử dụng phịng thí nghiệm CDV cịn sống độ pH từ 4,5 đến 9,0 Là virus có vỏ bao, chúng có mẫn cảm với ether chloroform, dung dịch formalin (thấp 0,5%), phenol (0,75%), chất sát trùng nhóm quaternary ammonium (0,3%) Các thủ tục khử trùng thơng thường có hiệu tiêu diệt CDV chuồng ni hay phịng khám (xem Chương 93) Bệnh phổ ký chủcủa CDV bao gồm số loài ăn thịt sống cạn (terrestrial carnivores, xem Bảng Trang mạng 3-1 Bảng 3-1) loài khác bị nhiễm thực nghiệm với mức độ mẫn cảm khác 20 Các dấu hiệu thần kinh gây chuột bạch (mice) chuột lang (hamster) cấy vào sọ não Thỏ chuột thí nghiệm (rat) có đề kháng với cấy gây bệnh theo đường nhu mô Bệnh không rõ rệt, tự khỏi, xảy mèo nhà, loài linh trưởng người (nonhuman primates), người, cấy nhu mơ gây bệnh CDV có độc lực, giống chó cấp vaccin virus làm biến đổi gen (modified live virus – MLV) Các loài linh trưởng người Cựu Thế Giới (nonhuman old-world primates, Macaca fuscata Macaca mulatta) bị nhiễm tự nhiên.285,328 Trong năm qua, phổ ký chủ bệnh thể lan rộng thành truyền lây loài xảy tái tổ hợp virus, dẫn đến bệnh dịch địa phương (epizootics) với tỷ lệ tử vong cao.68,127,129,292 Các biến đổi phân tử gen hemagglutinin chịu trách nhiệm cho phát tán CDV đến ký chủ chó điều kiện tự nhiên.187,330 Mặc dù cóphổ ký chủ rộng, chó ký chủ tàng trữ cho CDV, có khả làm nguồn tàng trữ mầm bệnh tự nhiên 62,129 Một số loài hoang dã, gấu trúc Mỹ (raccoons: Procyon lotor) chồn marten (Martes spp.) đóng vai trị nguồn tàng trữ cho quần thể cho có mẫn cảm.146,205 Bệnh thần kinh trung ương họ Mèo hoang dã giống lớn ngoại lai cho bị nhiễm CDV* (xem phần Bệnh nhiễm Paramyxovirus họ Mèo, Chướng 16) Heo (Suis domestica) bị nhiễm cận lâm sàng (subclinically infected), heo rừng peccary (Tayassu tajacu) bị nhiễm tự nhiên phát triển viêm não (encephalitis) 21 Viêm não ghi nhận khỉ bị nhiễm tự nhiên 328 Bệnh nhiễm cận lâm sàng ghi nhận voi Châu Á (Asian elephant: Elephas maximus).217 Phocine distemper virus, loài thuộc giống Morbillivirus (gây bệnh hải cẩu) có liên quan gần gũi với CDV, số dòng hoang dã CDV gây tỷ lệ mắc bệnh cao chó biển (seal) vùng Baikal (Phoca sibirica) vùng Caspian (Phoca caspica) seals (xem Bảng Trang mẹng 3-1 Bảng 3-3).93,151,160 Virus lây lan đến chó biển từ chó hay lồi ăn thịt cạn khác có mẫn cảm Phân tích gen di truyền dịng gây ổ dịch cho thấy CDV khơng trở nên có độc lực lan tràn đến loài ký chủ vùng, dịng có lưu hành thú vật có mẫn cảm thuộc vài lồi ký chủ vùng địa lý định.42,52,129 Các loài khác morbilliviruses có liên quan gần gũi gây bệnh loài thú vật sống nước (cá heo dolphins cá heo porpoises), chúng có liên quan gần với morbilliviruses thú nhai lại *Các tham khảo 21, 197, 203, 235, 246, 276, 320 DỊCH TỄ HỌC (EPIDEMIOLOGY) Thải tiết virus xảy khoảng ngày sau cấy gây nhiễm thực nghiệm (postinoculation [PI]) CDV có nhiều xuất dịch hơ hấp, thường phát tán theo khí dung hay theo nhiễm chất tiết; nhiên, virus phân lập từ hầu hết mô chất tiết thể, bao gồm nước tiểu Truyền nhiễm qua thai xảy chó mẹ bị nhiễm virus huyết Virus thải tiết thời gian 60 đến 90 ngày sau bị nhiễm, thường thải tiết thời gian ngắn Tiếp xúc thú bị nhiễm (cận lâm sàng hay phát bệnh) tạo trì virus quần thể, nguồn cung cấp đặn chó giúp cung cấp quần thể có mẫn cảm cho bệnh nhiễm Mặc dù miễn dịch virus bệnh sài sốt chó kéo dài hay suốt đời, độ dài miễn dịch không chắn sau chủng ngừa vaccin Chó khơng chủng ngừa định kỳ bị bảo hộ trở nên bị nhiễm sau gặp tình trạng căng thẳng (stress), ức chế miễn dịch (immunosuppression), hay tiếp xúc đường miệng với cá thể bị bệnh Dựa vào kết giám sát huyết học, tỷ lệ nhiễm cho cao so với tỷ lệ bệnh, 66 phản ánh số thể mức độ miễn dịch tự nhiên vaccin quần thể chó Nhiều chó có mẫn cảm trở nên bị nhiễm cận lâm sàng, có khả quét virus thể mà dấu hiệu bệnh Mặc dù hầu hết chó khỏi bệnh quét hoàn toàn virus, số chó cịn chứa chấp virus hệ thần kinh trung ương HÌNH 3-1 Cấu trúc virus bệnh sài sốt chó (canine distemper virus) (E, Vỏ bao ngồi lipoprotein; F, fusion protein; H, hemagglutinin [neuraminidase]; L, dạng protein lớn; M, dạng protein sinh chất – matrix protein; N nucleocapsid; P, polymerase protein.) (Art by Craig Greene © 2004 University of Georgia Research Foundation Inc.) BẢNG 3-1 Các loài ăn thịt cạn có mẫn cảm với Bệnh sài sốt chóa,b Bộ (Order) Mơ tả (Description) Ailuridae Gấu trúc nhỏ (Lesser panda) Sói đồng cỏ (coyote), chó hoang dingo, lửng Canidae chó (raccoon dog), chó sói (wolf), cáo (fox) Mustelidae Chuồn sương (ferret), chồn marten, chồn mink, rái cá (otter), chồn wolverine, lửng badger Mephitidae Chồn hôi (skunk) Procyonidae Chồn coati, gấu kinkajou, gấu raccoon Ursidae Gấu (bear), gấu trúc lớn (giant panda) Viverridae Cầy hương sống (binturong), cầy fossa, cầy linsang, cầy civet Herpestidae Cầy mangut (mongoose),chồn đất meerkat Felidae (loài to lớn) Báo (cheetah), sư tử (lion), báo đốm (jaguar), mèo rừng (margay), mèo rừng ocelot a Bệnh nhiễm cận lâm sàng xảy lồi khơng ăn thịt voi Châu Á heo rừng họ Tayassuidae (peccaries) Thông tin từ tham khảo 20 217 b Cũng xem Bảng 100-10 để biết hướng dẫn chủng ngừa vaccin cho loài thú Tỷ lệ lưu hành tự nhiên bệnh sài sốt chó quần thể chó giới cao chó từ đến tháng tuổi, liên quan đến khơng cịn kháng thể mẹ truyền (maternal derived antibodies – MDAs) chó sau caisữa Ngược lại, quần thể chó có mẫn cảm riêng biệt, bệnh nặng nề lan rộng, ảnh hưởng đến tất lứa tuổi Có nghi ngờ gia tăng khả mẫn cảm giống, chưa chứng minh Các giống chó mũi ngắn (brachicephalic dogs) báo cáo có lưu hành, tỷ lệ tử vong hậu bệnh thấp so với chó mũi dài (dolichocephalic dogs) Bệnh nhiễm lúc, nhiễm CDV canine adenovirus (CAV)-2, gây viêm phổi tử vong chó con.245 SINH BỆNH HỌC (PATHOGENESIS) Bệnh nhiễm tồn thân (Systemic Infection) Trong q trình phơi nhiễm tự nhiên, CDV phát tán giọt khí dung tiếp xúc biểu bì đường hơ hấp (Hình Trang mạng 3-1, Hình 3-2 A, B) Trong vịng 24 sau bị nhiễm, virus nhân đại thực bào lây lan tế bào qua đường bạch huyết cục bộ, đến hạch hạnh nhân (tonsil) hạch lâm ba phế quản (bronchial lymph nodes) Các nghiên cứu ban đầu chó 16 lặp lại chồn (ferrets), CDV có độc lực lợi dụng ưu điểm bề mặt màng nhày để xâm nhập vào ký chủ, phát tán nhanh chóng đến tế bào lâm ba cách nhận biết thụ thể SLAM tế bào lâm ba này.312 Lúc 2đến ngày sau bị nhiễm, số lượng virus gia tăng hạch hạnh nhân hạch lâm ba sau hầu họng (retropharyngeal lymph nodes) hạch lâm ba phế quản (bronchial lymph nodes), thấy có số lượng bạch cầu đơn nhân bị nhiễm CDV quan lâm ba khác 16 Từ ngày đến ngày sau bị nhiễm, nhân virus xảy nang lâm ba (lymphoid follicles) lách (spleen), mô lâm ba liên quan đến ruột lớp mô đệm (lamina propria) dày ruột non, hạch lâm ba màng treo ruột (mesenteric lymph nodes), tế bào Kuffer gan Tăng sinh lan tràn virus mô lâm ba tương ứng với gia tăng ban đầu thân nhiệt giảm bạch cầu máu (leukopenia) từ ngày đến ngày sau bị nhiễm Tình trạng giảm bạch cầu máu chủ yếu giảm tế bào lâm ba máu (lymphopenia) virus gây tổn hại đến tế bào lâm ba, ảnh hưởng đến tế bào lâm ba T lâm ba B Tình trạng lan tràn CDV đến mơ biểu bì thần kinh trung ương vào ngày đến sau bị nhiễm qua đường máu, qua trung gian tế bào bị nhiễm giai đoạn nhiễm virus máu, tùy thuộc vào tình trạng miễn dịch qua trung gian tế bào hay qua trung gian thể dịch (xem Hình 3-2 A) Thải tiết virus từ tất chất tiết thể bắt đầu lúc virus lan tràn đến biểu bì, kể chó bị nhiễm cận lâm sàng Đến ngày 14 sau bị nhiễm, thú có đủ hiệu giá kháng thể kháng CDV chế gây độc tế bào qua trung gian tế bào (cell-mediated cytotoxicity) qt virus khỏi hầu hết mơ, chó khơng cịn thể dấu hiệu bệnh Kháng thể IgG đặc hiệu với CDV có hiệu trung hịa CDV ngồi tế bào ức chế lan tràn virus tế bào Chó có mức độ trung bình đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào, với chậm sản sinh hiệu giá kháng thể từ ngày đến ngày 14 sau bị nhiễm, có virus lan tràn đến mơ biểu bì Các dấu hiệu lâm sàng phát giảm dần theo gia tăng hiệu giá kháng thể, virus bị quét khỏi hầu hết mơ thể Tuy nhiên, virus tồn dai dẳng thời gian mô giác mạc (uveal tissues) sợi thần kinh (neurons) lớp da bao (integument), bàn chân (footpads).118419422 Sinh bệnh học trình nhân tồn dai dẳng CDV bàn chân chó nghiên cứu nhiều Các bệnh tích vi thể gồm tăng sinh hóa sừng (hyperkeratosis) giả hóa sừng (parakeratosis) với hình thành mạch máu, mủ thể vùi.221 Virus xâm nhập vào biểu bì bàn chân giai đoạn nhiễm virus máu gây tăng sinh lớp tế bào sinh sừng (basal keratinocytes), dẫn đến thấy tăng sinh hóa sừng; nhiên, khơng cịn thấy virus lẫn nucleic acid virus tồn 88,120,122 Tình trạng trú đóng biểu bì virus có liên quan đến số dòng CDV thuộc chủng hoang dã (wild-type CDV strains) mà gây bệnh nhiễm không độc tế bào (noncytocidal infection) tế bào sinh sừng bàn chân, nghiên cứu ngoại môi trường chó gây nhiễm thực nghiệm 88,120,122 Chất tiết tế bào (cytokine) tăng lên tế bào biểu bì bàn chân bị nhiễm virus 118,119 Các biến đổi kết chuỗi protein gen H có liên quan đến q trình thích ứng virus.243 Chó khỏi bệnh nhiễm CDV có miễn dịch kéo dài ngưng thải tiết virus Bảo hộ bị chó bị phơi nhiễm với virus độc lực cao hay số lượng lớn virus, chó bị trở nên miễn dịch (immunocompromised) bị căng thẳng HÌNH 3-2 A, Thứ tự sinh bệnh học bệnh nhiễm CDV CDV xâm nhập vào đường hô hấp qua khí dung trú đóng mơ lâm ba hạch hạnh nhân (tonsil) Nhân ban đầu diễn hạch hạnh nhân, hạch lâm ba sau hầu họng (retropharyngeal nodes), hạch lâm ba phế quản (bronchial lymph nodes), mô lâm ba đường dày ruột (gastrointestinal – GI) Từ vị trí nhân ban đầu, đại thực bào chứa CDV vào mạch bạch huyết lên đến đầu, đại thực bào vào máu trở thành bạch cầu đơn nhân liên quan đến nhiễm virus huyết (mononuclear cell-associated viremia) Virus vào hệ thần kinh trung ương qua mạch máu não Ở virus tích tụ vùng xung quanh mao mạch Cách khác, virus vào mạch máu màng não (choroid plexus) cuối vào đến dịch não tủy hệ thống não thất Do tượng bất thường chó, CDV di chuyển từ đường mũi, qua phiến xương lỗ (cribiform plate) lần theo thần kinh khứu giác (olfactory nerve) đến mấu khứu giác (olfactory bulb) thần kinh trung ương Ở virus trú đóng, chủ yếu thùy hình lê (pyriform lobes) vùng đám rối màng trạch vỏ não (Các hình A, B, D Kip Carter © 2010 University of Georgia Research Foundation Inc.) Cịn tiếp HÌNH 3-2 (Tiếp theo) B Phá hủy vỏ bao thần kinh cấp tính khơng gây viêm (acute noninflammatory demyelination) Bệnh tích thấy điển hình chó miễn dịch kháng CDV Lượng lớn virus thấy tế bàodi hành Virus vào hệ thần kinh trung ương nhờ bạch cầu đơn nhân đám rối màng trạch, virus xâm nhập nhân tế bào biểu bì đám rối màng trạch Sau dung giải tế bào, virus tự vào dịch não tủy, chúng tràn nhiễm đến tế bào màng xoang não (ependymal cells) Cách khác, bạch cầu đơn nhân bị nhiễm vào hệ thần kinh trung ương qua thành mạch máu bị tổn thương vùi vào bề mặt tế bào màng xoang não Một vào đến tế bào màng xoang não, virus vào tế bào hình (astrocyte) trình tiếp xúc trực tiếp với tua tế bào hình Virus nhân tế bào hình tạo nên số lượng lớn hạt virus trần trụi (nucleocapsids: hạt chứa nucleic acid virus) bào tương Các hạt nucleocapsid CDV lọt ngồi tế bào hình lây lan đến tế bào hình kế cận, đến tế bào tua nối sợi thần kinh (oligodendroglial cells), đến sợi thần kinh (neurons) Trong tế bào tua nối sợi thần kinh số sợi thần kinh, trình nhiễm có giới hạn (giải mã – transcription mà khơng có biên dịch – translation) xảy tế bào tua nối sợi thần kinh dẫn đến hủy hoại ban đầu vỏ bao sợi thần kinh (primary demyelination) C, Hình chụp dạng bệnh tích mơ tả Hình B thể vùng bị hủy hoại vỏ bao sợi thần kinh cấp tính khơng viêm (mũi tên) (Nhuộm màu miễn dịch cho protein vỏ bao sợi thần kinh – myelin-basic protein immunostain x20) Còn tiếp HÌNH 3-2, (Tiếp theo) D Sưng dày quanh thành mạch máu (perivascular cuffing) với hủy hoại lớp bao sợi thần kinh Sau bị nhiễm virus, số hạt virus trần trụi tế bào hình với đáp ứng viêm tối thiểu tế bào Virus thấy tế bào tua nối sợi thần kinh số sợi thần kinh, hạt virus RNA chưa biên dịch Các kháng nguyên CDV thể bề mặt tế bào hình Phân tử mang dấu hiệu kích hoạt tế bào lâm ba (signaling lymphocyte activation molecule – SLAM) bề mặt tế bào miễn dịch tương tác với kháng nguyên virus Các đại thực bào kích hoạt tương tác với virus chuyển đến tế bào trình bày kháng nguyên (dendritic cells) di hành từ hệ thần kinh vào mao mạch đến hệ thống tuần hoàn, đến hạch lâm ba Ở đại thực bào trình bày kháng nguyên cho tế bào lâm ba T tạo nên phản ứng đặc hiệu với CDV tế bào miễn dịch khác Các tế bào lâm ba, tạo nhạy với kháng nguyên CDV, vào hệ thần kinh trung ương qua mạch máu trình huy động miễn dịch Sưng dày quanh thành mạch máu xảy với xuất tế bào lâm ba B hướng đến kháng nguyên (antigen-directed B cells) với tế bào lâm ba T CD8+ tế bào lâm ba T CD4+ Các tế bào lâm ba B tổng hợp tiết kháng thể đặc hiệu với CDV Tương tự, bạch cầu đơn nhân tạo nhạy vào vùng quanh mạch máu hệ thần kinh trung ương, gia tăng tiết xuất chất tiết tế bào (interleukin [IL]-6, IL-8, IL-12, yếu tố hay sưng hoại tử α – tumor necrosis factor-α) đáp ứng miễn dịch cao virus Kháng thể đặc hiệu với CDV tế bào lâm ba B kết nối với kháng nguyên bề mặt tế bào hình bị nhiễm, hấp dẫn bạch cầu đơn nhân/đại thực bào kích hoạt, trình bày phức hợp tương thích mơ lớp II (major histocompatibility complex class II) tăng lên thể phân tử SLAM Các phức hợp phân tử kết nối đến phần Fc kháng thể kết nối, khởi phát độc tính tế bào qua trung gian tế bào phụ thuộc kháng thể (antibody-dependent, cytotoxicity cell-mediate) Trong trình này, đại thực bào kích hoạt tiết xuất “các phân tử có hoạt tính cao” (như matrix metalloproteinases – sinh chất, các chất liên quan đến ức chế - associated inhibitors, gốc phản ứng oxy hóa - reactive oxygen radicals) Các chất thấm vào mô xung quanh, làm tổn hại thêm cho hàng rào mạch máu – não, vỏ bao sợi thần kinh (myelin) thành phần khác tế bào chế “từ bên – bystander” mechanism Vỏ bao sợi thần kinh tróc phân mảnh viêm hoại tử Các đại thực bào vùi nuốt mảnh vỏ bao sợi thần kinh thối hóa cáu cặn hoại tử theo chế dọn E Hình chụp vỏ bao sợi thần kinh viêm tróc, mơ tả hình D, vùng ngăn trước hành não (preventricular medula Sưng dày quanh mạch máu tổn hại mô xung quanh thấy hệ thần kinh chó bị nhiễm CDV (Nhuộm màu H&E, x 100) Từ ngày đến ngày 14 sau bị nhiễm, chó có tình trạng miễn dịch dẫn đến phát tán virus đến nhiều mô, bao gồm da, tuyến nội tiết ngoại tiết, biểu bì đường dày ruột, hô hấp đường tiết niệu sinh dục Các dấu hiệu lâm sàng bệnh chó thường rõ ràng nặng nề, virus thường tồn dai dẳng mô chúng chết Kết chuỗi kiện sinh bệnh học tùy thuộc vào dịng virus kéo dài từ đến tuần.284 Phụ nhiễm vi khuẩn làm gia tăng mức độ nặng nề bệnh lâm sàng Các nghiên cứu đáp ứng huyết học CDV chó bị chưa bị nhiễm (gnotobitic dogs) xác nhận hiệu giá kháng thể huyết biến thiên cao bệnh Đáp ứng kháng thể chó phân biệt theo nhân vỏ virus Chỉ chó có kháng thể kháng với vỏ bao virus ngăn chặn bệnh nhiễm virus dai dẳng hệ thần kinh trung ương Hậu nhiễm hệ thần kinh trung ương gần phụ thuộc vào diện kháng thể IgG tuần hoàn máu, kháng thể kháng với glycoprotein H virus.242 Tỷ lệ tử vong chó chưa bị nhiễm tương đương với chó bị nhiễm tự nhiên, làm giảm vai trò phụ nhiễm vi khuẩn mức độ nặng nề bệnh Tuy nhiên, vi khuẩn quan trọng làm phức tạp thêm dấu hiệu bệnh đường hô hấp đường tiêu hóa Bệnh nhiễm CDV cấp tính gây chết tế bào lâm ba theo lập trình (lymphocytic apoptosis), cạn kiệt tế bào lâm ba T, gây ức chế miễn dịch 162,312 Các nghiên cứu ghi nhận xảy ức chế miễn dịch qua trung gian tế bào sau nhiễm CDV Kiểm tra trình biến đổi tế bào lâm ba chó chưa nhiễm bệnh gây nhiễm thực nghiệm, cho thấy ức chế nặng nề đáp ứng tế bào lâm ba tác nhân gây phân bào thụ động (phytomitogens) thời điểm tương ứng với nhiễm virus huyết cấp tính giảm bạch cầu máu Ức chế giảm đáp ứng kéo dài 10 tuần chó khỏi bệnh không trở lại mức độ ban đầu chó bị chết nguyên nhân cấp tính 157 Bệnh sài sốt chó nhiễm trước sinh lúc sơ sinh nguyên nhân lỗi hỏng miễn dịch chó sống sót dẫn đến nhiễm lúc nặng nề với virus khác, parvovirus, nhiễm vi khuẩn Clostridium piliforme, hay nhiễm nguyên sinh động vật Neospora caninum.131,132 Nhiễm hệ thần kinh trung ương (Central Nervous System Infection) Quá trình xâm nhập vào hệ thần kinh xảy bị nhiễm virus huyết nặng nề, tùy thuộc vào mức độ đáp ứng miễn dịch toàn thân ký chủ Khi virus xâm nhập vào hệ thần kinh chó bị nhiễm CDV, nhiều bệnh tích vi thể xảy hệ thần kinh trung ương Ở chồn ferret, phát triển dấu hiệu lâm sàng nhiễm hệ thần kinh trung ương liên quan nhiều đến thời gian bệnh, virus xâm nhập đến hệ thần kinh trung ương, khơng phải độc lực dịng virus gây nhiễm.43 Xâm nhập phát tán virus hệ thần kinh nghiên cứu chồn ferret, sử dụng CDV có mang protein gắn huỳnh quang, thấy virus xâm nhập qua đường máu sợi thần kinh (xem Hình 3-2 A) 249,250 Khi lan tràn theo đường máu, virus xâm nhập vào nhu mô não (dạng tự do, theo tiểu cầu hay theo bạch cầu đơn nhân) xuyên qua thành mao mạch tích tụ vùng quanh mao mạch (Virchow Robin) (xem Hình 3-2 A) Virus xâm nhập theo cách thức phát tua tế bào hình quanh mạch máu hệ thần kinh trung ương, sau thấy sợi thần kinh Hơn nữa, qua hệ thống mạch máu, virus xâm nhập vào đám rối màng trạch vùng não thất thứ tư nhân tế bào biểu bì đám rối màng trạch Ở chó, virus tự hay theo tế bào lâm ba từ đám rối màng trạch xâm nhập đến dịch não tủy (cerebrospinal fluid – CSF), chúng lan tràn đến vùng trước não thất cấu trúc đệm vỏ não (subpial structures) Lan tràn virus qua đường dịch não tủy giải thích xuất sớm bệnh tích lớp đệm màng xoang não tủy (subependymal) vùng đệm vỏ não, đường thần kinh thị giác (optic tracts) sợi thần kinh thị giác, vòm gốc tủy xương (rostral medullary velum), cuống não (cerebral peduncles), tủy sống (spinal cord) 307 Với đường phát tán theo sợi thần kinh chồn ferret, virus lan tràn theo sợi thần kinh khứu giác (olfactory neurons) giai đoạn nhiễm virus huyết cao nhân số lượng lớn biểu bì màng nhày, phơi nhiễm với virus theo đường xoang mũi 250 Trong trình tăng sinh biểu bì vùng xương mía, virus xâm nhập qua xương lỗ, vào thụ thể sợi thần kinh khứu giác sau phát tán theo hướng tiến tới vào bó sợi thần kinh khứu giác (xem Hình 3-2 A) Từ đây, virus lan tràn phía sau vùng thần kinh khứu giác vào vùng hệ thống viền não (limbic system) Ở chưa rõ có hay khơng cách thức phát tán có chó Phương cách phát tán giải thích số giống chó phát triển bệnh tích xốp não lan tràn (polioencephalomalacia) cấu trúc thần kinh khứu giác (rhinencephalic structures) bao gồm thùy hình lê (pyriform lobes) thùy thái dương (temporal lobes) 177 (Xem phần mô tả triệu chứng hôn mê “nhai kẹo cao su – chewing gum” phần Các dấu hiệu lâm sàng, đây) Dạng bệnh tích tạo tiến trình bệnh hệ thần kinh trung ương tùy thuộc vào nhiều yếu tố, bao gồm lứa tuổi khả miễn dịch ký chủ thời điểm bị phơi nhiễm, đặc tính hướng thần kinh gây ức chế miễn dịch virus, thời điểm mà bệnh tích kiểm tra Viêm não cấp tính CDV (acute CDV encephalitis), mà xảy sớm tiến trình bệnh nhiễm thú non hay thú bị ức chế miễn dịch, có đặc điểm nhân trực tiếp virus tổn thương Kháng nguyên CDV RNA thông tin (messenger RNA – mRNA) phát thấy bệnh tích CDV gây đa bệnh tích chất xám chất trắng Các bệnh tích chất xám kết nhiễm đến sợi thần kinh hoại tử, dẫn đến bệnh tích xốp não lan tràn Tuy nhiên, bệnh nhiễm sợi thần kinh xảy với chứng tối thiểu dung giải tế bào Trong giai đoạn cấp tính bệnh nhiễm thú bị cạn kiệt lâm ba, chết hoại tế bào theo lập trình nhiễm virus huyết (viremia-induced apoptosis), chủ yếu nhắm đến tế bào CD4+ 297,321,322 Do thời gian đầu bệnh lâm sàng thường thấy sưng dày quanh mạch máu (perivascular cuffing) Dù khơng có dấu hiệu điển hình viêm, thấy có gia tăng rõ rệt tế bào lâm ba T dạng CD8+ khắp hệ thần kinh trung ương chó bị bệnh sài sốt cấp tính, đáp ứng với diện protein vỏ bao CDV gia tăng chất tiết bạch cầu (interleukin [IL]-8) 294,297 Điều giải thích phần cạn kiệt tế bào CD4+ thời gian đầu kéo so với cạn kiệt tế bào CD8+ 297 Trong nghiên cứu viêm não cấp tính CDV chó, virus thể phân bố lan tràn hay bệnh, kết dương tính phải kết hợp với chẩn đoán lâm sàng hay bệnh học Tuy nhiên, độ nhạy PCR cao, kết dương tính mẫu máu hay phân, hay mẫu tăm xoang mũi hay màng tiếp hợp thể chó bị nhiễm tự nhiên hay thực nghiệm, với bệnh lâm sàng nhẹ hay hiện, sau chủng ngừa vaccin virus sống làm biến đổi.145,152 Độ nhạy PCR gia tăng thêm áp dụng phương pháp kết ổ (nested PCR) 145 Hầu hết kết PCR không phân biệt virus tự nhiên với virus vaccin, bệnh sử sử dụng vaccin hay phương pháp PCR dùng phân biệt cần thiết cho diễn giải xác kết chẩn đốn Các kết PCR dương tính vịng ngày sau bị nhiễm tự nhiên, dương tính thời gian dài sau chủng ngừa vaccin.145,152 Hơn nữa, giá trị PVR trở nên có giá trị cho chẩn đốn trước chết; kỹ thuật khơng chuẩn hóa cho phương pháp hay độ xác kết * Các tham khảo 10, 11, 60, 96, 263, 311 Các nghiên cứu với PCR lai ghép nucleic acid, sử dụng đoạn thăm dò RNA kết sợi đơn (single-stranded RNA probes) thực để phát virus có độc lực mơ ni cấy mẫu mơbào học (xem Hình Trang mạng 3-3) 332 Tương tự phương pháp xét nghiệm kháng thể huỳnh quang trực tiếp (direct FA), mRNA virus phát mẫu bàn chân chó bị bệnh 120,122 PCR có hiệu phát CDV mẫu mô thần kinh thấm paraffin.255,277 PCR nhạy so với hóa miễn dịch mơ bào việc phát CDV hệ thần kinh chó bệnh bán cấp tính hay mãn tính 150 Một kết PCR dương tính cho biết chó bị nhiễm, khơng phát bệnh lâm sàng, kết âm tính sai xảy nhiều yếu tố, bao gồm kỹ thuật xử lý chiết xuất mẫu không tốt Độ nhạy PCR có giá trị phân biệt dịng CDV gây nhiễm Thídụ, PCR áp dụng để phân biệt dịng virus có độc lực với virus vaccin chó bệnh lâm sàng.** Điều giúp ích cho xác định trường hợp dương tính virus mô bào bảo hộ vaccin hay chuyển đổi hay tái tổ hợp dịng virus vaccin trở lại thành chủng có độc lực cao hơn.51,149,150,164,255 Trong ổ dịch sài sốt chó Alaska, PCR áp dụng cho phát truy dấu nguồn gốc dòng gây bệnh đến tận Siberia 180 Tương tự, kết phân tích gen cho dịng CDV từ chó Mỹ cho thấy nguồn gốc từ Châu Âu hay Châu Á, hay từ virus bệnh sài sốt chó chó biển (phocine distemper virus).224 Các phương pháp PCR áp dụng để xác định nguồn gốc dịng virus lồi thú ăn thịt ngoại lai.*** ** Các tham khảo 75, 129, 164, 182, 184, 267, 298, 302 *** Các tham khảo 69, 91, 113, 195, 205, 329 Kỹ thuật PCR định lượng phát triển cho định lượng CDV 254 để xácđịnh hàm lượng virus mô bị nhiễm dịch thể 87 Mẫu nước tiểu, hạch hạnh nhân, mẫu tăm màng tiếp hợp máu nguyên cho thấy có chứa lượng virus cao Cần có nghiên cứu thêm chó chủng ngừa để xác định số lượng virus áp dụng để phân biệt chó bị nhiễm virus vaccin hay virus có độc lực Xét nghiệm kháng thể huyết Xét nghiệm trung hòa cho tiêu chuẩn vàng cho đánh giá mức độ bảo hộ bệnh nhiễm, hiệu giá kháng thể huyết liên quan chặt chẽ đến mức độ bảo hộ.19 Các kháng thể trung hòa kháng trực tiếp đến protein màng bao (H F) virus, xuất lục 10 đêtn1 20 ngày sau bị nhiễm, tồn suốt đời thú khỏi bệnh Một phương pháp vi trung hòa (microneutralization method) đơn giản hóa để xét nghiệm kháng thể trung hịa phịng xét nghiệm chẩn đốn Một phương pháp nhuộm màu phiến mẫu (plaque staining method) cho thấy nhạy so với xét nghiệm trung hòa này.272 Xét nghiệm kháng thể huỳnh quang gián tiếp (indirect FA) áp dụng để đo lường hiệu giá kháng thể sau chủng ngừa, kết tương đương với kết xét nghiệm trung hịa.301 Mặc dù đơi đặc hiệu hơn, xét nghiệm ELISA với virus nguyên (whole-virus ELISA) áp dụng để phát kháng thể IgG IgM kháng CDV huyết Tính đặc hiệu gia tăng áp dụng ELISA dựa vào tái tổ hợp protein N (recombinant N protein-based ELISA) chó 24,170,171,311 Kháng thể kháng protein N P xuất lúc đến ngày sau bị nhiễm, đo lường ELISA Các hiệu giá gia tăng kháng thể IgM trung hòa virus huyết đo lường chó sống sót sau giai đoạn cấp tính bệnh nhiễm, thường khơng cịn sau tháng Những chó khơng phát triển hay có hiệu giá IgM hay IgG thấp sau cấy gây bệnh thường chất hay phải gây chết êm dịu phát bệnh lâm sàng nặng nề.158 Các hiệu giá cao IgM huyết tạo xác cho xác định trường hợp bệnh lâm sàng cấp tính (81%) so với viêm não mãn tính tiến triển (60%, chronic progressive inflammatory encephalitis) Gia tăng tạm thời IgM nhiễm CDV không phát bệnh thấy có tuần đầu sau chủng ngừa vaccin CDV, khơng khơng cịn thấy thời gian sau 24 Không giống gia tăng hiệu giá IgM, hiệu giá cao IgG khơng rõ rệt bệnh khỏi hay bị nhiễm CDV, hay chủng ngừa vaccin Việc phân tích hàm lượng IgG đặc trưng dịch não tủy xác định tỷ lệ dịch não tủy/huyết áp dụng cách tin cậy cho đo lường kháng thể để phát bệnh nhiễm CDV mãn tính hệ thần kinh (xem phần Phân tích dịch não tủy chương này) Phân lập virus (Viral Isolation) CDV có độc lực dễ dàng ni cấy đại thực bào hay tế bào lâm ba kích hoạt, CDV phát triển lớp tế bào biểu bì (epithelial cell line) hay tế bào sợi lát dùng nuôi cấy (fibroblast cell lines) tạo thích nghi Do đó, việc phân lập virus khó khăn nuôi cấy tế bào nuôi Tạo nhân virus thành công thực thời gian đầu bệnh nhiễm Các mẻ cấy từ đại thực bào phế nang phát virus vòng 24 đến 48 Hình thành tế bào khổng lồ (giant cell, hợp bào – syncytia), đặc tính gây bệnh tích CDV nhiều mơ ni cấy, phát thấy đến ngày, thời gian mà virus phân lập cách rải phủ lên tế bào khác Các mẻ cấy dùng đại thực bào thay tế bào lâm ba chó để phân lập CDV.17 Các tế bào máu (buffy coat cells) hay mô thú bị nhiễm đem cấy vào tế bào lâm ba máu chó kích thích phân bào(mitogen-stimulated canine blood lymphocytes), mẻ cấy kiểm tra lúc 72 đến 144 sau miễn dịch huỳnh quang 17 Một dạng tế bào lâm ba dùng nuôi cấy lấy từ khỉ marmoset (marmoset lymphoid cell line – B95a) sử dụng 148 Cách khác sử dụng tế bào nuôi Vero cho thể SLAM chó bề mặt (canine SLAM expressing Vero cells), để tạo dễ dàng cho nuối cấy dịng CDV có độc lực.312 Ni cấy virus đại thực bào phổi hay tế bào lâm ba cho đặc tính dịng CDV có độc lực, CDV có độc lực đơi phân lập tế bào Vero hay tế bào sơ cấp thận chó, tế bào biểu bì bàng quang, mà khơng cần phải tạo thích nghi hay làm độc lực virus Tuy nhiên, tỷ lệ thành công thấp Thông thường, hiệu giá virus vaccin thường cao tế bào nuôi đại thực bào, tế bào lâm ba, tế bào thận tế bào biểu bì, dịng có độc lực thực địa thường phát triển tốt tế bào nuôi đại thực bào, tế bào lâm ba.17 Các mẻ ni cấy kiểm tra nhuộm kháng thể huỳnh quang trực tiếp (direct FA) để phát virus, không quan sát thấy tác động gây bệnh tích tế bào (cytopathic effects) Do lỗi nhân virus, nên mẫu bệnh tích lấy từ chó bị viêm não mãn tính hay gây vaccin không nuôi cấy thành công CÁC PHÁT HIỆN TRONG LÂM SÀNG Chó trước sinh hay sơ sinh bị nhiễm CDV bị teo tuyến giáp (thymus atrophy) Viêm phổi tiêu chảy nhày thấy chó bị bệnh tồn thân Các bệnh tích đường hô hấp bao gồm viêm màng tiếp hợp (conjunctivitis), viêm mũi(rhinitis), viêm nhánh khí quản-phế quản (tracheobronchial tree) Tăng sinh hóa sừng (hyperkeratosis) mũi bàn chân thấy cho bị bệnh thần kinh Các bệnh tích đại thể hệ thần kinh trung ương thường không thấy được, ngoại trừ thấy sưng màng não (meningeal congestion), trương to não thất (ventricular dilation), gia tăng áp lực dịch não tủy phù não viêm não cấp tính Các hoại tử hóa xoang (cavitation) phát triển chất trắng bệnh tích viêm mãn tính Cạn kiệt lâm ba phát điển hình mơ bào học chó bệnh tồn thân Viêm phổi kẽ lan tràn có đặc điểm dày lên ngăn phế nang tăng sinh biểu bì phế nang Phế nang chứa tế bào biểu bì bong tróc đại thực bào; phần biểu bì chuyển tiếp hệ thống tiết niệu chứa thể vùi virus bào tương tế bào Chó phát bệnh bị tổn hại men răng, thường thấy hoại tử thối hóa dạng hà (cystic degeneration) tế bào biểu bì tạo men (ameloblastic epithelium) Xem Chương 92 mô tả bệnh tích mắt Viêm kẽ nhẹ mào tinh hồn (mild interstitial epididymitis) viêm tinh hoàn (orchitis) thường thấy chó bệnh sài sốt, quan sát mà giúp giải thích tình trạng giảm tinh trùng tạm thời, giảm dịch tiết tuyến tiền liệt (decrease prostate fluid), giảm hàm lượng testosterone thú hồi phục từ bệnh Với viêm não cấp tính gây chết chó sơ sinh, thối hóa sợi thần kinh vỏ bao myelin, hay bong tróc lớp vỏ bao sợi thần kinh (primary demyelination) xảy mà khơng có viêm rõ rệt quanh mạch máu (xem Hình 3-2 C, Hình Trang mạng 3-4) Các bệnh tích cấp tính khơng viêm bao gồm bong tróc vỏ bao sợi thần kinh với hình thành dạng xoang xốp (spongy vacuolation) chất trắng phản ứng tế bào tua nối sợi thần kinh (reactive gliosis) Ở thú sống sót, vùng chắp vá bong tróc vỏ bao thần kinh (demyelination) thay tế bào hình sao, hình thành mạng lưới cho đại thực bào vùi nuốt mảnh vỏ bao thần kinh Các biến đổi nặng nề chất trắng hệ thần kinh trung ương thấy vị trí hai bên cuống não (lateral cerebellar peduncle), phần trước hành tủy tiếp giáp với não thất thứ tư (dorsolateral medulla adjacent to the fourth ventricle), vùng chất trắng sâu não thất, sợi thần kinh đường dẫn thần kinh thị giác, tủy sống Các bệnh tích thấy não (midbrain), hạch gốc não (basal nuclei), thùy hình lê vùng vỏ não (pyriform lobes of the cerebral cortex, xem Hình Trang mạng 3-5), vùng vỏ não (cerebellar cortex) Chất xám khơng viêm thấy số chó chủ yếu bị ảnh hưởng cầu não tuyến yên (thalamus) 291 Các thể vùi bào tương hay nhân thấy chủ yếu tế bào hình sợi thần kinh Những chó già tuổi hay có khả miễn dịch tốt có khuynh hướng viêm nãobạch cầu não (leukoencephalomyelitis) với bệnh tích chủ yếu vùng hành não tủy sống Các bệnh tích thường có liên quan đến dấu hiệu điều hòa vận động ảnh hưởng tiền đình (vestibular involvement) Các bệnh tích có đặc điểm thấm nhập tràn lan tế bào lâm ba từ huyết tương, vùng bị bong tróc vỏ bao thần kinh (xem Hình 3-2, Hình Trang mạng 3-6) Các bệnh tích bong tróc vỏ bao thần kinh lan tràn rộng rãi nặng nề chó bị viêm não cấp tính Trong trường hợp mãn tính hơn, bệnh tích phát triển thành phiến xơ có đặc điểm xâm nhập thay mô thần kinh mạng lưới tế bào hình dày đặc Những phiến thể dấu hiệu tái tạo vỏ bao thần kinh Các bệnh tích sài sốt vaccin dạng điển hình viêm não hoại tử chất xám (necrotizing polioencephalitis) hành não mà thường thấy mặt hạch thần kinh vận động (ventral pontine nuclei, xem Chương 100).304,318 Các thể vùi thấy nhân hay bào tương tế bào hình (astrocytes) sợi thần kinh (neurons) (Hình 3-13, Hình Trang mạng 3-7) Quan sát mẫu mô phát thấy thể vùi CDV bắt màu acid Các thể vùi có đường kính đến μm, thường thấy bào tương tế bào biểu bì màng nhày, tế bào lưới nội mô (reticulum cells), bạch cầu (leukocytes), tế bào tua nối (glia), sợi thần kinh Các thể vùi phát thấy từ đến tuần sau bị nhiễm hệ thống lâm ba đường tiết niệu Các thể vùi nhân tế bào thường thấy biểu bì lát hay biểu bì tuyến, tế bào hình tế bào tuyến tiết (ganglion) Tầm quan trọng hình thái thể vùi bệnh sài sốt chưa rõ Về hóa học mơ bào (histochemically), thể vùi gồm tích tụ hạt nhân trần virus (viral nucleocapsids) cáu cặn tế bào nhiễm virus Các thể vùi nội bào chứa hạt nhân trần virus protein gây sốc nhiệt (heat shock protein).214 Phải xem xét nguyên nhân xác nhận chẩn đoán bệnh sài sốt chó mà dựa vào diện thể vùi Các thể vùi bào tương điển hình nhiễm CDV phát thấy bàng quang chó bình thường Khơng may thể vùi không đặc hiệu, mà xuất q chậm tiến trình bệnh, nên khơng áp dụng làm chẩn đoán kịp thời Ngược lại, xác định diện thể vùi đề phát bệnh nhiễm CDV dẫn đến chẩn đốn âm tính sai, phương pháp hóa miễn dịch mơ bào lai ghép phịng thí nghiệm thường nhạy cho phát CDV mơ (xem phần trước Hóa miễn dịch mơ bào Phát nucleic acid) Sự hình thành tế bào khổng lổ (giant cells) chủ yếu chất trắng hệ thần kinh trung ương phần trước thủy tinh thể mắt, thứ yếu hạch lâm ba, phổi màng lót não (leptomeninges) đặc trưng paramyxoviruses, CDV Phát áp dụng để chứng minh nhiễm CDV HÌNH 3-13 Sợi thần kinh với nhiều thể vùi (inclusion bodies) bào tương (multiple intracytoplasmic) nhân (intranuclear) tiểu não (cerebellum) chó bị bệnh sài sốt (Nhuộm màu H&E, x1000.) ĐIỀU TRỊ (THERAPY) Mặc dù có tiến nghiên cứu bệnh sài sốt chó, có thay đổi khuyến cáo điều trị bệnh Tuy nhiên việc điều trị hỗ trợ không đặc hiệu thường giúp làm giảm tỷ lệ tử vong Lý để chủ vật nuôi từ chối điều trị ban đầu diện dấu hiệu thần kinh chó Kể khơng có dấu hiệu thần kinh, người chủ nuôi cần cảnh báo hậu phát triển vào thời gian sau Tình trạng cải thiện thấy có nhiều chó chữa trị theo triệu chứng dạng bệnh thần kinh khơng có mức độ tin cậy thành công chế độ điều trị Tuy nhiên, không giống dấu hiệu toàn thân, thân dấu hiệu thần kinh không thường hồi phục gây dòng virus vaccin, dấu hiệu thường tiến triển Những chó bị nhiễm đường hô hấp phải nuôi môi trường sạch, ấp áp không bụi bặm Các xuất dịch mắt thường xuyên phải lau Viêm phổi thường bị biến chứng vi khuẩn phụ nhiễm, thường nhiễm Bordetella bronchiseptica, mà cần phải áp dụng kháng sinh phổ rộng thuốc long đờm (expectorants) hay trợ hô hấp (nebulization) lót đệm nằm (coupage) Các thuốc kháng sinh tốt cho sử dụng ban đầu viêm phế quản phổi (broncopneumonia) bao gồm ampicillin, tetracycline, chloramphenicol (Bảng 3-2) Tuy nhiên, gây ố màu răng, tetracycline nên tránh sử dụng cho chó con, chloramphenicol thích hợp nguy sức khỏe người Thuốc florfenicol dùng tiêm nhu mô (parenteral florfenicol) cân nhắc có vấn đề (xem phần Công thức thuốc Phụ lục) Điều trị thuốc tiêm xem xét có dấu hiệu bệnh đường dày ruột Điều trị kháng khuẩn phải thay đổi định thử nghiệm khả mẫn cảm dựa vào mẫu súc khí quản hay khơng có đáp ứng với thuốc kháng khuẩn ban đầu BẢNG 3-2 Thuốc điều trị bệnh sài sốt chó (Canine Distemper) Thuốca Liều lượngb (mg/kg) KHÁNG SINH (ANTIMICROBIAL) Ampicillin, amoxicillin 20 Đường cấp Cách khoảng Liệu trình (giờ) (ngày) PO, IV, SC Doxycyclinec Chloramphenicol Florfenicol Cephapirin 5-10 40-50 25-50 10-30 PO, IV PO, SC SC, IM IM, IV, SC CHỐNG HÔN MÊ (ANTICONVULSIVE) Phenobarbital 10-20; IV sau 2-8 PO KHÁNG VIÊM (ANTI-INFLAMMATORY) Dexamethasone 1-2d IV Phù nề thần kinh 0,1d PO, IV, SC (CNS edema) Viêm thần kinh thị giác (Optic neuritis) 12 8 6-8 7 3-5 3-5 Một lần 12 Đến đạt yêu cầu 24 24 3-5 CNS, hệ thần kinh trung ương; IM, tiêm bắp thịt – intramuscular; IV, tiêm mạch máu – intravenous; PO, đường uống – by mouth; prn, theo cần thiết – as needed; SC, tiêm da – subcutaneous a Xem phần Công thức thuốc Phụ lục b Liều lượng sử dụng khoảng thời gian c Ở chó tháng tuổi, màu men sử dụng doxycycline không quan trọng so với tetracycline d Tương ứng liều lượng glucocorticoid prednisolone tính mg/kg, gấp lần Thức ăn, nước uống thuốc hay dịch chất cấp đường miệng phải ngưng thú bị ói mửa tiêu chảy Có thể cần phải sử dụng thuốc tiêm chống ói mửa (tarenteral antiemetics) Bổ sung dịch chất đa điện giải đẳng trương (polyionic isotonic fluids) dung dịch lactated Ringer theo đường mạch máu hay da, tùy theo tình trạng nước thú Cấp vitamins B trị liệu khơng đặc trưng để bù đắp thất vitamins bỏ ăn tiểu lắt nhắt, để kích thích thèm ăn Theo kinh nghiệm, cấp ascorbic acid theo đường mạch máu có ích; nhiên, điều trị có nhiều tranh cãi, hiệu chưa chứng minh Các nghiên cứu có đối chứng ghi nhận giảm tỷ lệ phát bệnh tỷ lệ tử vong trẻ bệnh sởi (measles) cấp liều lượng 200.000 IU (60 mg) vitamin A vòng ngày kể từ xuất bệnh toàn thân 136 Chồn gây nhiễm thực nghiệm với có hay khơng rối loạn vitamin A thể bệnh nặng nề so với chồn cấp bổ sung vitamin A liều cao (30 mg tiêm bắp thịt [intramuscularly – IM]) vitamin A, ngày đầu bị nhiễm.244 Mặc dù hiệu điều trị bệnh sài sốt chưa chứng minh, chế độ sử dụng vitamin A, cấp sớm tiến trình bệnh, giúp ích cho chó bị bệnh cấp tính nặng nề Việc điều trị thuốc kháng virus đặc trưng CDV chưa đánh giá chó bệnh; nhiên, ribavirin hợp chất liên quan gần (là EICAR) cho thấy có hiệu kháng virus ngoại môi trường.72,86 Điều trị rối loạn thần kinh bệnh sài sốt chó thường khả quan Viêm não đa điểm tiến triển (progressive multifocal encephalitis) thường dẫn đến liệt chân (tetraplegia), hôn mê nhẹ (semicoma), bất lực (incapacitation) đến mức cần phải gây chết nhân đạo cho chó Mặc dù khơng có hiệu điều trị, chó khơng nên gây chết nhân đạo khơng có rối loạn thần kinh tiến triển hay khơng cịn khả sống (incompatible with life) Các mức độ thành công khác hay tạm thời làm ngưng dấu hiệu thần kinh số chó có với sử dụng liều dexamethasone dùng kháng phù nề thần kinh (antiCNS edema: 2,2 mg/kg, tiêm mạch máu – intravenously [IV]) Điều trị tạo ổn định thuốc kháng viêm cần thiết, điều trị tùy thuộc thời điểm Hôn mê (seizures), chuột rút bắp (myoclonus), hay viêm thần kinh thị giác (optic neuritis) ba thể thần kinh chủ yếu chó, mà chủ ni chấp nhận Triệu chứng chuột rút bắp thường khơng có khả điều trị có khả tự khỏi; nhiều phương cách điều trị đưa không thành công Các thuốc tạo lợi cho γaminobutyric (γ-aminobutyric acid-facilitating drugs), thuốc thường sử dụng chống co giật, thử nghiệm; nhiên khơng có hiệu quả, có khuynh hướng dẫn đến chuột rút bắp kích thích vùng vỏ não Các thuốc benzodiazepines hay levetiracetam sử dụng với hiệu biến thiên Giống tình trạng chuột rút người, điều trị làm giảm mức độ nặng nề co rút bắp, trị dứt hẳn 56 Để kiểm sốt mê, có lời khun sử dụng chất chống hôn mê sau bệnh phát ra, trước phát triển đến hôn mê Không có chứng cho thấy thuốc chống mê ngăn cản virus xâm nhập hệ thần kinh trung ương; nhiên thuốc chống mê ức chế điểm kích ứng gây mê, mà ngăn ngừa thiết lập nên tín hiệu gây hôn mê Hôn mê thường điều trị tốt diazepam cấp đường nhu mô (parenteral diazepam: 0,5 đến mg/kg theo đường thụt trực tràng – rectal, hay truyền chậm theo mạch máu – slow IV) tình trạng động kinh sử dụng phenobarbital để trì phịng ngừa Primidone hay potassium bromide lựa chọn khác, kết hợp hay liều lượng cao cần thiết trường hợp khó chữa Sử dụng glucocorticoid kháng viêm với liều lượng trị phù nề thần kinh (anti-CNS edema) có hiệu khác kiểm sốt mù hay giãn mao mạch viêm thần kinh thị giác, hay dấu hiệu thần kinh khác có liên quan đến chủng ngừa vaccin hay dạng viêm mãn tính viêm não PHỊNG BỆNH (PREVENTION) Phần mơ tả đặc trưng bảo hộ CDV; xem Chương 100 Phụ lục Trang mạng khuyến cáo chủng ngừa vaccin phịng bệnh sài sốt chó Lưu hành bệnh sài sốt chó thấp áp dụng chế độ chủng ngừa vaccin Miễn dịch bệnh nhiễm tự nhiên cho kéo dài, miễn dịch chậm miễn dịch dịch thể virus tạo khả phòng bệnh qua việc chủng ngừa Kháng thể mẹ truyền, nhận từ tử cung theo sữa đầu chó mẹ, cho chó có đủ miễn dịch giai đoạn sau sinh thời gian sau cai sữa Kháng thể mẹ truyền giảm nửa vòng 8,4 ngày sau (sau cai sữa) 3% kháng thể truyền qua chó tử cung, 97% nhận từ sữa mẹ, dẫn đến hiệu giá ban đầu chó sơ sinh thường tương đương khoảng 77% hiệu giá kháng thể chó mẹ Chó khơng nhận sữa đầu có khả bảo hộ đến tuần Trong chăm sóc chó con, tỷ lệ dựa vào hiệu giá kháng thể chó mẹ áp dụng để xác định đủ miễn dịch, tính tốn khơng thủ tục Kháng thể mẹ truyền thường khơng cịn lúc chó đạt 12 đến 14 tuần tuổi Các vaccin phòng bệnh CDV thường cấp cách đến tuần, thời gian từ đến 16 tuần tuổi, cho chó bú sữa đầu Miễn dịch sau khỏi bệnh nhiễm tự nhiên hay sau chủng ngừa nhắc lại kéo dài đến hàng năm Bảo hộ đủ chó khơng bị phơi nhiễm với dòng virus độc lực cao hay với số lượng lớn virus, chó khơng bị căng thẳng stress hay bị tổn hại miễn dịch (immunocompromised) Sau cấp liền vaccin bệnh sài sốt chó, chó chưa mắc bệnh khơng phát triển đủ miễn dịch Do đó, khơng có can thiệp kháng thể mẹ truyền, hai lần chủng ngừa phải áp dụng cách đến tuần, sau lần đầu chủng ngừa cho chó cạn kháng thể sữa đầu chó 16 tuần tuổi Tương tự, chó chủng ngừa vaccin lâu ngày phát triển bệnh sài sốt, khuyên nên chủng ngừa nhắc lại định kỳ, chó có miễn dịch lâu dài Đây cân nhắc quan trọng chó sau trở nên bị tổn hại miễn dịch hay bị phơi với hàm lượng cao virus Các chế miễn dịch dịch thể khơng hồn tồn giải thích đề kháng với CDV Chủng ngừa vaccin virus nhược độc (attenuated virus) cho thấy tạo bảo hộ cho chó trước chưa chủng ngừa, vaccin cấp đường tiêm mạch máu ngày trước bị phơi nhiễm với CDV có độc lực, tương đương với ngày chủng ngừa vaccin da.58 Do phản ứng dị ứng (allergic reactions) phát sinh, kháng nguyên CAV-1 kháng nguyên leptospiral phải tránh sử dụng chủng ngừa đường mạch máu Tiêm đường mạch máu hay bắp thịt áp dụng để tạo bảo hộ cho chó bị phơi nhiễm, chưa chủng ngừa Bảo hộ có nhanh chóng liên quan đến chất cản nhiễm, IFN, hay liên quan đến chế miễn dịch qua trung gian tế bào Mặc dù có giảm hiệu giá kháng thể, miễn dịch sau chủng ngừa nhắc lại (booster) hay chủng ngừa hồi tưởng (anamnestic vaccination) biết kéo dài đến năm, chứng minh số chó thử thách virus Thời gian bảo hộ dài so với dự đoán dựa vào hiệu giá kháng thể, chứng minh thử thách với virus có độc lực có ý nghĩa so với đo lường hiệu giá kháng thể trung hịa để dự đốn thời gian miễn dịch Tuy nhiên, hiệu giá kháng thể trung hòa thị tốt cho bảo hộ bệnh nhiễm Miễn dịch bảo tạo sau chủng ngừa vaccin bệnh sài sốt có phổ rộng Vaccin virus sống làm biến đổi dòng Rockborn cho bảo hộ cao thường gây bệnh lâm sàng vaccin Tuy nhiên, sau chủng ngừa vaccin sau thử thách virus có độc lực, vaccin tạo nên “miễn dịch quét – sterile immunity,” có đặc điểm khơng có nhân virus hay hay đổi hiệu giá kháng thể trước Ngược lại, dòng chủng khác vaccin CDV có khả gây bệnh nhiễm lâm sàng Tuy nhiên, thử thách cho chó chủng ngừa, chúng bị nhiễm virus có độc lực, thể bảo hộ không đầy đủ bệnh lâm sàng gia tăng hiệu giá kháng thể cho thấy miễn dịch “không quét – nonsterile” immunity Các nghiên cứu thử thách với số vaccin Onderstepoort cho thấy có bảo hộ đến năm bệnh lâm sàng.2,112,169,257 (xem phần Theo dõi kháng thể huyết Thời gian miễn dịch, đây) Các vaccin kháng nguyên chết (Nonliving Antigen Vaccines) Các vaccin bệnh sài sốt chó virus nguyên hạt bất hoạt không tạo đủ miễn dịch để ngăn ngừa bệnh nhiễm sau phơi nhiễm với thử thách (miễn dịch quét – sterile immunity), chó chủng ngừa thể đáp ứng miễn dịch hồi tưởng (anamnestic immune response) bị bệnh nặng nề so với đối chứng không chủng ngừa Các vaccin bất hoạt không sẵn có Mỹ Các vaccin virus bất hoạt khơng cịn sử dụng có vaccin virus sống làm biến đổi Các chế phẩm bất hoạt hay tái tổ hợp tạo miễn dịch ngắn mà thường trở nên cô đậm phơi nhiễm tự nhiên Với phụ gia cải tiến, số thú vật lồi ngoại lai có số mức độ bảohộ mà khơng có nguy kèm theo Các vaccin bất hoạt tái tổ hợp chủng ngừa CDV khuyên sử dụng cho loài ăn thịt hoang dã hay ngoại lai 64 Trong vaccin bất hoạt nguyên virus cho bảo hộ khơng thực chất, glycoprotein bề mặt (glycoprotein F) bề mặt CDV (xem Bảng Trang mạng 3-2) tạo bảo hộ cho chó thực nghiệm thử thách virus có độc lực 212,280 Tương tự, vaccin bất hoạt chứa tiểu đơn vị kháng nguyên (inactivated subunit vaccine) có chứa kháng nguyên màng F glycoprotein H biến đổi thành phức hợp kích thích miễn dịch, mà có hiệu tạo bảo hộ cho chó thử thách virus có độc lực 78 Một vaccin dạng thể bào tương (plasmid vaccin) mã hóa cho gen protein H, F N có hiệu tạo bảo hơ cho chó bệnh lâm sàng sau thử thách tiêm virus có độc lực vào mạch máu.59,117 Các vaccin trung gian mang (Vector Vaccines) Chủng ngừa cho chó đẻ có kháng thể mẹ truyền, loại vaccin trung gian mang CAV-2 (CAV-2 vector vaccine) kháng nguyên F glycoprotein H, có hiệu thử thách CDV có độc lực.92 Một vaccin chế tạo thể protein H virus bệnh sởi (measles) Vaccinia virus (virus bệnh đậu), có hiệu việc tạo kháng thể trung hịa bảo hộ cho chó thử thách CDV có độc lực.290 Thực nghiệm vaccin mang virus đậu tái tổ hợp (recombinant pox virus) hay virus đậu chim bạch yến (canarypox viruses) gen cho protein H bệnh sởi hay CDV, thử nghiệm chuột chó.58,317 Một vaccin trung gian mang tái tổ hợp với CDV virus bệnh đậu chim bạch (vector recombinant canarypox-based CDV vaccine) sẵn có sử dụng cho chó (xem Chương 100 Phụ lục Trang mạng 3) 225 Hai liều vaccin trung gian mang tái tổ hợp với CDV virus bệnh đậu chim bạch yến, dù chó có kháng thể mẹ truyền, thể có hiệu tạo bảo hộ cho chó chưa mắc bệnh không bị bệnh lâm sàng sau thử thách viruw có độc lực 226 Tương tự, vaccin mang làm gia tăng kháng thể huyết đến tỷ lệ cao trước chó chủng ngừa vaccin virus sống làm biến đổi (MLV-vaccin), so với loạt vaccin khác virus sống làm biến đổi có chức CDV 167 Một liều vaccin tái tổ hợp trung gian mang CDV tạo bảo hộ cho chó 10 đến 12 tuần tuổi bệnh lâm sàng, chúng thử thách virus có độc lực cho phơi nhiễm đường mạch máu hay đường tiếp xúc với chó bị bệnh, lúc tuần hay giờ, sau chủng ngừa vaccin.168 Các kết chuyển hóa vaccin chó chủng ngừa vaccin mang tái tổ hợp sau thử thách virus có độc lực 257 cho thấy miễn dịch không quét (nonsterile immunity) tạo tương tự vaccin sống làm biến đổi Onderstepoort (Onderstepoort MLV vaccin) Chó ni gia đình chó ni trang trại có hàm lượng kháng thể bảo hộ đến năm sau chủng ngừa vaccin thương mại tái tổ hợp CDV (xem phần Theo dõi khántg thể huyết Thời gian miễn dịch, phần đây).169 Các vaccin virus sống làm biến đổi (Modified Live Virus Vaccines) Chủng ngừa vaccin MLV cho bảo hộ mạnh mẽ bệnh nhiễm CDV Miễn dịch tạo vaccin không kéo dài đáp ứngmiễn dịch xảy sau bị nhiễm tự nhiên hay thực nghiệm virus có độc lực Tuy nhiên, có biến đổi protein H dịng CDV hoang dã, khơng có khả dịng CDV có độc lực vượt qua miễn dịch chắn vaccin MLV Khơng phảitất vaccin MLV phịng bệnh sài sốt chó cho mức độ bảo hộ giống 240 Thông thường, gia tăng khả bảo hộ vaccin có nghĩa phải gia tăng độc lực vaccin Không may là, hầu hết vaccin có liên quan đến gây bệnh, số loài ăn thịt hoang dã hay thú bị tổn hại miễn dịch Việc sử dụng vaccin MLV bệnh sài sốt chó dẫn đến vấn đề tính ổn định tính an tồn vaccin Hiệu tính an tồn việc chủng ngừa MLV phịng bệnh sài sốt chó cho chó có hệ thống miễn dịch bị lỗi hỏng vấn đề Khơng giống virus có độc lực, thân MLV ức chế miễn dịch qua trung gian tế bào đến mức đo lường Tuy nhiên, CDV kết hợp với kháng nguyên CAV-1 hay CAV-2, xảy ức chế rõ rệt chuyển hóa bạch cầu 115,228 Mức độ nặng nề lâm sàng ức chế tự khỏi nhẹ Các virus MLV không chuyển đổi lại thành có độc lực điều kiện tự nhiên, khơng lây lan đến chó khác Tuy nhiên, khả chuyển đổi lại thành có độc lực chứng minh thực nghiệm virus vaccin làm nhược độc, qua chuỗi cấy truyền từ chó sang chồn ferret hay qua đại thực bào phổi mơ ni cấy Có hai chủng vaccin MLV bệnh sài sốt Dịng Onderstepoort tạo thích nghi với phôi trứng gà tế bào gà Dịng vaccin tạo mức độ kháng thể thể dịch đo thấp hơn216 không gây bệnh sau chủng ngừa Dòng Rockborn làm thích nghi với tế bào chó, ni cấy tế bào thận chó, tạo nên hiệu giá kháng thể trung hòa cao cho bảo hộ lâu dài Dịng Snyder Hill khơng thể phân biệt với dịng Rockborn Khơng may là, dịng Rockborn đơi gây viêm não sau chủng ngừa chó thường thấy nhiều loài thú ăn thịt ngoại lai Gấu đỏ (red pandas: Ailurus fulgens), chồn chân đen (black-footed ferrets: Mustela nigripes), chồn Châu Âu (European mink: Mustela lutreola), cáo xám (gray foxes: Urocyon cinereoargenteus), chó hoang Châu Phi (African wild dogs: Lycaon pictus) có mẫn cảm cao bệnh gây vaccin vaccin MLV Tuy nhiên, chủng ngừa cho dịng MLV khác cho thấy khơng có tác động rủi ro cho bảo hộ chó hoang Châu Phi, sư tử (Panthera leo), chồn nuôi (domestic ferrets: Mustela putorius furo), vaccin bất hoạt không cho đủ miễn dịch.154,308,319 Bệnh sài sốt sau chủng ngừa vaccin ngăn ngừa chồn ferret hay loài ăn thịt khác cách sử dụng virus làm bất hoạt (inactivated virus) hay vaccin trung gian mang tái tổ hợp (recombinant vector vaccines), so với sử dụng vaccin cấy truyền qua tế bào chó.143 Một số ổ dịch viêm não sau chủng ngừa vaccin quan sát thấy trước liên quan đến biến đổi gen hay tái tổ hợp dòng virus vaccin với dòng virus gây nhiễm tự nhiên Phân tích gen di truyền dòng virus mục tiêu cho sản xuất vaccin thấy có dịng gần với chủng hoang dã.76 Một thực nghiệm sử dụng vaccin MLV đường xoang mũi, chế tạo chen gen di truyền để sửa đổi protein L enzyme trùng phân tử RNA theo RNA (RNA-dependent RNA polymerase).266 Vaccin tạo bảo hộ cho chồn ferret thử thách với virus hoang dã Các vaccin thực nghiệm khác phát triển để tạo bảo hộ cho loài thú ăn thịt ngoại lai mà giảm khả phát triển bệnh vaccin.142,248 Viêm não báo cáo chó sau chủng ngừa vaccin MLV phịng bệnh sài sốt.63,179,206 (xem phần Các biến chứng hệ thần kinh trung ương Bệnh sài sốt chó Chương 100) Dòng virus Rockborn nguyên nhân thường thấy nhất, chúng thường cho bảo hộ mạnh bệnh nhiễm Các vaccin từ dòng Onderstepoort, mà làm thích nghi với phơi trứng gà hay tế bào lồi chim, an toàn Các vaccin tái tổ hợp trung gian mang virus đậu (recombinant poxvirus-vectored vaccine) an toàn Chủng ngừa vaccin MLV cho chó mẹ đẻ hay vài ngày đầu sau đẻ dẫn đến bệnh nhiễm nặng nề, viêm não, nó.45,186 Người ta ước tính tỷ lệ xảy tình trạng 1/10.000 liều vaccin dòng Rockborn hay Snyder Hill, 1/50.000 liều vaccin dòng Onderstepoort.257 Viêm não tủy vaccin CDV ghi nhận chó tuần tuổi bị nhiễm lúc với dòng độc lực canine parvovirus; nhiên, phát tương tự báo cáo chó 11 đến 15 tuần tuổi 114 Bệnh gây vaccin CDV thường viêm não, tình trạng bị ức chế miễn dịch hay sơ sinh hay bị nhiễm trước đẻ dẫn đến thể nặng nề Các dấu hiệu thần kinh điển hình xuất lúc đến 20 ngày 63,65,318 sau cấp vaccin MLV phòng bệnh sài sốt Các dấu hiệu lâm sàng khác nhau, mà thường gồm đột ngột xuất tình trạng “nhai kẹo cao su – chewing-gum” hay cử động hôn mê, liệt thân, liệt bốn chân rối loạn tiền đình hay điều hịa cảm giác Thể mê thường tiến triển khó kiểm sốt chất chống mê Thể điều hịa tiến triển nặng, cải thiện số chó Khơng giống bệnh nhiễm mắc phải virus có độc lực, dấu hiệu thần kinh bệnh vaccin ổn định, cải thiện hay theo thời gian hay điều trị với thuốc kháng viêm hay điều trị hỗ trợ Các bệnh tích hệ thần kinh trung ương đa điểm điển hình liên quan đến chất xám hay chất trắng, mà thường nặng nề vùng chất xám cầu nối với tủy sống (pontomedullary gray matter, xem phần Các phát bệnh tích, chương này) Các phát dịch não tủy không phân biệt với bệnh nhiễm CDV có độc lực Nếu đem phân lập, virus vaccin phân biệt dễ dàng cấy truyền mô nuôi cấy (xem phần Phân lập virus, chương này) hay phân tích gen di truyền với khác biệt nhỏ gen N (xem Bảng Trang mạng 3-2) 179,332 Virus vaccin nhân khơng hồn tồn thể RNA thơng tin (mRNAs) cho protein, làm cho trình biên dịch protein bị giảm hay không thực được.206 Điều làm cho việc ni cấy hay chứng minh virus hóa học mơ bào gặp khó khăn HÌNH 3-14 Hình chiếu X quang chân trước chó bị HOD liên quan đến vaccin Phản ứng quanh mấu xương thấy mũi tên (Hình chụp Craig Greene © 2004 University of Georgia Research Foundation Inc) HOD viêm da mụn chó (juvenile cellulitis) có liên quan đến chủng ngừa vaccin sài sốt chó chó con, chó choai (xem phần Vaccin liên quan đến Cịi xương Triển dưỡng đầu mấu xương Viêm da mụn chó con, Chương 100).3,130,176,190 Các dấu hiệu thường phát triển vòng 10 ngày sau chủng ngừa vaccin MLV, khoảng thời gian từ ngày đến tuần Tất dòng MLV vaccin có liên quan đến hình thái Các bệnh tích điển hình HOD phát thấy cổ xương (metaphyseal regions) nhiều xương dài có đốt xương ngón chân (Hình 3-14) Các bệnh tích phải phân biệt với viêm màng xương cổ xương (metaphyseal osteomyelitis) nhiễm vi khuẩn tồn thân chó con(xem phần Viêm màng xương vi khuẩn cổ xương Viêm màng xương tủy xương, Chương 85) Giống chó Weimaraners thường bị tình trạng nhiều nhất, lỗi hỏng miễn dịch (xem phần Lỗi hỏng miễn dịch giống chó Weimaraners, Chương 94), số chó có liên quan đến giảm globulin huyết (hypoglobulinemia).3 Các bất thường khác phát thấy xét nghiệm bao gồm gia tăng hoạt tính alkaline phosphatase huyết tăng bạch cầu trung tính máu (neutrophilic leukocytosis) Nhiều chó có dấu hiệu tồn thân bao gồm gia tăng nhiệt độ trực tràng, bỏ ăn, miễn cưỡng di chuyển tăng cảm giác chân (limb hyperesthesia), khám sờ nắn xương dài Ở số chó, giống Weimaraners, dấu hiệu đa hệ thống dày ruột, hô hấp hay thần kinh báo cáo Điều trị giới hạn hoạt động dùng thuốc khơng có steroid làm giảm cảm giác (nonsteroidal analgesics) thường có cải thiện tạm thời hay khơng có cải thiện, việc áp dụng liều glucocorticoid sử dụng cho kháng viêm tình trạng ức chế miễn dịch thường cần kèo dài đến tuần Chó khơng điều trị sớm bị kèo dài tiến trình bệnh hay có giai đoạn tái phát sau ngưng điều trị; điều trị phải kéo dài đến tuần cho thú Người ta khuyên nên sử dụng vaccin tái tổ hợp cho chó giống Weimaraners, dịng chó có khuynh hướng xảy bệnh Chủng ngừa sau vaccin MLV, sau phát triển đầy đủ xương dài, khơng gây tình trạng bệnh Các nguyên nhân khác khơng bị nhiễm bệnh tích HOD có khả diện Bổ sung dinh dưỡng mức cho giống chó to nguyên nhân Đơi bệnh viêm da mụn chó xảy chó giả tuổi mà khơng liên quan đến chủng ngừa vaccin.28 Hơn nữa, có liên quan đến chủng ngừa vaccin CDV MLV, khơng có ghi nhận HOD chó bị nhiễm tự nhiên Các vaccin bệnh sởi (Measles Vaccines) CDV virus bệnh sởi người có liên quan gen di truyền, thực nghiệm gây nhiễm cho chó virus bệnh sởi tạo bảo hộ cho chó thử thách CDV Các hiệu giá kháng thể kháng virus bệnh sài sốt có tăng nhẹ sau chủng ngừa virus sởi, nhiên cho bảo hộ không đầy đủ Miễn dịch qua trung gian tế bào yếu tố khác cho thành phần chủ yếu liên quan đến đáp ứng tạo bảo hộ Virus vaccin bệnh sởi gây bệnh nhiễm tự khỏi, không truyền lây hệ thốnng lâm ba chó, bệnh nhiễm tương tự vaccin CDV chứa MLV Nguy chuyển đổi trở lại độc lực tối thiểu, giống nguy người, không tuân thủ thủ tục chủng ngừa Thú y viên sử dụng vaccin sởi cấp phép sử dụng cho chó (khơng phải sản phẩm dùng cho người) Lượng kháng nguyên cao sản phẩm dành cho chó cần thiết chất không tương đồng sản phẩm Về lý thuyết, chủng ngừa vaccin virus sởi tạo bảo hộ cho chó có hàm lượng cao kháng thể mẹ truyền, bệnh sài sốt Vaccin sử dụng làm thay cho chủng ngừa lần đầu cho chó đến 12 tuần tuổi Chó nhỏ tuần tuổi có hàm lượng kháng thể mẹ truyền cao (hiệu giá kháng thể trung hòa huyết cao 300), nên không đáp ứng tốt vaccin virus sài sốt lẫn vaccin virus sởi Nếu chó giống chủng ngừa vaccin virus sởi lúc 12 tuần tuổi, chúng truyền kháng thể thụ động kháng virus sởi cho chúng, phối giống chu kỳ động dục Miễn dịch sài sốt chó có chủng ngừa vaccin virus sởi không tạm thời, mà yếu so với chủng ngừa vaccin sài sốt MLV Miễn dịch qt khơng có sau thử thách với CDV có độc lực Chủng ngừa vaccin virus sởi khơng có hiệu lần đầu theo đường tiêp bắp thịt Tuy nhiên, chó tuần tuổi tạo miễn dịch vaccin virus sởi có bảo hộ vòng 72 giờ, thử thách CDV, khơng có gia tăng hiệu giá kháng thể kháng virus bệnh sài sốt.57 Lúc bắt đầu chuỗi chủng ngừa vaccin, vaccin vurs sởi riêng lẻ hay kết hợp với vaccin virus sài sốt sử dụng sau hai lần chủng ngừa vaccin virus sài sốt, để tạo miễn dịch đủ kéo dài 12 tháng Chủng ngừa không hiệu (Vaccine Failures) Khả tồn vaccin bệnh sài sốt yếu tố quan trọng hiệu chủng ngừa Các vaccin từ mẻ cấy virus đông khô (lyophilized tissue culture vaccines) bền bỉ đến 16 tháng điều kiện bảo quản lạnh (0°C to 4°C), tuần 20°C, ngày phơi với ánh nắng 47°C Khi pha, mô nuôi cấy vaccin giữ ổn định ngày 4°C 24 20°C Vaccin phải sử dụng pha để tiêm, hay phải giữ lạnh không không sử dụng Môi trường bất lợi ảnh hưởng đến đáp ứng chó vaccin bệnh sài sốt Ẩm độ môi trường cao (85% đến 90%) nhiệt độ cao làm cho chó có nhiệt độ trục tràng trung bình 39,8° C (103,6°F) làm giảm đáp ứng miễn dịch sau chủng ngừa vaccin bệnh sài sốt.114 Chó gây tê (anesthesia, với sử dụng barbiturate để trì gây mê) giải phẫu, nghiên cứu đáp ứng chúng chủng ngừa vaccin sài sốt 114 Đáp ứng kháng thể thể dịch vaccin hồi phục bình thường, khơng thực nghiên cứu thử thách Xảy số ức chế tế bào lâm ba máu ngoại biên phản ứng với ngưng kết tố thực vật phytohemagglutinin Điều trị glucocorticoid liều ức chế miễn dịch tuần không gây ức chế đáp ứng miễn dịch dịch thể bình thường vaccin bệnh sài sốt, chó điều trị có đáp ứng bị ức chế kích thích ngưng kết tố thực vật tế bào lâm ba 114 Những chó sống sót sau thử thách CDV có độc lực Nhiễm lúc với parvovirus có nghi ngờ gây giảm đáp ứng kháng thể với chủng ngừa vaccin bệnh sài sốt Việc chủng ngừa lúc với vaccin phịng bệnh parvovirus có nghi ngờ gây ức chế đáp ứng chó với bệnh nhiễm CDV, chưa có đủ liệu chứng minh; phát chưa chứng minh chó già tuổi hơn.114 (xem Chương 100 để biết thêm nội dung cản trở miễn dịch parvovirus chó chủng ngừa vaccin bệnh sài sốt) Trơi dạt kháng nguyên (antigenic drift) dòng CDV hoang dã gây ổ dịch sài sốt chó nhà quần thể thú hoang dã Các nghiên cứu huyết học kháng nguyên protein H xác nhận khác biệt thể bề mặt kháng nguyên (epitopes), giống kết phân tích gen di truyền.129 Hầu hết dịng virus có vaccin lưu hành giới phân lập từ Mỹ năm 1930 đến 1950, dịng có gen di truyền khác với dòng phân lập tại.149 Mức độ bảo hộ vaccin ổ dịch chưa rõ; nhiên, chủng ngừa khác loại (heterotypic vaccination) virus sởi lẫn virus rinderpest có liên quan, cho phần bảo hộ Do đó, khơng có khả vaccin CDV hồn tồn khơng có hiệu Khơng may chương trình chủng ngừa tại, với tần suất thấp, sử dụng vaccin tạo bảo hộ kém, trùng lấp tần suất chủng ngừa nhắc lại, diện số lượng lớn cá thể không chủng ngừa vaccin, có mẫn cảm cao, quần thể chó, góp phần cho ổ dịch báo cáo Ở Mỹ, ổ dịch có liên quan đến phơi nhiễm chó với chồn raccoon hoang dã bắt nuôi chung.159 Các ổ dịch Châu Âu có liên quan đến giảm quần thể có miễn dịch, trùng lấp kết hợp chủng ngừa nhắc lại, với sử dụng vaccin CDV làm nuôi phôi trứng gà, loại tạo miễn dịch so với vaccin nuôi tế bào nuôi.85 Quần thể có miễn dịch thấp 70% tổng đàn thường phát dịch, khả chuyển đổi số virus vaccin sài sốt thành có độc lực gây phát dịch.241 Các ổ dịch xảy thú ni chung với chó, mà khơng chủng ngừa vaccin MLV đưa trước có phơi nhiễm với quần thể bị dịch Bệnh nhiễm gia tăng đàn chó ni dó bị bệnh lâm sàng mà khơng cách ly với chó lại.103 Phổ ký chủ rộng rãi tạo thành nguồn tàng trữ tiềm làm cho việc toán bệnh khó khăn Một số biện pháp nghiên cứu để giúp kiểm soát bệnh loài ăn thịt Đầu tiên phải cố gắng để đạt tỷ lệ tiêm phịng cao chó ni, vùng mà chúng có sống chung hay sống gần với quần thể thú hoang dã Sử dụng vaccin mạnh mà không gây bệnh vaccin Việc sử dụng chế phẩm tái tổ hợp phải xem xét cho lồi ăn thịt ngoại lai có mẫn cảm cao với dịng virus vaccin Khơng may thời gian miễn dịch ngắn chế phẩm dẫn đến phải thường xuyên chủng ngừa nhắc lại, liên quan đến việc phải dùng thuốc gây mê để bắt giữ thú Có thể sau phơi nhiễm với chế phẩm hay khơng có độc lực, thú có khả chịu đựng tốt với chủng ngừa số chế phẩm có độc lực cao Cần có nghiên cứu để chứng minh khả Do phát triển phổ ký chủ CDV, phơi nhiễm đến dòng virus vaccin dẫn đến dạng dịch giống virus hoang dã có độc lực Cần xem xét đến chủng ngừa loài thú hoang dã bắt chăn thả Theo dõi kháng thể huyết thời gian miễn dịch Miễn dịch vaccin MLV phòng bệnh sài sốt thường kéo dài năm, nhãn vaccin khuyên chủng ngừa hàng năm cho chó Hiệp hội Dược Thú y Mỹ (American Veterinary Medical Association) Hiệp hội Phòng khám Thú y Mỹ (American Animal Hospital Association) khuyên chủng ngừa nhắc lại năm sau thực chuỗi chủng ngừa ban đầu nhắc lại vào năm sau Thú y viên phải định có hay khơng tần suất chủng ngừa dày hơn, dựa vào xem xét tình trạng thú mơi trường Các hiệu giá kháng thể trung hòa huyết giúp định xác hơn, hiệu giá kháng thể trung hịa huyết cao hay 100 cho tạo bảo hộ, chó nhận kháng thểmẹ truyền Hiệu giá kháng thể trung hòa huyết từ 20 cho tạo bảo hộ, đo lường đáp ứng với vaccin Các phương pháp ELISA xét nghiệm protein tái tổ hợp phát triển để đo lường hiệu giá kháng thể bệnh sài sốt, giúp chẩn đoán lâm sàng hay đo lường mức độ bảo hộ sau chủng ngừa vaccin.170,171 Các kit ELISA sẵn có cho phịng khám sử dụng để xác định đáp ứng kháng thể (xem Phụ lục Trang mạng 6).314 Trong nghiên cứu chó mang đến phòng khám để chủng ngừa vaccin, hiệu giá kháng thể bị giảm theo lứa tuổi Thông thường, chó chủng ngừa theo khoảng cách năm hay lâu thường bị cạn kiệt kháng thể.41,188,215,220,257 Dựa vào liệu thử thách, thời gian miễn dịch vaccin bệnh sài sốt giới hạn từ năm đến năm (xem phần Thời gian miễn dịch Các nghiên cứu thử thách, Chương 100).257 Kiểm sốt mơi trường CDV nhạy cảm với chất sát trùng thông thường Các thú bị nhiễm nguồn chủ yếu chứa virus, chúng cần cách ly với cịn khỏe mạnh Chó thường thải tiết virus theo chất tiết đến tuần sau phát bệnh cấp tính tồn thân Những chó hồi phục sau bệnh tồn thân hay chó phát triển dấu hiệu thần kinh sau (mà khơng bệnh tồn thân) cịn thải tiết virus VẤN ĐỀ ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CỘNG ĐỒNG CDV có liên quan gần với virus bệnh sởi (measles virus) Cả hai loại virus có sinh bệnh học giống ký chủ tương ứng, CDV có hướng thần kinh so với virus bệnh sởi Viêm xơ não bán cấp tính (subacute sclerosing panencephalitis – SSPE), dạng viêm não người bệnh nhiễm loại virus sởi có lỗi di truyền SSPE ODE, dạng hệ thần kinh trung ương bệnh sài sốt, có bệnh tích giống nhau, với bong tróc lan tràn vỏ bao thần kinh (diffuse demyelination), tăng sinh tế bào tua nối sợi thần kinh (glial proliferation), bệnh tích khác đặc trưng viêm não mãn tính khơng sinh mủ Viêm não mãn tính bong tróc vỏ bao thần kinh thường thấy bệnh sài sốt có sinh bệnh học giống với viêm đa điểm màng cứng (multiple sclerosis – MS) ỏ người, mà có đặc điểm viêm bong tróc vỏ bao thần kinh đa điểm Ngược lại với SSPE, nguyên nhân MS chưa rõ, chứng chứng minh liên quan đến virus bệnh sởi hay CDV.133 Bằng chứng vai trò CDV làm nguyên nhân MS gián tiếp, liệu nghiên cứu xác minh trường hợp có liên quan cho thấy chứng thuyết phục.133 Bệnh sởi người bệnh khác paramyxovirus cịn có nghi ngờ liên quan đến MS, số mầm bệnh khác herpesviruses có liên quan.252 Hơn nữa, tỷ lệ MS không giảm từ trước năm 1960, giảm nhiều trường hợp bệnh sởi bệnh sài sốt vaccin có hiệu Một số liệu cho thấy bệnh Paget, rốt loạn viêm xương người, có liên quan đến CDV phơi nhiễm với chó Bệnh Paget bệnh mãn tính dẫn đến hủy hoại, tái cấu làm biến dạng xương Các chứng cho thấy bệnh nhiễm paramyxovirus mãn tính tế bào tiêu xương (osteoclasts) Nhân sinh chất tế bào thực bào tiêu xốp xương (pagetic osteoclasts) có chứa thể vùi giống virus Hồng cầu tế bào tiêu xương bệnh nhân bệnh Paget mRNA paramyxovirus.237 Áp dụng lai ghép phịng thí nghiệm (in situ hybridization), kết chuỗi gne di truyền CDV phát thấy xương 63,5% bệnh nhân Paget chưa điều trị.55,109-111 Trong nghiên cứu lai ghép phịng thí nghiệm, RNA CDV phát 100% bệnh tích bệnh nhân xốp xương (pagetic patients) khơng có mẫu đối chứng, bao gồm khơng liên quan đến vị trí xốp xương, xương bình thường, diễn tái cấu trúc xương.191 Phần không thực chất báo cáo liên quan đến độ nhạy tính đặc hiệu khác xét nghiệm áp dụng.233 CDV cho thấy có nhân ngoại môi trường, tế bào gốc sinh tế bào tiêu xương (osteoclast precursors) người.261 Chủ chó bị bệnh thấy có liên quan nhiều đến bệnh Paget, mối liên quan gián tiếp rõ ràng với chứng liên quan bệnh Paget với chủ chó chim Các nghiên cứu khác liên quan đến paramyxovi ruses khác, biến thể virus sởi.47,238,247,268 Cho đến virus phân lập phân tích kết chuỗi đầy đủ, vai trò CDV bệnh nhiễm này, chưa rõ ... sài sốt (Nhuộm màu H&E, x1000.) ĐIỀU TRỊ (THERAPY) Mặc dù có tiến nghiên cứu bệnh sài sốt chó, có thay đổi khuyến cáo điều trị bệnh Tuy nhiên việc điều trị hỗ trợ không đặc hiệu thường giúp làm... lớn virus thấy tế bàodi hành Virus vào hệ thần kinh trung ương nhờ bạch cầu đơn nhân đám rối màng trạch, virus xâm nhập nhân tế bào biểu bì đám rối màng trạch Sau dung giải tế bào, virus tự vào... quét virus thể mà dấu hiệu bệnh Mặc dù hầu hết chó khỏi bệnh qt hồn tồn virus, số chó chứa chấp virus hệ thần kinh trung ương HÌNH 3-1 Cấu trúc virus bệnh sài sốt chó (canine distemper virus)