Khảo sát sự ức chế vi khuẩn S. mutans, Lactobacillus spp. gây sâu răng từ cao chiết lá bàng (Terminalia catappa L.)

Bài viết Khảo sát sự ức chế vi khuẩn S. mutans, Lactobacillus spp. gây sâu răng từ cao chiết lá bàng (Terminalia catappa L.) trình bày khảo sát việc tách chiết cao thô từ lá cây Bàng Terminalia catappa. Thử hoạt tính ức chế của cao chiết lá cây Bàng Terminalia catappa lên hai đối tượng vi khuẩn S. mutans, Lactobacillus spp.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu KHẢO SÁT SỰ ỨC CHẾ VI KHUẨN S MUTANS, LACTOBACILLUS SPP GÂY SÂU RĂNG TỪ CAO CHIẾT LÁ BÀNG (TERMINALIA CATAPPA L.) Võ Thị Trinh1, Nguyễn Thị Ngọc Anh1 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Các nghiên cứu trước vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp đóng vai trị quan trọng trình gây bệnh sâu người Nhiều loại cỏ có khả chữa sâu Tuy nhiên chưa có tài liệu nghiên cứu tác động cao chiết Bàng lên đối tượng vi khuẩn Mục tiêu: Tách chiết cao thô từ Bàng Terminalia catappa Thử hoạt tính ức chế cao chiết Bàng Terminalia catappa lên hai đối tượng vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Thu thập Bàng tươi chiết cao dung môi ethanol 70%, ethanol 96% nước Thử hoạt tính ức chế cao chiết chủng vi khuẩn S mutans ATCC 35668; S mutans Lactobacillus spp phân lập từ 95 mẫu phết bệnh nhân bị sâu thu nhận từ đợt khám miễn phí Trường Song ngữ Quốc tế Học Viện Anh Quốc UK Academy định danh kít Microgen Strep S mutans, dựa vào kiểm tra đặc tính sinh hóa Lactobacillus spp Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh chủng vi khuẩn S mutans phương pháp khuếch tán đĩa thạch, chủng, Lactobacillus spp phương pháp tìm nồng độ ức chế tối thiểu Kết quả: Kết nghiên cứu phân lập 17 chủng S mutans, 30 chủng Lactobacillus spp Tình trạng kháng kháng sinh chủng S mutans có biểu tăng, chủng kháng cao với ceftriaxone (64,71%), erythromycin (52,94%), cefotaxime (35,29%); tình trạng kháng kháng sinh chủng Lactobacillus spp thấp hơn, chủng kháng cao với penicillin (20%), vancomycin (16,67%) nhạy hoàn toàn với clindamycin, linezolid Cao chiết Bàng từ dung môi nước, ethanol 70%, 96% khơng có hoạt tính ức chế S mutans nồng độ 200 mg/ml, có hoạt tính ức chế, Lactobacillus spp Trong hoạt tính ức chế, Lactobacillus spp cao chiết Bàng nồng độ 200 mg/ml từ nước đạt 25/30 chủng, từ ethanol 70% đạt 29/30 chủng, từ ethanol 96% đạt 28/30 chủng phân lập; số trường hợp hoạt tính ức chế cao chiết Bàng cao so với chlorhexidine gluconate 0,12% Kết luận: Từ kết thu cho thấy cao chiết Bàng từ ethanol 70%, 96% nước có tiềm ức chế , Lactobacillus spp tác nhân gây sâu thứ cấp Tuy nhiên, hoạt tính ức chế cao chiết Bàng khơng có vi khuẩn S mutans nồng độ 200 mg/ml Từ khóa: S mutans, Lactobacillus spp., Terminalia catappa, bệnh sâu ABSTRACT INVESTIGATE THE INHIBITION OF S MUTANS, LACTOBACILLUS SPP CAUSING TOOTH DECAY FROM TERMINALIA CATAPPA L Vo Thi Trinh, Nguyen Thi Ngoc Anh * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 - No - 2021: 35 - 45 Background: Previous studies have shown that the bacteria S mutans, Lactobacillus spp play an important role in the process of causing dental caries in humans Many plants have the ability to cure tooth decay However, there has not been a detailed study on the effects of extracts from the leaves of Terminalia catappa on these two bacteria Objectives: The leaves of Terminalia catappa were extracted in different solvent To test the antimicrobial activity of Terminalia catappa leaf extract on S mutans and Lactobacillus spp Khoa Xét Nghiệm Y Học, Trường Đại học Quốc Tế Hồng Bàng Tác giả liên lạc: ThS Võ Thị Trinh ĐT: 0917603559 B - Khoa Học Dược Email: trinhvt@hiu.vn 35 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Materials and methods: Collect Terminalia catappa fresh leaves and extract with ethanol 70%, ethanol 96% and water Test the antimicrobial activity of Terminalia catappa leaf extract on S mutans ATCC 35668, S mutans and Lactobacillus spp strains S mutans and Lactobacillus spp strains isolated from 95 swabs of patients with caries were obtained from a free dental examination organized at the British Academy International Bilingual School UK Academy The identification use the Microgen Strep kit for S mutans strains; base on the basis of colonies morphologies and biochemical tests for Lactobacillus spp strains Antibiotic susceptibility testing of S mutans strains was performed by agar disc diffusion method, Lactobacillus spp strains by MIC method Results: The results isolated 17 strains of S mutans, 30 strains of Lactobacillus spp The antibiotic resistance status of S mutans strains showed an increase, in which the strains were most resistant to ceftriaxone (64.71%), erythromycin (52.94%), cefotaxime (35.29%); the antibiotic resistance status of Lactobacillus spp strains was lower, of which the strains were most resistant to penicillin (20%), vancomycin (16.67%) and completely sensitive to clindamycin, linezolid The extracts with ethanol 70%, 96% and water of Terminalia catappa leaf did not have activity against S mutans at the concentration of 200 mg/ml, only activity against Lactobacillus spp The Lactobacillus spp inhibitory activity of the aqueous extract at the concentration of 200 mg/ml was 25/30 strains, 29/30 strains of 70% ethanol extract, 28/30 strains of 96% ethanol extract; in some case, the diameter of the zone of inhibition of the leaf extract was higher than chlorhexidine gluconate 0.12% Conclusion: The obtained results, it was shown that the extracts with ethanol 70%, 96% and water of Terminalia catappa leaf have the potential to inhibit Lactobacillus spp However, the extracts did not have inhibitory activity on S mutans at the concentration of 200 mg/ml Keywords: S mutans, Lactobacillus spp., Terminalia catappa, dental caries xác nhận loài thể khả ĐẶT VẤNĐỀ kháng khuẩn, kháng nấm, chống viêm, chống Sâu vấn đề sức đái tháo đường, chống oxy hóa ung thư(3) khỏe phổ biến giới, gây hậu nhiều Terminalia catappa công nhận mức độ sức khoẻ miệng sức khoẻ mặt y học có chứa hoạt chất alkaloid, chung Theo nghiên cứu The Global Burden flavonoid, saponin, anthroquinone, terpenoid, of Disease Study năm 2017 ước tính có 2,3 tỷ steroid, glycoside, phenol(3,4) Trong đó, hoạt chất người giới bị sâu mạn tính, chiết xuất từ nước Bàng giai đoạn 530 triệu trẻ em bị sâu sữa(1) Hệ vi khuẩn phát triển có khác nhau: tanin chiếm tỷ lệ cao miệng nguyên nhân dẫn đến non, saponin chiếm tỷ lệ cao trưởng bệnh miệng Các nghiên cứu trước thành, hoạt chất đỏ già thấp(5) Một số vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp nghiên cứu cho thấy chiết xuất Bàng đóng vai trị quan trọng trình gây sâu từ nước, ethanol methanol có hoạt tính người(2) Do nhóm nghiên cứu tiến ức chế số loài vi khuẩn(3) Khả ức chế hành phân lập hai chủng vi khuẩn S mutans, vi khuẩn chiết xuất Bàng non cao Lactobacillus spp từ 95 mẫu phết bệnh nhân Bàng trưởng thành đỏ già(5) bị sâu để tiến hành nghiên cứu khảo sát Chữa bệnh sâu có nhiều thuốc cỏ truyền miệng sử dụng dân gian, có việc sử dụng chiết xuất từ Bàng Cây Bàng Terminalia catappa biết đến loại trái giàu dinh dưỡng có lợi ích mặt y học Nhiều nghiên cứu dược lý trước 36 Theo Đỗ Tất Lợi người dân số vùng miền sử dụng số phận Bàng để chữa bệnh Chẳng hạn, Ấn Độ, Indonesia, Philipin người ta dùng vỏ Bàng sắc uống chữa lỵ, tiêu chảy rửa vết loét, vết thương; dùng sắc uống chữa cảm sốt, tươi giã nát xào nóng để đắp chườm vào nơi đau nhức; hạt sắc uống chữa ỉa máu(6) Tại Suriname, chè B - Khoa Học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 làm từ Bàng dùng để chữa bệnh lỵ tiêu chảy(7) Ngoài ra, dân gian, theo kinh nghiệm người dân Việt Nam: Bàng khô sử dụng để tạo màu, ngăn ngừa số vi khuẩn loại nấm cá, Bàng non sử dụng để chữa bệnh sâu Tuy nhiên, nước ta chưa có cơng trình nghiên cứu thức việc sử dụng Bàng tươi hay khơ để phịng trị bệnh miệng Do đề tài phân lập chủng vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp gây bệnh sâu khảo sát chiết xuất từ Bàng nhằm ức chế chúng tiền đề cho nghiên cứu ứng dụng chiết xuất từ Bàng phòng điều trị bệnh sâu S mutans, Lactobacillus spp ĐỐI TƯỢNG- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Mẫu Bàng tươi trưởng thành (Terminalia catappa L.) có kích thước dài 11 - 30 cm, rộng 12,5 cm, màu xanh đậm, mặt láng, mặt nhiều lông mịn thu quận Tân Phú, Gị Vấp, Bình Tân TP Hồ Chí Minh Chủng chuẩn S mutans ATCC 35668 mua hãng Microbiologics, Mỹ Các mẫu bệnh phẩm dùng để phân lập vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp thu nhận từ đợt khám miễn phí tổ chức Trường Song ngữ Quốc tế Học Viện Anh Quốc UK Academy Hội Bảo trợ Người khuyết tật Trẻ mồ cơi TP Hồ Chí Minh, Hội Răng Hàm Mặt Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Khối ngành Sức Khỏe - Trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng tổ chức khám chữa bệnh cho bệnh nhân Thời gian thu mẫu từ 30 phút đến 11 ngày 15/11/2020 Phương pháp nghiên cứu Thu mẫu bệnh phẩm Sử dụng tăm vô khuẩn quệt mảng bám nước bọt tổ chức bị sâu Sau tăm bơng bảo quản ống nghiệm có chứa ml nước muối sinh lý vơ trùng Vận chuyển phịng thí nghiệm Vi sinh - Khoa Xét B - Khoa Học Dược Nghiên cứu nghiệm Y học - Trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng để tiến hành trộn mẫu cấy phân lập(8) Định danh vi khuẩn S mutans Phân lập đĩa mơi trường BA có bổ sung 75 g/ml gentamicin Đĩa cấy ủ 37oC, khí trường 5% CO2, thời gian ủ 48 Sau ủ, chọn khuẩn lạc đặc trưng: màu trắng xám, hình trịn khơng đều, đường kính 0,5 - 1,0 mm, tan huyết α, khuẩn lạc khơ có xu hướng bám vào bề mặt thạch rỗ bề mặt thạch; nhuộm Gram: Gram (+); thử nghiệm catalase âm tính, Taxo P âm tính; định danh kít Microgen Strep bảo quản chủng -35oC/ glycerol 20%(8) Định danh nhóm vi khuẩn Lactobacillus spp Phân lập đĩa môi trường thạch MRS có bổ sung 1% CaCO3 Đĩa cấy ủ 37 oC, khí trường 5% CO2, thời gian ủ 48 Sau ủ chọn khuẩn lạc đặc trưng: làm tan CaCO3(vịng halo), trịn, bóng, rìa ngun, kích thước từ - mm, màu trắng đục đục; nhuộm Gram: Gram dương (+); thử nghiệm catalase âm tính, oxidase âm tính, khơng hình thành bào tử, khơng sinh khí H2S, khơng sinh indole, Methylred âm tính, Voges-Proskauer âm tính, khơng sử dụng citrate, lên men đường glucose, lactose bảo quản chủng -35oC/glycerol 20%(9) Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh chủng S mutans Theo hướng dẫn CLSI M100, 2020(10), khoanh giấy kháng sinh sử dụng gồm: cefepime 30 g (Nam Khoa), cefotaxime 30 g (Nam Khoa), ceftriaxone 30 g (Nam Khoa), chloramphenicol 30 g (Nam Khoa), clindamycin g (Nam Khoa), erythromycin 15 g (Nam Khoa) theo hướng dẫn EUCAST breakpoint v10(11), khoanh giấy kháng sinh sử dụng gồm: ampicillin 10 g (Nam Khoa), penicillin 10 U (Bionalysis), vancomycin 30 g (Nam Khoa), tedizolid g (Liofilchem) Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh S mutans thực mơi trường MHA có bổ sung 5% máu cừu 37 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh chủng Lactobacillus spp Theo hướng dẫn CLSI M45, 2015, kháng sinh sử dụng gồm: penicillin (HiMedia), ampicillin (Liofilchem), erythromycin (HiMedia), vancomycin (Liofilchem), clindamycin (HiMedia), linezoid (HiMedia) Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh Lactobacillus spp thực mơi trường CAMHB có bổ sung 5% máu ngựa(12) Phương pháp thu thập mẫu Bàng Mẫu Bàng thu quận TP Hồ Chí Minh Xử lý sơ bộ: rửa sạch, phơi khô, cắt nhỏ - mm dành cho chiết cồn 96%, 70% - cm dành cho chiết nước Mẫu bột Bàng xác định độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại theo tiêu chí Dược điển Việt Nam V(6,13) Phương pháp tách chiết cao thô Mẫu bột Bàng tách chiết nước, ethanol 70% 96% phương pháp ngâm dầm nhiệt độ thường thu nhận cao chiết cách cho bay hơi, loại bỏ lượng dung mơi dịch chiết thiết bị thích hợp(14) Định tính hợp chất tự nhiên cao Dựa vào phản ứng tạo màu theo mô tả Saxena cộng sự, 2012(15) trình bày Bảng Bảng Thử nghiệm định tính hợp chất tự nhiên cao chiết Thử nghiệm Alkaloid Flavonoid Saponin Terpenoid Phenol Tanin 38 Thí nghiệm Kết ml cao chiết + giọt Kết tủa màu nâu đỏ thuốc thử Wagner ml cao chiết + vài giọt Hợp chất màu xanh FeCl3 % đậm g + ml nước cất  Hình thành bọt lắc mạnh ml cao chiết + ml Lớp màu vàng chloroform + vài giọt đáy H2SO4 đậm đặc ml cao chiết + vài giọt Kết tủa màu xanh FeCl3 % đậm ml cao chiết + vài giọt Kết tủa màu xanh lá, FeCl3 % tím đen Phương pháp thử hoạt tính ức chế S mutans, Lactobacillus spp cao chiết Bàng Sử dụng phương pháp khuếch tán đĩa thạch(12,16), dịch chiết Bàng cô thành cao đến khối lượng khơng đổi, pha lỗng cao chiết theo dãy nồng độ 200; 100; 50; 25 mg/ml Cao chiết nước pha lỗng nước cất vơ trùng, cao chiết ethanol 70% 96% hòa tan DMSO 1% Hút 50 µl cao với mức nồng độ nhỏ vào lỗ đục đĩa MHA có bổ sung 5% máu cừu có chứa vi khuẩn S mutans, đĩa MRS có chứa vi khuẩn Lactobacillus spp pha loãng nồng độ 0,5 McFarland (mỗi lỗ có d = mm), ủ 37oC, 5% CO2 18 - 24h, quan sát đo đường kính vịng ức chế vi khuẩn cao chiết Bàng Chlorhexidine gluconate 0,12% dùng làm đối chứng dương nước cất vô trùng làm đối chứng âm cao chiết nước, DMSO 1% làm đối chứng âm cao chiết ethanol 70% 96% Đường kính vịng ức chế vi khuẩn đo thước đo đơn vị mm Thí nghiệm lặp lại lần Tất liệu phân tích thống kê dựa vào công cụ Data Analysis Excel 2013 Dữ liệu thể giá trị trung bình độ lệch chuẩn Mức ý nghĩa 5% (p < 0,05) sử dụng xác suất chấp nhận tối thiểu cho khác biệt giá trị trung bình Y Đức Nghiên cứu thông qua Hội đồng Đạo đức nghiên cứu Y sinh học Đại học Quốc tế Hồng Bàng, số 62a/QĐ-HIU, ký ngày 19/02/2020 KẾT QUẢ Kiểm tra độ ẩm, độ tro toàn phần kim loại nặng mẫu nguyên liệu Bàng Độ ẩm mẫu nguyên liệu bột Bàng 11,22  0,75% Độ ẩm nằm ngưỡng 10 - 12% mẫu dược liệu từ lá, độ ẩm an toàn để tránh tượng ẩm mốc hoạt chất dược liệu từ bị biến đổi trình bảo quản(17) B - Khoa Học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Độ tro trung bình Bàng khơ 9,45  0,51% Xác định độ tro toàn phần xác định hàm lượng chất vơ khơng bay có dược liệu, có kim loại muối số kim loại Tuy nhiên, hàm lượng kim loại nặng gây ảnh hưởng đến sức khỏe người kiểm tra phân tích Bảng khơng vượt mức quy định theo hướng dẫn WHO đánh giá chất lượng thuốc từ dược liệu(18) Bảng Hàm lượng kim loại nặng mẫu nguyên liệu Bàng Tên tiêu Kết Asen (As) Thủy ngân Hg) Cadimi (Cd) Đồng (Cu) Chì (Pb) ppm ppm ppm ppm ppm 7,40 x 10-2 < 4,50 x 10-2 < 9,00 x 10-2 12,6 0,56 Nghiên cứu Kết phân lập, định danh S mutans Lactobacillus spp Kết phân lập từ 95 mẫu phết sâu bệnh nhân có độ tuổi từ – 63 tuổi 17 chủng S mutans Khuẩn lạc S mutans thạch máu sau ngày ni ủ có màu trắng xám, hình trịn khơng đều, đường kính 0,5 - 1,0 mm, tan huyết α, khuẩn lạc cứng có xu hướng bám vào bề mặt thạch rỗ bề mặt thạch (Hình 1) Tương tự, từ 95 mẫu phết sâu bệnh nhân phân lập 30 chủng Lactobacillus spp Khuẩn lạc Lactobacillus spp mơi trường MRS sau ngày ni ủ có màu trắng đục đục, khuẩn lạc trịn, bóng, rìa ngun, kích thước từ - mm (Hình 2) Hiệu tách chiết cao Khối lượng mẫu Bàng lần chiết xuất 250 g bột lá/lần cho loại dung môi Hàm lượng cao chiết thu hồi trình bày qua Bảng Cao Bàng thu đặc, màu nâu, vị chát, mùi thơm đặc trưng dược liệu Bảng Hiệu suất chiết cao Bàng Dung môi Nước Khối lượng cao (g) Hiệu suất chiết (%) 59,38  0,96 23,75  0,38 Ethanol 70% 22,79  0,92 9,12  0,37 Ethanol 96% 22,38  0,45 8,95  0,18 Hình Khuẩn lạc S mutans môi trường BA sau ngày nuôi ủ 37oC, khí trường 5% CO2 Định tính hợp chất tự nhiên cao Kết định tính hợp chất tự nhiên có cao chiết từ dung mơi ethanol nước trình bày qua Bảng Bảng Kết định tính hợp chất tự nhiên cao chiết Bàng Thử nghiệm Cao nước Alkaloid Flavonoid Saponin Terpenoid Phenol Tanin + + + + + + Cao ethanol 70% Cao ethanol 96% + + + + + + + + + + “+”: phát hiện, “-”: không phát B - Khoa Học Dược Hình Khuẩn lạc Lactobacillus spp mơi trường MRS sau ngày ni ủ 37oC, khí trường 5% CO2 Kết thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh chủng S mutans Hình cho thấy tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn S mutans Trong kháng sinh có tỷ lệ kháng cao ceftriaxone (64,71%), erythromycin (52,94%), cefotaxime (35,29%) 39 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Hình Biểu đồ tỷ lệ kháng kháng sinh chủng S mutans Hình Biểu đồ tỷ lệ kháng kháng sinh chủng Lactobacillus spp Hình Biểu đồ tỷ lệ chủng vi khuẩn S mutans kháng đa kháng sinh Hình Biểu đồ tỷ lệ kháng đa kháng sinh chủng Lactobacillus spp Kết thử nghiệm tính nhạy cảm kháng sinh chủng Lactobacillus spp Kết khảo sát khả ức chế khuẩn S mutans ATCC 35668 chủng S mutans phân lập từ bệnh phẩm cao chiết bàng Kết nghiên cứu cho thấy số chủng Lactobacillus spp nhạy hoàn toàn với kháng sinh thử nghiệm (chiếm 63,33%), số cịn lại có biểu đề kháng với vài kháng sinh (chiếm 36,67%) Các chủng Lactobacillus spp nhạy hoàn toàn với clindamycin linezolid, số chủng Lactobacillus spp có biểu đề kháng với kháng sinh penicillin, ampicillin, vancomycin erythromycin, đề kháng cao penicillin (20%), vancomycin (16,67%) (Hình 5) Hình cho thấy tình trạng đa kháng kháng sinh chủng Lactobacillus spp phân lập từ mẫu bệnh phẩm 40 Cao chiết Bàng từ dung môi ethanol 70%, ethanol 96% nước thu hồi sau đuổi dung môi đem khảo sát khả ức chế S mutans Kết thử nghiệm cho thấy cao chiết Bàng nồng độ 200 mg/ml từ dung mơi khơng có khả ức chế vi khuẩn S mutans ATCC 35668 chủng S mutans phân lập từ mẫu bệnh phẩm (Hình 7) Kết khảo sát khả ức chế chủng Lactobacillus spp phân lập từ mẫu bệnh phẩm cao chiết Bàng Kết Hình Bảng cho thấy cao chiết Bàng từ nước, ethanol 70%, ethanol 96% có hoạt tính ức chế Lactobacillus spp cao B - Khoa Học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Trong tổng số 30 chủng Lactobacillus spp phân lập từ bệnh phẩm có 25 chủng bị ức chế nồng độ 200 mg/ml chủng không bị ức chế L010/1, L017, L060, L062, L065 cao chiết nước Cao chiết Bàng từ ethanol 70% nồng độ 50 mg/ml có 29 chủng bị ức chế có chủng khơng bị ức chế L065 Cao chiết Bàng từ ethanol 96% nồng độ 50 mg/ml có có 28 chủng bị ức chế chủng không bị ức chế L029 L065 Ngồi ra, có khác biệt đường kính vòng ức chế vi khuẩn loại cao chiết Đường kính vịng ức chế vi khuẩn Nghiên cứu cao chiết nước nhỏ so với đường kính vịng ức chế vi khuẩn cao chiết ethanol 70% 96% nồng độ Tuy nhiên, chênh lệch đường kính vịng ức chế cao chiết ethanol 70% 96% khác chủng Lactobacillus spp.: nồng độ 200 mg/ml có 15 chủng Lactobacillus spp có đường kính vịng ức chế cao chiết ethanol 70% nhỏ so với cao chiết ethanol 96%, 10 chủng có vịng ức chế cao chiết ethanol 70% lớn so với cao chiết ethanol 96%, chủng có đường kính vịng ức chế cao chiết ethanol 70% 96% Hình Kết khảo sát khả ức chế vi khuẩn S mutans (chủng Sm065) cao Bàng A hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng nước; B hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng ethanol 70%; C hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng ethanol 96%; (+) đối chứng dương (Chlorhexidine gluconate 0,12%); (-) đối chứng âm (nước cất vô trùng cao chiết nước, DMSO 1% cao chiết ethanol 70% 96%); 1, 2, 3, cao chiết tương ứng với nồng độ 25 mg/ml, 50 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml Hình Kết khảo sát khả ức chế vi khuẩn Lactobacillus spp (chủng L080/1) cao Bàng A hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng nước; B hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng ethanol 70%; C hình ảnh vịng ức chế cao chiết Bàng ethanol 96%; (+) đối chứng dương (Chlorhexidine gluconate 0,12%); (-) đối chứng âm (nước cất vô trùng cao chiết nước, DMSO 1% cao chiết ethanol 70% 96%); 1, 2, 3, cao chiết tương ứng với nồng độ 25 mg/ml, 50 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml B - Khoa Học Dược 41 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Bảng Kết vòng ức chế vi khuẩn Lactobacillus spp phân lập từ mẫu bệnh phẩm cao Bàng MẪU L001 L002 L003 L007 L010/1 L010/2 L015 L017 L023 L024 L029 L030 L033 L037 L039 L060 L062 L063 L065 L067 L074 L075/1 L075/2 L080/1 L080/2 L081 L084/1 L084/2 L088 L091 42 Chứng (-) Chứng (+) 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 21,8 0,8 18,7 ± 0,6 21,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 21,3 ± 0,6 21,8 ± 0,3 22,0 ± 0,0 16,2 ± 0,3 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 16,7 ± 0,3 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 18,7 ± 0,6 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 22,0 ± 0,0 ĐƯỜNG KÍNH VỊNG ỨC CHẾ VI KHUẨN LACTOBACILLUS SPP (mm) CAO CHIẾT NƯỚC CAO CHIẾT ETHANOL 70% CAO CHIẾT ETHANOL 96% 25 50 100 200 25 50 100 200 25 50 100 200 mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml 24,0 25,3 29,5 34,8 24,3 25,8 29,7 36,0 25,7 27,7 30,3 34,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 7,8 10,0 11,8 15,2 11,0 12,7 19,5 22,2 12,3 13,7 16,5 21,3 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,6 11,8 12,3 14,2 15,8 10,3 21,8 26,0 35,8 10,7 13,0 15,7 19,3 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 9,5 17,3 23,7 26,3 11,0 20,8 27,3 29,5 16,5 25,7 28,3 32,8 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,8 ± 0,8 ± 0,9 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,3 0,0 ± 0,0 0,0 0,0 0,0 11,3 13,7 16,0 0,0 11,7 13,3 19,3 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 10,8 15,7 19,3 21,0 11,5 17,7 22,3 25,8 11,3 15,2 32,3 33,7 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,3 ± 0,6 0,0 11,0 14,5 21,8 11,3 14,0 19,8 24,8 11,0 13,8 24,5 29,7 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,3 ± 0,8 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,6 0,0 0,0 0,0 0,0 11,0 ± 13,0 16,2 19,0 10,7 12,7 14,5 16,3 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 0,0 ±0,0 ± 0,8 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,6 11,8 ± 14,3 17,7 21,5 10,7 21,7 270 31,2 11,8 14,3 18,0 22,3 0,3 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,5 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 0,0 10,8 14,8 22,3 10,2 21,2 27,0 31,3 21,7 25,7 30,3 35,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 0,0 0,0 0,0 10,3 0,0 11,0 13,3 16,3 0,0 0,0 0,0 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 8,7 10,2 12,3 15,5 9,0 12,0 16,3 23,5 ± 8,7 10,3 12,2 15,7 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,5 ± 0,5 ± 0,0 ± 0,8 0,9 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,6 0,0 10,2 14,2 21,3 8,0 11,7 16,3 23,7 0,0 10,5 14,0 22,0 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,5 ± 0,0 ± 0,0 0,0 11,8 14,7 21,3 11,8 15,2 21,7 28,0 24,3 26,3 27,7 33,7 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 7,8 9,8 12,0 15,8 8,0 11,7 18,3 25,0 24,8 27,0 28,.3 36,0 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,8 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 11,0 13,3 15,0 10,3 11,3 14,3 16,3 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 11,5 13,7 15,3 0,0 12,0 14,3 17,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,5 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,0 ±0,6 ± 0,9 0,0 12,0 15,8 22,0 7,8 12,5 18,2 25,8 8,0 11,8 17,5 27,2 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± ,9 ±0,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ±0,0 0,0 8,3 10,0 12,2 16,0 12,0 16,2 22,0 28,3 11,2 16,0 21,7 28,0 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,0 ±0,0 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,8 0,5 0,6 ±0,0 12,0 ± 15,7 17,8 21,2 11,3 22,3 26,2 32,2 ± 12,0 23,3 27,7 32,3 0,0 ± 0,6 ± 0,3 ± 0.3 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,8 0,3 ± 0,0 ±0,6 ± 0,6 ± 0,6 8,0 10,0 12,0 16,0 9,0 9,8 12,3 15,8 9,0 9,8 12,3 15,8 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,9 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 11,8 16,0 18,0 21,5 12,7 16,2 19,2 22,7 12,3 16,2 18,5 22,8 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,5 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,5 ± 0,3 23,2 26,0 31,5 33,3 24,0 26,0 31,3 35,5 26,0 26,3 30,3 35,2 ± 0,8 ± 0,0 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,8 21,8 ± 22,3 29,8 31,8 16,0 15,8 ± 21,7 20,7 14,8 21,0 23,7 ± 26,3 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,0 0,3 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,9 0,6 ± 0,6 12,0 16,3 18,0 21,8 12,2 15,5 18,3 22,0 23,7 26,0 28,8 33,3 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,8 ± 0,6 10,3 12,3 14,3 16,2 13,3 15,8 18,8 21,0 14,3 16,3 19,3 22,3 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 23,8 27,7 28,8 31,2 23,2 28,3 28,7 31,5 29,8 31,0 34,5 37,5 ± 0,3 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,3 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,3 ± 0,0 ± 0,9 ± 0,9 24,0 ± 27,2 31,2 32,3 26,0 27,3 31,7 36,0 23,7 27,5 30,3 35,3 0,0 ± 0,8 ± 0,8 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,6 24,0 25,7 30,3 36,3 25,7 27,7 32,2 37,5 25,7 27,7 31,7 36,5 ± 0,0 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,3 ± 0,9 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,6 ± 0,5 B - Khoa Học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 BÀNLUẬN Hiệu tách chiết cao Hiệu suất trung bình chiết cao Bàng từ nước đạt cao (23,75%), chiết ethanol 70% 96% thấp (9,12% 8,95%) Hoạt tính kháng khuẩn thực vật, cao chiết dược liệu có chứa thành phần alkaloid, flavonoid, terpenoid, phenol, tanin… Dựa vào kết định tính hợp chất tự nhiên cao cho thấy có diện nhiều nhóm hợp chất có hoạt tính sinh học như: alkaloid, flavonoid, terpenoid, phenol, tanin, saponin phát có cao nước, khơng phát có cao cồn Điều hàm lượng saponin cao chiết cồn ethanol 70% 96% thấp ngưỡng phát Kết định tính phù hợp với kết nghiên cứu trước Krishnaveni cộng (2015)(4), Akharaiyi cộng (2011)(5) Tính nhạy cảm kháng sinh chủng S mutans Kết nghiên cứu cho thấy hầu hết kháng sinh theo hướng dẫn biện giải CLSI M100 EUCAST v10 có tình trạng S mutans đề kháng Những kháng sinh có tỷ lệ chủng S mutans đề kháng cao là: ceftriaxone (64,71%), erythromycin (52,94%), cefotaxime (35,29%) Một số kháng sinh có tỷ lệ đề kháng thấp như: chloramphenicol (11,76%), penicillin (17,65%) Kết khác biệt với kết Gamboa cộng (2004)(19) chủng S mutans nhạy cao với penicillin, erythromycin, clindamycin vancomycin; khác với nghiên cứu Salman cộng (2015)(20) chủng S mutans nhạy với penicillin, ampicillin, cefotaxime, erythromycin chloramphenicol Tuy nhiên có giống kết chủng vi khuẩn S mutans kháng kháng sinh Lưu Hồng Lạt cộng (2018)(21) như: vancomycin (44,80%), cefotaxime (44,30%), ceftriaxone (30%); Karikalan cộng (2016) như: vancomycin (63%), (22) erythomycin (86%), clindamycin (100%) B - Khoa Học Dược Nghiên cứu Ngồi ra, tình trạng đa kháng kháng sinh chủng S mutans có xu hướng tăng so với nghiên cứu trước tác giả Lưu Hồng Lạt(21), kháng loại kháng sinh chiếm 11,76%, kháng loại kháng sinh chiếm 5,88% tổng số 10 loại kháng sinh thử nghiệm Kết phù hợp với tình trạng vi khuẩn kháng kháng sinh giới Tính nhạy cảm kháng sinh chủng Lactobacillus spp Theo hướng dẫn biện giải CLSI M45 kết nghiên cứu cho thấy chủng Lactobacillus spp nhạy hoàn toàn với clindamycin linezolid, số chủng Lactobacillus spp có biểu đề kháng với kháng sinh penicillin, ampicillin, vancomycin erythromycin, penicillin có tỷ lệ kháng cao (20,00%), vancomycin (16,67%) Kết có khác biệt so với nghiên cứu Sahar cộng phương pháp khuếch tán đĩa thạch Kirby-Bauer 100% chủng Lactobacillus nhóm nghiên cứu phân lập đề kháng penicillin, 64% đề kháng vacomycin, tỷ lệ đa đề kháng kháng sinh biểu cao (57% số chủng đề kháng với loại kháng sinh nhóm thử nghiệm)(23) Kết khác biệt so với kết nghiên cứu Vijayalakshmi cộng (2016), tỷ lệ kháng vancomycin 40%(24) Như vậy, chủng Lactobacillus spp nhóm phân lập nghiên cứu có biểu đề kháng kháng sinh đa đề kháng kháng sinh thấp Khả ức chế vi khuẩn S mutans Lactobacillus spp cao chiết Bàng Kết thực nghiệm nhóm cho thấy cao chiết Bàng từ dung môi ethanol 70%, 96% nước nồng độ 200 mg/ml khơng có hoạt tính ức chế S mutans Tuy nhiên, cao chiết Bàng từ dung mơi có hoạt tính ức chế Lactobacillus spp tốt Cao chiết Bàng từ ethanol 70% 96% có khả ức chế Lactobacillus spp tốt so với cao chiết nước mức nồng độ Ở 43 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 mức nồng độ 50 mg/ml cao chiết Bàng từ ethanol 70% ức chế 29/30 số chủng, cao chiết từ ethanol 96% ức chế 28/30 số chủng Lactobacillus spp phân lập, mức nồng độ cao kết tương tự ức chế S mutans S sobrinus, tác nhân gây sâu răng, viêm nha chu(28) Do đó, nhóm nghiên cứu cần nghiên cứu thêm cao chiết bàng có hoạt tính ức chế cụ thể loài Lactobacillus Trong kết Bảng cho ta thấy đường kính vòng ức chế cao chiết bàng từ nước, ethanol 70% ethanol 96% nồng độ có khác biệt chủng chủng Lactobacillus spp Điều lý giải loài khác chi Lactobacillus spp có mức độ phản ứng khác với loại cao chiết Tuy nhiên, nhìn tổng quát khả ức chế Lactobacillus spp cao chiết Bàng từ ethanol 70% 96% tốt cao chiết từ nước, vài trường hợp cho thấy nồng độ 200 mg/ml cao chiết Bàng có hoạt tính ức chế tốt so với chlorhexidine gluconate 0,12% Đây tiền đề để nhóm nghiên cứu phân tích tiếp mức độ ức chế cao Bàng chủng Lactobacillus spp định danh tới bậc phân loại lồi Vì theo liệu nghiên cứu trước Caufield cộng phát nhóm loài Lactobacillus tương tự chiếm ưu sâu người lớn trẻ nhỏ bao gồm L fermentum, L rhamnosus, L gasseri, L casei/paracasei, L salivarius, L plantarum, tỷ lệ L oris L vaginalis(25) Trong nghiên cứu Kralj cộng sự(26), Almståhl cộng sự(27) phát gen loài L reuteri, L fermentum, L parabuchneri L sakei phân lập từ đứa trẻ bị sâu có chứa hệ enzyme glucosyltransferase, phosphotransferase sử dụng chuyển hóa tổng hợp glucan từ sucrose, yếu tố làm tăng kết dính tạo mảng bám giúp chúng trì tổn thương sâu Tuy nhiên, số nghiên cứu gần cho thấy số loài Lactobacillus phân lập từ người lớn bị sâu chuyển hóa xylitol, mannitol sorbitol, loại đường thường khuyên dùng để kiểm soát sâu chất làm không gây hại chất chống sâu chủng L rhamnosus(27) L rhamnosus cho có khả Ngoài ra, diện hợp chất có hoạt tính sinh học cao chiết bàng như: alkaloid, flavonoid, terpenoid, phenol, tanin phù hợp với số kết nghiên cứu trước Trong cho thấy thành phần tanin cao chiết bàng có khả ức chế số biểu kiểu hình số lồi vi khuẩn thử nghiệm ức chế hình thành màng sinh học, phân giải protein; alkaloid cao chiết Bàng có tác dụng ức chế số lồi vi khuẩn(3) Như vậy, hoạt tính ức chế Lactobacillus spp hợp chất có cao chiết Bàng Trong nghiên cứu Akharaiyi cộng cho thấy cao chiết Bàng non nước có chứa hợp chất có hoạt tính sinh học cao so với cao chiết Bàng trưởng thành hay Bàng già (lá màu đỏ) Vì vậy, hoạt tính ức chế số lồi vi khuẩn cao chiết Bàng non cao so với cao chiết từ Bàng trưởng thành hay Bàng già(5) Do đó, với quan điểm truyền miệng trước dân gian dịch chiết Bàng non có khả kháng khuẩn gây bệnh sâu người dân sử dụng dịch chiết nước Bàng non để phịng ngừa sâu đề tài nghiên cứu cho thấy cao chiết Bàng trưởng thành từ dung môi ethanol 70%, 96% nước nồng độ 200 mg/ml khơng có hoạt tính ức chế khuẩn S mutans nguyên nhân gây sâu răng, mà có hoạt tính ức chế Lactobacillus spp coi đối tượng gây sâu thứ cấp, ngun nhân tạo mơi trường acid góp phần trình phát triển bệnh sâu răng(25) Do đó, nhóm nghiên cứu cần thử nghiệm hoạt tính ức chế cao chiết Bàng non S mutans để có đánh giá tồn diện hoạt tính ức chế nhóm vi khuẩn gây sâu cao chiết Bàng giai đoạn phát triển khác 44 B - Khoa Học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 KẾT LUẬN Từ 95 mẫu phết sâu bệnh nhân nhóm nghiên cứu phân lập 17 chủng S mutans, 30 chủng Lactobacillus spp Cao chiết Bàng từ ethanol 70%, 96% nước có diện nhiều nhóm hợp chất có hoạt tính sinh học như: alkaloid, flavonoid, terpenoid, phenol, tanin có khả ức chế vi khuẩn Lactobacillus spp tác nhân gây sâu thứ cấp Tuy nhiên, kết cho thấy cao chiết Bàng từ dung mơi khơng có hoạt tính ức chế vi khuẩn S mutans nồng độ 200 mg/ml Nghiên cứu 12 13 14 15 16 Lời cảm ơn 17 18 Đề tài nghiên cứu khoa học Trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng cấp kinh phí thực mã số đề tài GV2006 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 James SL, Castle CD, Dingels ZV, et al (2018) Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 354 diseases and injuries for 195 countries and territories, 1990-2017: A systematic analysis for the Global Burden of Diseases Study 2017 Lancet, 392:1789-1858 Manchin J (2010) West Virginia Oral Health Plan 2010 – 2015 Health Human Resource, 1-40 Arumugam VA, Natarajan D, Pannerselvam PK (2015) An updated review of Terminalia catappa Pharmacognosy Reviews, 9(18):93-98 Krishnaveni M, Krishna KG, Kalaivani M, Ragina BC (2015) A preliminary study on Terminalia catappa L Leaf, Stem Research J Pharm and Tech, 8(12):1635-1639 Akharaiyi FC, Ilori RM, Adesida (2011) Antibacterial effect of Terminalia catappa on some selected pathogenic bacteria Int J Pharm Biomed Res, 2(2):64-67 Đỗ Tất Lợi (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, pp.201-202, 564-578 Nhà Xuất Bản Y Học, Hà Nội Lim TK (2012) Edible medicinal and non-medicinal plants: fruits V2, pp.145-146 Springer Dordrecht Heidelberg, London - New York Salman HA, Senthilkumar R, Imran K, Selvam KP (2017) Isolation and typing of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus from caries-active subjects Contemp Clin Dent, 8(4):587-593 Ahirwar SS, Gupta MK, Gupta G, Singh V (2017) Screening, isolation and identification of Lactobacillus species from dental caries of children Int J Curr Microbiol App Sci, 6(1):497-503 Clinical and Laboratory Standards Institute (2020) Performance standards for antimicrobial susceptibility testing CLSI supplement M100S, 30th ed, pp.92-94 Clinical and Laboratory Standards Institute, Pennsylvania, USA The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (2020) Breakpoint tables for interpretation of MICs and zone diameters EUCAST clinical breakpoint tables, v.10.0, pp.55-59 EUCAST Development Laboratory, Växjö, Sweden B - Khoa Học Dược 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Clinical and Laboratory Standards Institute (2015) Methods for antimicrobial dilution and disk susceptibility testing of infrequently isolated or fastidious bacteria CLSI supplement M45, 3rd ed, pp.38-41 Clinical and Laboratory Standards Institute, Pennsylvania, USA Bộ Y tế (2017) Dược điển Việt Nam, 5th ed, PL-9, PL-195, PL-196, PL-197, PL-204, PL-279 Nhà Xuất Bản Y Học, Hà Nội Nguyễn Kim Phi Phụng (2007) Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, pp.35-36 Nhà Xuất Bản Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh Saxena M, Saxena J (2012) Phytochemical screening of Acorus calamus and Lantana camara International Research Journal of Pharmacy, 3(5):324-326 Clinical and Laboratory Standards Institute (2018) Performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests CLSI supplement M002, 13th ed, pp.15-28 Clinical and Laboratory Standards Institute, Pennsylvania, USA Bộ Y tế (2005) Dược liệu, pp.15-23 Nhà Xuất Bản Y Học, Hà Nội Who Health Organnization (2007) WHO guidelines for assessing quality of herbal medicines with reference to contaminants and residues, pp.24-25 Who Health Organnization, Geneva, Switzerland Gamboa F, Estupiñan M, Galindo A (2004) Presence of Streptococcus mutans in saliva and its relationship with dental caries: antimicrobial susceptibility of the isolates Universitas Scientiarum, 9(2):23-27 Salman HA, Senthikumar R (2015) Identification and antibiogram profile of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus from dental caries subjects Journal of Applied Pharmaceutical Science, 5(6):054-057 Lưu Hồng Lạt, Lê Dương Vương, Phan Thị Phượng Trang (2018) Phân lập Streptococcus mutans gây sâu khảo sát ức chế vi khuẩn số dược liệu dân gian Phát Triển Khoa Học Công Nghệ, 2(2):31-37 KariKalan S, Mohankumar A (2016) Antiniogram of S mutans isolated from dental caries patients International Journal of Medical and Health Research, 2(3):79-83 Sahar NG, Masoumeh F (2017) Molecular detection of antibiotic resistance determinants in Lactobacillus bacteria isolated from human dental plaques J Med Microbiol Infect Dis, 5(3-4):51-55 Vijayalakshmi S, Mohankumar A (2016) Emerging of sodium fluoride resistant lactobacilli isolated from dental caries patients Biosc Biotech Res Comm, 9(2):296-303 Caufield PW, Schön CN, Saraithong P, Li1 Y, Argimón S (2015) Oral lactobacilli and dental caries: A model for niche adaptation in humans JDR Clinical Research Supplement, 94(2):1105-1185 Kralj S, Van Geel-Schutten GH, Dondorff MM, et al (2004) Glucan synthesis in the genus Lactobacillus: isolation and characterization of glucansucrase genes, enzymes and glucan products from six different strains Microbiology, 150(11):3681-3690 Almståhl A, Lingström P, Eliasson L, Carlén A (2013) Fermentation of sugars and sugar alcohols by plaque Lactobacillus strains Clin Oral Investig, 17(6):1465-1470 Laetitia B, Fatiha C, Daniel G (2009) Probiotic for oral health: Myth or realty JCDA, 75(8):585-590 Ngày nhận báo: 04/06/2021 Ngày phản biện nhận xét báo: 29/10/2021 Ngày báo đăng: 20/12/2021 45 ... chủng vi khuẩn S mutans, Lactobacillus spp gây bệnh sâu khảo sát chiết xuất từ Bàng nhằm ức chế chúng tiền đề cho nghiên cứu ứng dụng chiết xuất từ Bàng phòng điều trị bệnh sâu S mutans, Lactobacillus. .. vịng ức chế cao chiết ethanol 70% lớn so với cao chiết ethanol 96%, chủng có đường kính vịng ức chế cao chiết ethanol 70% 96% Hình Kết khảo sát khả ức chế vi khuẩn S mutans (chủng Sm065) cao Bàng. .. cao chiết Đường kính vịng ức chế vi khuẩn Nghiên cứu cao chiết nước nhỏ so với đường kính vịng ức chế vi khuẩn cao chiết ethanol 70% 96% nồng độ Tuy nhiên, chênh lệch đường kính vịng ức chế cao