Thông tin tài liệu
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP (Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG THÁI NGUYÊN - 2016 download by : skknchat@gmail.com ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP ( Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Duy THÁI NGUYÊN - 2016 download by : skknchat@gmail.com i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thực hiện dưới sự hướng dẫn TS Nguyễn Văn Duy Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Trịnh Thị Tuyết download by : skknchat@gmail.com ii LỜI CẢM ƠN Lời xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Duy ThS Nguyễn Thị Tình, Khoa CNSH - CNTP, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ tơi suốt thời gian thực hiện hoàn thành luận văn Tôi xin cảm ơn thầy cô giáo anh chi ̣ kỹ thuật viên phịng thí nghiệm nuôi cấy mô tế bào thực vật , Khoa CNSH - CNTP, Trường đại học Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ q trình làm luận văn thạc sĩ Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Trường Đại học Khoa ho ̣c - Đại học Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa Khoa ho ̣c Sự số ng thầy cô giáo, cán Khoa, đặc biệt sự quan tâm, giúp đỡ các anh chi ̣kỹ thuâ ̣t viên phịng thí nghiệm Khoa Khoa ho ̣c sự sớ ng Tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè ln bên cạnh ủng hộ, khuyến khích, động viên tạo động lực để tơi hồn thành luận văn Trong q trình làm luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi mong nhận sự đóng góp q báu từ phía thầy bạn bè để tơi làm tốt Tác giả luận văn Trịnh Thị Tuyết download by : skknchat@gmail.com iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phân loại đặc điểm lan Hài lan Hài Giáp 1.1.1 Đặc điểm thực vật học lan Hài (Paphiopedilum) 1.1.2 Đặc điểm thực vật học lan Hài Giáp 11 1.2 Khái quát nuôi cấy mô tế bào 15 1.2.1 Các vấn đề thường gặp nhân giống in vitro 15 1.2.2 Ưu nhược điểm phương pháp nuôi cấy mô 16 1.2.3 Quy trình nhân giống in vitro 18 1.2.4 Ứng dụng nuôi cấy mô nghiên cứu ứng dụng nông nghiệp 20 1.3 Tình hình nghiên cứu ni cấy mô lan Hài giới nước 21 1.3.1 Trên giới 21 1.3.2 Trong nước 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 26 2.2 Phạm vi nghiên cứu 27 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 27 download by : skknchat@gmail.com iv 2.4 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 28 2.4.1 Hóa chất 28 2.4.2 Thiết bị 28 2.4.3 Dụng cụ 28 2.5 Phương pháp nghiên cứu 29 2.5.1 Phương pháp chuẩn bị môi trường điều kiện nuôi cấy 29 2.5.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 30 2.5.3 Phương pháp xử lí số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1 % đến lan Hài Giáp 33 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt lan Hài Giáp 35 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hợp chất hữu đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 36 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan hài Hài Giáp 36 3.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 3.3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 3.4 Kết nghiên cứu tạo in vitro hoàn chỉnh 45 3.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ lan Hài Giáp 45 3.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính tới khả rễ 48 3.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 50 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC download by : skknchat@gmail.com v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADN: Deoxyribonucleic acid B5: Gamborg cs, 1976 BA : - benzyl amino purine CT : Công thức CS : Cộng sự ĐC : Đối chứng KC: Knudson C MS : Murashighe Skoog, 1962 NAA : Naphthalene acetic acid PCR: Polymerase Chain Reaction RAPD: Random Amplification of Polymorphic DNA THT : Than hoạt tính SH: Schenk and Hildebrandt, 1972 VW : Vacin and Went WPM : Woody Plant Medium – Lioyd Mc Cown, 1980 download by : skknchat@gmail.com vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Các nhóm lan Hài Viê ̣t Nam theo thứ ̣ng bảo tồ n của Tổ chức Bảo tồ n Thiên nhiên Quố c tế (IUCN) Bảng 2.1: Hóa chất nghiên cứu 28 Bảng 2.2: Thiết bị nghiên cứu 28 Bảng 3.1: Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến lan Hài Giáp 33 Bảng 3.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt 35 Bảng 3.3: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh lan Hài Giáp 37 Bảng 3.4: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 40 Bảng 3.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 43 Bảng 3.6: Ảnh hưởng NAA tới sự rễ 46 Bảng 3.7: Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính ảnh hưởng tới khả rễ 48 Bảng 3.8: Sự phát triển lan Hài Giáp số giá thể ngồi mơi trường tự nhiên (sau tuần) 51 download by : skknchat@gmail.com vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Hình thái lan Hài Giáp 13 Hình 2.1: Cây lan Hài Giáp 27 Hình 2.2: Sơ đồ thí nghiệm 29 Hình 3.1: Ảnh hưởng mơi trường tới khả nảy mầm hạt sau 12 tuần 36 Hình 3.2: Ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 Hình 3.3: Ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 Hình 3.4: Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh lan Hài Giáp 44 Hình 3.5: Ảnh hưởng NAA tới khả rễ lan Hài Giáp 47 Hình 3.6: Ảnh hưởng NAA kết hợp với THT tới khả rễ lan Hài Giáp 50 Hình 3.7: Ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 52 download by : skknchat@gmail.com MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Hoa lan người biết đến sớm từ 2.800 năm TCN, coi đỉnh cao tiến hóa lồi hoa Hiện giới với 800 chi 25.000 – 30.000 loài Họ Lan (Orchidaceae) chiếm vị trí thứ hai sau họ Cúc (Asteraceae) ngành thực vật hạt kín [20] Vì hình thái, cấu tạo hệ thống phân loại họ đa đa dạng phức tạp Việt Nam quốc gia đánh giá có sự đa dạng sinh học phong phú, phong lan Việt Nam đa dạng số loài, màu sắc chủng loại với 140 loại phong lan chia thành 1000 giống nguyên thủy Chúng thường phân bố vùng rừng núi Cao Bằng, Sa Pa, Lào Cai, Huế, Hải Vân, Quy Nhơn, Kontum, Pleiku, Ban Mê Thuật, Phan Rang, Đà Lạt, Di Linh, v.v [13] Trong số loài lan Việt Nam có nhiều quý điển hình giống Lan Hài (Paphiopedilum) gồm 66 lồi phân bố từ Ấn Độ, New Ghine vùng Đông Nam Á, người Pháp gọi loài thuộc giống Hài Vệ Nữ Sabot de Venus người Anh dùng với ý nghĩa tương tự Lady's slippers [1] Hiện Việt Nam tìm thấy 22 lồi thuộc chi Paphiopedilum có lồi đặc hữu có giá trị xuất hiện Việt Nam lan Hài Đỏ, lan Hài Vàng, lan Hài Tía, lan Hài Trắng, lan Hài Vân, lan Hài Vân Duyên, lan Hài Đốm, lan Hài Lông hay lan Hài Râu,…[1] Lan Hài Giáp loài lan xuất hiện số tỉnh miền núi phía bắc Bắc Kạn, Hà Giang, Hịa Bình, Lạng Sơn, Sơn La,…Loài sinh sống khu rừng nguyên sinh rậm, thường xanh rộng hỗn giao kim núi đá vôi kết tinh bị bào mòn mạnh độ cao từ 600 đến 1200m [16] Đây loài lan Hài đặc biệt có hoa đẹp tao nhã với đài cánh hoa xanh cây, môi xám, xanh nhạt nhị lép trắng với chóp màu nâu tía, hoa có mùi thơm táo nhẹ Chúng có rộng kẻ ô chữ nhật đốm khảm xanh tươi xanh thẫm, đốm tím tía mặt dưới cụm hoa thường dài mang hoa to đơn download by : skknchat@gmail.com ... xuất hiện Việt Nam lan Hài Đỏ, lan Hài Vàng, lan Hài Tía, lan Hài Trắng, lan Hài Vân, lan Hài Vân Duyên, lan Hài Đốm, lan Hài Lông hay lan Hài Râu,…[1] Lan Hài Giáp loài lan xuất hiện số tỉnh... 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hợp chất hữu đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 36 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan hài Hài Giáp ... THỊ TUYẾT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP ( Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.02.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG
Ngày đăng: 12/04/2022, 07:58
Xem thêm:
