(LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

67 8 0
(LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN VĂN ĐỨC NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT VẮC XIN NHŨ DẦU PHÒNG HỘI CHỨNG GIẢM ĐẺ Ở Gà (EGG DROP SYNDROME-EDS’76) TẠI CÔNG TY FIVEVET Ngành: Thú y Mã số: 8640101 Người hướng dẫn khoa học: TS Trương Hà Thái TS Trịnh Quang Đại NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 download by : skknchat@gmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 03 tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Văn Đức i download by : skknchat@gmail.com LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Trương Hà Thái TS Trịnh Quang Đại tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Khoa Thú Y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán viên chức công ty Cổ phần thuốc thú y Trung Ương giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 03 tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Văn Đức ii download by : skknchat@gmail.com MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Hiểu biết chung hội chứng giảm đẻ EDS (egg drop syndrome) 2.1.1 Giới thiệu chung 2.1.2 Vi rút gây bệnh hội chứng giảm đẻ 2.1.3 Hội chứng giảm đẻ EDS 76 2.2 Hiểu biết chung vắc xin 13 2.2.1 Khái niệm 13 2.2.2 Nguyên lý 13 2.2.3 Những đặc tính vắc xin 14 2.2.4 Sản xuất vắc xin phương pháp vô hoạt vi rút 15 2.2.5 Chất bổ trợ 16 2.3 Hiểu biết chung miễn dịch 17 Phần Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.1 Nội dung nghiên cứu 19 3.1.1 Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vắc xin phịng hội chứng giảm đẻ gà (EDS) 19 3.1.2 Đánh giá kiểm tra chất lượng vắc xin phòng hội chứng giảm đẻ gà (EDS) 19 3.2 Đối tượng, nguyên liệu địa điểm nghiên cứu 19 iii download by : skknchat@gmail.com 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 3.2.2 Địa điểm nghiên cứu 19 3.2.3 Nguyên liệu 19 3.2.4 Các loại dung dịch, môi trường 19 3.2.5 Trang thiết bị máy móc, dụng cụ phịng thí nghiệm 20 3.3 Phương pháp nghiên cứu 21 3.3.1 Tiêm vào xoang niệu mô 21 3.3.2 Phương pháp nhân vi rút trứng vịt có phơi 10-11 ngày tuổi 21 3.3.3 Phương pháp làm HA, HI 22 3.3.4 Phương pháp xác định EID50 24 3.3.5 Xác định vi rút chuẩn độ vi rút EDS nước trứng thu 25 3.3.6 Bất hoạt vi rút 25 3.3.7 Kiểm tra bất hoạt 25 3.3.8 Phương pháp nhũ hóa vắc xin 26 3.3.9 Phương pháp kiểm tra sau nhũ hóa vắc xin 26 3.3.10 Quy trình sản xuất vắc xin 27 3.3.11 Kiểm tra chất lượng vắc xin 27 3.3.12 Phương pháp tiêm vắc xin thu thập huyết 29 3.3.13 Phương pháp thu thập số liệu, xử lý thống kê sinh học 30 Phần Kết thảo luận 31 4.1 Nghiên cứu sản xuất vắc xin vơ hoạt nhũ dầu phịng hội chứng giảm đẻ EDS’76 31 4.1.1 Xác định liều gây nhiễm vi rút EDS phôi trứng vịt 10-11 ngày thời gian thu vi rút phôi trứng vịt 31 4.1.2 Nghiên cứu tối ưu nồng độ chất bất hoạt vắc xin 33 4.1.3 Nghiên cứu xác định liều vi rút sử dụng vắc xin 35 4.1.4 Nghiên cứu trình nhũ hóa, bổ sung chất bổ trợ vắc xin 36 4.2 Đánh giá kiểm tra chất lượng vắc xin phòng hội chứng giảm đẻ gà (EDS) 37 4.2.1 Nghiên cứu sản xuất 03 lô vắc xin vơ hoạt phịng hội chứng giảm đẻ gà 37 4.2.2 Kiểm nghiệm thành phẩm vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội hội chứng giảm đẻ EDS gà 42 4.2.3 Kiểm tra hiệu lực độ dài miễn dịch vắc xin gà 4-6 tuần tuổi 46 Phần Kết luận kiến nghị 50 iv download by : skknchat@gmail.com 5.1 Kết luận 50 5.1.1 Giống vi rút EDS’76 có đặc điểm số sau 50 5.1.2 Vắc xin EDS đạt tiêu vơ trùng, an tồn, hiệu lực trình kiểm nghiệm 50 5.2 Kiến nghị 51 Tài liệu tham khảo 52 v download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt BPL β probiolacton ĐC Đối chứng EDS Egg Drop Syndrome EID50 Embryo Infective Dosage 50 (Liều gây nhiễm 50% phôi) FiveVet Central Veterinary Medicine JSC No.5 GMP Good Manufacturing Practices (Thực hành sản xuất tốt) HGKT Hiệu giá kháng thể HI Haemagglutination inhibition IHA Indirect Haemagglutination Assay (Phản ứng ngưng kết hồng cầu gián tiếp) PBS Phosphate Buffered Saline SPF Specific Pathogen-Free VX Vắc xin WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) HT Huyết TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam HC Hồng cầu vi download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Bảng phân loại họ Adenoviridae Bảng 3.1 Cơng thức Reed & Muench tính EID50 25 Bảng 3.2 Bố trí thí nghiệm nhà ni động vật 29 Bảng 4.1 Xác định liều gây nhiễm thời gian thu hoạch 32 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu bất hoạt kháng nguyên EDS với formol ba nồng độ 0,05%, 0,1%, 0,2% 34 Bảng 4.3 Xác định liều vi rút sử dụng vắc xin 35 Bảng 4.4 Kết lý hóa sau nhũ hóa vắc xin dầu khống ISA 71 VG 37 Bảng 4.5 Kết hiệu giá thu lô kháng nguyên liên tiếp 38 Bảng 4.6 Kết kiểm tra vô trùng 38 Bảng 4.7 Kết xác định EID50 vi rút EDS 39 Bảng 4.8 Kết EID50 lô kháng nguyên 40 Bảng 4.9 Kết kiểm tra vi rút sau vô hoạt phôi vịt nồng độ 0,1% 41 Bảng 4.10 Kết kiểm tra vô trùng 41 Bảng 4.11 Kết ba lô sản xuất 42 Bảng 4.12 Kết kiểm tra cảm quan vắc xin EDS vô hoạt 43 Bảng 4.13 Kết vô trùng lô vắc xin 43 Bảng 4.14 Kiểm tra tính ổn định vắc xin 45 Bảng 4.15 Kết kiểm tra an tồn lơ vắc xin nhũ dầu gà 46 Bảng 4.16 Biến động hiệu giá kháng thể kháng vi rút EDS gà 4-6 tuổi chưa miễn dịch sở EDS 47 vii download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cấu tạo hính thái Hình 2.2 Trứng biến đổi Hình 3.1 Tóm tắt quy trình sản xuất vắc xin EDS’76 nhũ dầu chế phôi vịt 27 Hình 4.4 Hình ảnh lấy máu kiểm tra kháng thể kháng vi rút EDS 47 Hình 4.5 Biểu đồ thể hiệu giá HI (log2) theo dõi 84 ngày 48 Hình 4.6 Hình ảnh HI 49 vii i download by : skknchat@gmail.com TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Văn Đức Tên luận văn: Nghiên cứu sản xuất vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng Hội Chứng Giảm Đẻ gà (EGG DROP SYNDROME-EDS’76) công ty FIVEVET Mã số: 8640101 Ngành: Thú y Tên sở đào tạo: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vắc xin đơn giá vơ hoạt nhũ dầu với qui mơ phịng thí nghiệm - Xây dựng số tiêu kỹ thuật qui trình sản xuất kiểm nghiệm vắc xin EDS’76 vơ hoạt nhũ dầu - Thơng qua q trình thử nghiệm đánh giá hiệu lực, độ dài miễn dịch vắc xin EDS’76 vô hoạt nhũ dầu Phƣơng pháp nghiên cứu Đề tài sử dụng phương pháp nghiên cứu sau: Tiêm vào xoang niệu mô, phương pháp nhân vi rút trứng vịt có phơi 10-11 ngày tuổi, phương pháp làm HA, HI, phương pháp xác định EID50, phương pháp xác định virus chuẩn độ virus EDS nước trứng thu được, phương pháp bất hoạt virus, phương pháp nhũ hóa vắc xin, phương pháp kiểm tra sau nhũ hóa vắc xin, quy trình sản xuất vắc xin, kiểm tra chất lượng vắc xin, phương pháp tiêm vắc xin thu thập huyết thanh, phương pháp thu thập số liệu, xử lý thống kê sinh học Kết kết luận Giống virus EDS’76 có đặc điểm số sau đây: Liều gây nhiễm thích hợp virus hội chứng giảm đẻ EDS phôi vịt 200EID50 Thời gian thu hoạch huyễn dịch virus EDS thích hợp nhất, hàm lượng virus cao, chất lượng tốt sau gây nhiễm virus 96 - Bất hoạt vi rút nồng độ Formol 0,1% điều kiện 40C 24 Hiệu giá HA= 12-13 Log2 Hiệu giá gây nhiễm 50% phôi vịt EID50/1ml 107,5 Virus EDS’76 đáp ứng u cầu kỹ thuật tính an tồn đặc tính gây miễn dịch ix download by : skknchat@gmail.com Kết bảng 4.7 cho thấy: Độ pha lỗng virus thấp số phơi nhiễm giảm số phôi không nhiễm tăng cường Ở độ pha lỗng 10 -5 tỷ lệ nhiễm phơi 100 tới 10-6 tỷ lệ phôi nhiễm 80%, nồng độ 10-7 20% từ nồng độ 10-8 tới 10-10 đỗ pha lỗng khơng có phơi nhiễm Kết kiểm tra 03 lô kháng nguyên thể bảng 4.10 Kết kiểm tra 03 lô kháng nguyên thể bảng 4.10 Bảng 4.8 Kết EID50 lô kháng nguyên Lô Kháng nguyên (L) Hiệu giá EID50 (EID50/1 ml) L1 107,3 EID50 L2 107,5 EID50 L3 107,3 EID50 Như vậy, với kết chuẩn độ hiệu giá virus giống virus EDS từ nước trứng thu hoạch hoàn toàn đáp ứng yêu cầu sản xuất vắc xin vô hoạt Kết nghiên cứu phù hợp với công bố hãng Fatro mỹ vắc xin nhũ dầu EDS (107.5 EID50) 4.2.1.3 Bất hoạt kiểm tra sau bất hoạt kháng nguyên Sau có lượng kháng nguyên đủ để sản xuất vắc xin, chúng tơi áp dụng quy trình vơ hoạt sử dụng formol 0,1% xác lập điều kiện 40C 24 Sau bất hoạt, kháng nguyên bảo quản nhiệt độ 4oC để tiến hành kiểm tra tiêu kiểm nghiệm kháng nguyên Kiểm tra vi rút sau vô hoạt Kiểm tra theo tiêu chuẩn TCVN 8685-4:2011 Để kiểm tra tính an tồn kháng ngun giống vi rút EDS sau vơ hoạt đảm bảo khơng cịn vi rút sống Chúng tơi sử dụng kháng nguyên sau vô hoạt tiêm cho 10 phôi thai vịt 10-11 ngày tuổi mẫn cảm với vi rút EDS, phôi tiêm 0,2 ml vào xoang niệu chuyển vào tủ ấp 370C ấp tiếp 3-7 Sau ngày tiến hành Giết trứng, mổ thu hoạch nước trứng kiểm tra bệnh tích phôi vịt Nước trứng sau thu hoạch kiểm tra phản ứng HA để phát có mặt vi rút EDS Nước trứng sau thu hoạch lần vi rút tiếp tục sử dụng để tiêm truyền lặp lại phôi vịt lần Kết thể bảng 4.9 40 download by : skknchat@gmail.com Bảng 4.9 Kết kiểm tra vi rút sau vô hoạt phôi vịt nồng độ 0,1% Kết kiểm tra vi rút sau vô hoạt HA Kết lần Kết lần Lô kháng nguyên (L) L1 (HA=12Log2) L2 (HA=13Log2) L3 (HA=12Log2) HA (-) n (%) HA (+) n (%) HA (-) n (%) HA (+) n (%) 10/10 (100%) 10/10 (100%) 10/10 0/10 (0%) 0/10 (0%) 0/10 10/10 (100%) 10/10 (100%) 10/10 0/10 (0%) 0/10 (0%) 0/10 (100%) (0%) (100%) (0%) Ghi chú: (-) Kết âm tính (+) Kết dương tính Như với nồng độ formol 0,1% lô kháng nguyên vô hoạt hồn tồn khơng ảnh hưởng đến sử phát triển phôi thai vịt Với kết phù hợp với công bố McFerran & Smyth, 2000 (McFerran and Smyth 2000) Ba lô kháng nguyên sau bất hoạt lấy mẫu để kiểm tra vô trùng, khiết ống môi trường (nước thịt, nước thịt gan yếm khí, thạch nấm, thạch máu) bảo quản nhiệt độ - 80oC Bảng 4.10 Kết kiểm tra vô trùng Lô kháng nguyên (L) L1 L2 L3 Loại môi trƣờng kiểm tra Thạch máu (2 ống) Thạch thƣờng (2 ống) Nƣớc thịt (2 ống) Thạch nấm (2 ống) Kết luận (+) (-) (+) (-) (+) (-) (+) (-) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) Đạt Đạt Đạt Ghi chú: (-): Âm tính, suốt, khơng đổi màu, khơng có khuẩn lạc, nấm mốc phát triển (+): Dương tính: Mơi trường đục, vẩn có khuẩn lạc phát triển Môi trường thạch máu, thạch thường, nước thịt: sau ngày đọc kết Môi trường thạch nấm đọc kết sau 14 ngày 41 download by : skknchat@gmail.com Kết kiểm tra vô trùng nước trứng thu hoạch lô sản xuất cho thấy sau ngày kiểm tra ống môi trường thạch máu, thạch thường nước thịt 14 ngày thạch nấm nói khơng phát nấm khuẩn lạc mọc môi trường kiểm tra Trên sở chúng tơi sử dụng kháng nguyên EDS’76 vô hoạt để phối hợp với chất bổ trợ nhũ dầu Montanide ISA 71 VG chế tạo vắc xin 4.2.1.4 Sản xuất ba lô vắc xin EDS vô hoạt nhũ dầu Qua kết lô kháng nguyên bất hoạt kiểm tra tiêu tiến hành sản xuất vắc xin EDS vô hoạt với thông số sau: Liều/gà: 0.5 ml/gà Điều chỉnh Hiệu giá kháng nguyên/liều: HA = 9log2 PBS trước nhũ hóa Chất bổ trợ: ISA 71 VG (seppic) Tỷ lệ phối chế: 30 Kháng nguyên : 70 chất bổ trợ ISA 71 VG Phương pháp: Nhũ hóa Bảng 4.11 Kết ba lơ sản xuất STT Số lô sản xuất Kháng nguyên (ml) Nhũ hóa (dầu ISA 71 VG) Lƣợng sản phẩm (ml) (ml) EDS - 0118 300 700 1000 EDS- 0218 300 700 1000 EDS - 0119 300 700 1000 03 lơ vắc xin sau nhũ hóa bảo quản để tiến hành bước kiểm nghiệm thành phẩm 4.2.2 Kiểm nghiệm thành phẩm vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội hội chứng giảm đẻ EDS gà 4.2.2.1 Kiểm tra cảm quan Sau sản xuất, lô vắc xin vô hoạt EDS tiến hành lấy mẫu kiểm tra cảm quan pH sản phẩm Mỗi lô vắc xin lấy mẫu để kiểm tra Kết kiểm tra thể bảng sau: 42 download by : skknchat@gmail.com Bảng 4.12 Kết kiểm tra cảm quan vắc xin EDS vô hoạt Cảm quan STT Số lô EDS - 0118 6,9 3% (đạt) Màu trắng sữa Hạt nhũ đồng Không tách lớp EDS - 0218 7,1 3% (đạt) Màu trắng sữa Hạt nhũ đồng Không tách lớp EDS - 0119 7,08 3% (đạt) Màu trắng sữa Hạt nhũ đồng Không tách lớp pH Sự ổn định Màu sắc Sự đồng hạt nhũ Phân lớp Quá trình kiểm tra tất ba lô vắc xin EDS-0118, EDS-0218, EDS-0119 có pH 6,9; 7,1; 7,08 nằm ttrong khoảng cho phép từ 6,8 đến 7,2 Vắc xin có màu trắng sữa, hạt nhũ đồng nhất, không bị tách lớp, lắng cặn Những lô vắc xin sản xuất đạt tiêu chuẩn kiểm tra pH cảm quan sản phẩm 4.2.2.2 Kiểm tra vô trùng vắc xin nhũ dầu EDS Mỗi lô sản xuất vắc xin lấy mẫu để kiểm tra khiết vắc xin môi trường: Thạch thường, nước thịt, Thạch nấm, Thạch máu (theo TCVN 8684:2011, mục kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn kiểm tra tạp nhiễm nấm mốc) Kết kiểm tra khiết vắc xin lô EDS- 0118, EDS- 0218 EDS0119 Các lô vắc xin kiểm tra vô trùng theo tiêu chuẩn ngành TCVN 8684:2011 Chúng tối tiến hành lấy lô vắc xin mẫu để kiểm tra Kết thể Bảng 4.13 Bảng 4.13 Kết vô trùng lô vắc xin Lô vắc xin Loại môi trƣờng kiểm tra Thạch máu Thạch thƣờng Nƣớc thịt Thạch nấm (2 ống) (2 ống) (2 ống) (2 ống) Kết luận (+) (-) (+) (-) (+) (-) (+) (-) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) EDS0118 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 Đạt 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) EDS0118 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 43 download by : skknchat@gmail.com Đạt 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) EDS0118 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 0/2 2/2 (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) (0%) (100%) Đạt Ghi chú: (-): Âm tính, suốt, khơng đổi màu, khơng có khuẩn lạc, nấm mốc phát triển (+): Dương tính: Mơi trường đục, vẩn có khuẩn lạc phát triển Môi trường thạch máu, thạch thường, nước thịt: sau ngày đọc kết Môi trường thạch nấm đọc kết sau 14 ngày Kết kiểm tra vô trùng nước trứng thu hoạch lô sản xuất cho thấy sau ngày kiểm tra ống môi trường thạch máu, thạch thường nước thịt 14 ngày thạch nấm nói khơng phát nấm khuẩn lạc mọc môi trường kiểm tra Như vậy, lô vắc xin đạt vơ trùng theo tiêu chuẩn TCVN 8684:2011 Hình 4.3 Một số hình ảnh kiểm tra khiết sản phẩm 4.2.2.3 Kiểm tra tiêu vật lý Về tiêu vật lý: Sau chế tạo vắc xin, chia vắc xin vào 10 chai thủy tinh 20ml vặn chặt nắp, chai bảo quản - 60C chai bảo quản nhiệt độ phòng (từ 20 - 250C) Vắc xin phải trắng đồng từ xuống đáy có lớp dầu (< 10% thể tích) bề mặt tầng đáy có màu trắng lắc lại trở nên đồng 44 download by : skknchat@gmail.com Bảng 4.14 Kiểm tra tính ổn định vắc xin Lô vắc xin (n) EDS-0118 EDS-0218 EDS-0119 Thời gian theo dõi Điều kiện - 60C Điều kiện phòng (từ 20 250C) Đồng TLD8 đủ bảo hộ theo tiêu chuẩn TCVN 8685-4:2011 Và sau 21 ngày kháng thể trì ổn đinh ngưỡng gần 9log2 từ thời điểm 28 ngày 84 ngày sau tiêm vắc xin Với ngưỡng kháng thể đảm bảo bảo hộ cho gà theo tiêu chuẩn TCVN 8685-4:2011 Kết biến động hiệu giá kháng thể kháng vi rút EDS thể biểu đồ hình 10 HI Log2 EDS-0118 EDS-0218 EDS-0119 ĐC 14 21 28 56 84 Ngày lấy máu kiểm tra vắc xin Hình 4.5 Biểu đồ thể hiệu giá HI (log2) theo dõi 84 ngày Biểu đồ Hình 4.5 cho thấy mức độ biến động hiệu giá kháng thể EDS gà tiêm số lô vắc xin nhũ dầu, thời điểm kiểm tra, lượng kháng thể gà tiêm lô vắc xin sai khác (P > 0,05) 48 download by : skknchat@gmail.com Trong cho thấy đường biểu diễn hiệu giá kháng thể EDS gà tiêm vắc xin nhũ dầu có gia tăng khác biệt so với hiệu giá kháng thể EDS gà lô đối chứng không tiêm vắc xin (P

Ngày đăng: 05/04/2022, 20:57

Hình ảnh liên quan

2.1.2.2. Hình thái - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

2.1.2.2..

Hình thái Xem tại trang 18 của tài liệu.
Hình 2.2. Trứng biến đổi - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 2.2..

Trứng biến đổi Xem tại trang 22 của tài liệu.
Cách tiến hành: Sẽ tiến hành phản ứng trên đĩa 96 giếng đáy hình chữ U. Bước 1: Chuẩn 4HA  - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

ch.

tiến hành: Sẽ tiến hành phản ứng trên đĩa 96 giếng đáy hình chữ U. Bước 1: Chuẩn 4HA Xem tại trang 36 của tài liệu.
Bảng 3.1. Công thức Reed &amp; Muench tính EID50 - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 3.1..

Công thức Reed &amp; Muench tính EID50 Xem tại trang 38 của tài liệu.
Hình 3.1. Tóm tắt quy trình sản xuất vắcxin EDS’76 nhũ dầu chế trên phôi vịt  - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 3.1..

Tóm tắt quy trình sản xuất vắcxin EDS’76 nhũ dầu chế trên phôi vịt Xem tại trang 40 của tài liệu.
Sử dụng 35 gà chia làm 3 lô như bảng 3.2 để kiểm tra an toàn và hiệu lực - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

d.

ụng 35 gà chia làm 3 lô như bảng 3.2 để kiểm tra an toàn và hiệu lực Xem tại trang 42 của tài liệu.
Bảng 4.1. Xác định liều gây nhiễm và thời gian thu hoạch - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.1..

Xác định liều gây nhiễm và thời gian thu hoạch Xem tại trang 45 của tài liệu.
Hình 4.1. Liều gây nhiễm, thời gian thu hoạch - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 4.1..

Liều gây nhiễm, thời gian thu hoạch Xem tại trang 46 của tài liệu.
Bảng 4.2. Kết quả nghiên cứu bất hoạt kháng nguyên EDS với formol ở ba nồng độ 0,05%, 0,1%, 0,2%  - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.2..

Kết quả nghiên cứu bất hoạt kháng nguyên EDS với formol ở ba nồng độ 0,05%, 0,1%, 0,2% Xem tại trang 47 của tài liệu.
Bảng 4.3. Xác định liều vi rút sử dụng trong vắcxin - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.3..

Xác định liều vi rút sử dụng trong vắcxin Xem tại trang 48 của tài liệu.
Hình 4.2. Biểu đồ xác định liều vi rút trong vắcxin 4.1.4. Nghiên cứu q trình nhũ hóa, bổ sung chất bổ trợ vắc xin  - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 4.2..

Biểu đồ xác định liều vi rút trong vắcxin 4.1.4. Nghiên cứu q trình nhũ hóa, bổ sung chất bổ trợ vắc xin Xem tại trang 49 của tài liệu.
Bảng 4.4. Kết quả lý hóa sau nhũ hóa vắcxin bằng dầu khoáng ISA71 VG - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.4..

Kết quả lý hóa sau nhũ hóa vắcxin bằng dầu khoáng ISA71 VG Xem tại trang 50 của tài liệu.
Bảng 4.5. Kết quả hiệu giá thu được 3 lô kháng nguyên liên tiếp - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.5..

Kết quả hiệu giá thu được 3 lô kháng nguyên liên tiếp Xem tại trang 51 của tài liệu.
Bảng 4.7. Kết quả xác định EID50 của vi rút EDS - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.7..

Kết quả xác định EID50 của vi rút EDS Xem tại trang 52 của tài liệu.
Bảng 4.9. Kết quả kiểm tra vi rút sau vô hoạt trên phôi vịt ở nồng độ 0,1% - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.9..

Kết quả kiểm tra vi rút sau vô hoạt trên phôi vịt ở nồng độ 0,1% Xem tại trang 54 của tài liệu.
Bảng 4.13. Kết quả vô trùng của 3 lô vắcxin - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.13..

Kết quả vô trùng của 3 lô vắcxin Xem tại trang 56 của tài liệu.
4.2.2.3. Kiểm tra chỉ tiêu vật lý - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

4.2.2.3..

Kiểm tra chỉ tiêu vật lý Xem tại trang 57 của tài liệu.
Hình 4.3. Một số hình ảnh kiểm tra thuần khiết sản phẩm - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 4.3..

Một số hình ảnh kiểm tra thuần khiết sản phẩm Xem tại trang 57 của tài liệu.
Bảng 4.14. Kiểm tra tính ổn định của vắcxin - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.14..

Kiểm tra tính ổn định của vắcxin Xem tại trang 58 của tài liệu.
Bảng 4.15. Kết quả kiểm tra an toàn của các lô vắcxin nhũ dầu trên gà - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.15..

Kết quả kiểm tra an toàn của các lô vắcxin nhũ dầu trên gà Xem tại trang 59 của tài liệu.
Bảng 4.16. Biến động hiệu giá kháng thể kháng vi rút ED Sở gà 4-6 tuổi chưa được miễn dịch cơ sở EDS  - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng 4.16..

Biến động hiệu giá kháng thể kháng vi rút ED Sở gà 4-6 tuổi chưa được miễn dịch cơ sở EDS Xem tại trang 60 của tài liệu.
Hình 4.4. Hình ảnh lấy máu kiểm tra kháng thể kháng vi rút EDS - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 4.4..

Hình ảnh lấy máu kiểm tra kháng thể kháng vi rút EDS Xem tại trang 60 của tài liệu.
Bảng số 4.16 cho thấy, hàm lượng kháng thể kháng vi rút EDS trong máu gà được tiêm các lô vắc xin vô hoạt nhũ dầu  EDS  tại thời điểm 7 ngày sau khi sử  dụng vắc xin, lượng kháng thể trung bình lần lượt là 4,2 log 2 chưa đủ bảo hộ theo  tiêu chuẩn TCVN 86 - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Bảng s.

ố 4.16 cho thấy, hàm lượng kháng thể kháng vi rút EDS trong máu gà được tiêm các lô vắc xin vô hoạt nhũ dầu EDS tại thời điểm 7 ngày sau khi sử dụng vắc xin, lượng kháng thể trung bình lần lượt là 4,2 log 2 chưa đủ bảo hộ theo tiêu chuẩn TCVN 86 Xem tại trang 61 của tài liệu.
Hình 4.6. Hình ảnh về HI - (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sản xuất vacxin nhũ đầu phòng hội chứng giảm đẻ ở gà (egg drop syndrome eds76) tại công ty fivevet

Hình 4.6..

Hình ảnh về HI Xem tại trang 62 của tài liệu.

Mục lục

  • TRÍCH YẾU LUẬN VĂN

  • PHẦN 1. MỞ ĐẦU

    • 1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI

    • 1.2. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI

    • 2.1.2.3. Khả năng gây ngưng kết hồng cầu

    • 2.1.2.4. Đặc tính nuôi cấy

    • 2.1.2.5. Sức đề kháng và quá trình nhân lên của vi rút

    • 2.1.3. Hội chứng giảm đẻ EDS 76

      • 2.1.3.1. Cơ chế sinh bệnh

      • 2.1.3.2. Loài vật mắc bệnh

      • 2.1.3.3. Phương thức truyền lây

      • 2.2.3. Những đặc tính cơ bản của vắc xin

      • 2.2.4. Sản xuất vắc xin bằng phƣơng pháp vô hoạt vi rút

      • 2.3. HIỂU BIẾT CHUNG VỀ MIỄN DỊCH

      • PHẦN 3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

        • 3.1. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

          • 3.1.1. Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vắc xin phòng hội chứng giảm đẻ gà (EDS)

          • 3.1.2. Đánh giá và kiểm tra chất lượng vắc xin phòng hội chứng giảm đẻ gà (EDS)

          • 3.2. ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN LIỆU VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU

            • 3.2.1. Đối tượng nghiên cứu

            • 3.2.2. Địa điểm nghiên cứu

            • 3.2.4. Các loại dung dịch, môi trƣờng

            • 3.2.5. Trang thiết bị máy móc, dụng cụ trong phòng thí nghiệm

            • 3.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

              • 3.3.1. Tiêm vào xoang niệu mô

              • 3.3.2. Phương pháp nhân vi rút trên trứng vịt có phôi 10-11 ngày tuổi

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan