BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC PHẨM BÀI 2 : ĐỊNH LƯỢNG BERBERIN TRONG VIÊN NÉN BERBERIN, BÀI 3 : ĐỊNH LƯỢNG HỖN HỢP HAI CHẤT BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO QUANG (TT), BÀI 4: ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL 500 mg BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO, BÀI 8: VIÊN NÉN PROPRANOLOL
BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC PHẨM BÀI : ĐỊNH LƯỢNG BERBERIN TRONG VIÊN NÉN BERBERIN Nguyên tắc Dung dịch berberin nước có độ hấp phụ cực đại bước sóng 263 nm 345 nm, áp dụng phương pháp đo quang để định lượng berberin, viên nén có thành phần phức tạp ngồi berberin cịn có thành phần tá dược dùng phương pháp thêm để khắc phục số ảnh hưởng Cách tiến hành 2.1 Berberin ( hàm lượng 87,1 %) Pha 100g dung dịch Berberin 0,1%: mBerberin =0,1(g) mH2O = 99,9g VH2O = 99,9 ml 2.2 Định lượng berberin viên nén Mẫu: Cân xác 20 viên nén berberin cần định lượng Tính khối lượng trung bình viên nghiền cối sứ thành bột mịn Cân 0,2g berberlin Thêm nước sôi, lắng, gạn (3 lần) Định mức lên 100ml Đo mật độ quang Lọc Lấy 10ml Định mức lên 100ml Đem đo mật độ quang bước sóng 263 nm ( 345 nm) với dung dịch so sánh nước cất A Mẫu thêm chuẩn: Cân 0,2g berberlin Thêm 2ml dung dịch chuẩn berberin Thêm nước sôi, lắng, gạn (3 lần) Đo mật độ quang Định mức lên 100ml Định mức lên 100ml Lọc Lấy 10ml Đem đo mật độ quang bước sóng 263 nm ( 345 nm) với dung dịch so sánh nước cất A’ Từ A A’ lượng berberin biết thêm vào Tính hàm lượng berberin viên Tính tốn kết Đo A dung dịch có nồng độ C cần xác định, sau đo A dung dịch có nồng độ C có thêm lượng chất chuẩn ứng với nồng độ C0 thêm vào Khi đó, ta có: A = Ɛ.l.C A’ = Ɛ.l.(C + C0) Ở Ɛ chất, bước sóng đo, l đo loại cuvet Do A C = A′ C + C0 Khảo sát cực đại hấp phụ Berberin: Đo mật độ quang bước sóng cực đại 345,2nm ta thu kết quả: A=0,6496 A’=0,8686 C0= 𝑚 𝑉 =0,002 ∗ A A′ = C C+C0 =2x10-6(g/ml) 1000 => 0,6496 0,8686 = 𝐶 𝐶+2×10−6 => 𝐶 = 5,93 × 10−6 (g/ml) C 10ml: C10ml =5,93x10-6x10= 5,93x10-5 (g/ml) C10ml =C100ml ban đầu = 5,93x10-5 (g/ml) Khối lượng Berberin có 100ml (1 viên nén ) m = C100ml ban đầu * V= 5,93x10-5 x 100 = 5,93 x 10-3 (g) 5,93x 10−3 x 100 % Berberin= 0,2 = 2,965% BÀI : ĐỊNH LƯỢNG HỖN HỢP HAI CHẤT BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO QUANG (TT) Khảo sát phổ hấp thụ dung dịch cloramphenicol naphazolin nitrat Hình 1: Phổ hấp thụ cực đại cloramphenicol Cloramphenicol có λmax1 = 278nm Hình 2: Phổ hấp thụ cực đại naphazolin nitrat Naphazolin nitrat có λmax2 = 258nm Đo độ hấp thụ clophenicol naphazolin nitrat Tại λmax1 = 278 nm& λmax2 = 258nm Cloramphenicol - Có A278 cloramphenicol = 1,2170 ε278 cloramphenicol = - A278 cloramphenicol l.Ccloramphenicol = 1,2170 1.1,2379.10−4 = 9831 (cm-1.l.mol-1) Có A258 cloramphenicol = 0,7544 ε258 cloramphenicol = A258 cloramphenicol l.Ccloramphenicol = 0,7544 1.1,2379.10−4 = 6094 (cm-1.l.mol-1) Naphazolin nitrat - Có A278 Naphazolin nitrat =1,1127 - ε278 Naphazolin nitrat = A278 Naphazolin nitrat l.CNaphazolin nitrat = 1,1127 1.9,1478.10−5 = 12164 (cm-1.l.mol-1) Có A258 Naphazolin nitrat = 2,0480 ε258 Naphazolin nitrat = A258 Naphazolin nitrat l.CNaphazolin nitrat = 2,0480 1.9,1478.10−5 = 22388 (cm-1.l.mol-1) Xác định nồng độ clophenicol naphazolin nitrat hỗn hợp Đo hỗn hợp bước sóng λmax1 = 278nm & λmax2 = 258nm 278 278 A278 hh = Acloramphenicol + ANaphazolin nitrat 278 278 A278 hh = εcloramphenicol l Ccloramphenicol + εNaphazolin nitrat l CNaphazolin nitrat 1,1850 = 9831Ccloramphenicol + 12164Cnaphazolin nitrat (1) 258 258 A258 hh = Acloramphenicol + ANaphazolin nitrat 258 258 A258 hh = εcloramphenicol l Ccloramphenicol + εNaphazolin nitrat l CNaphazolin nitrat 1,4102= 6094Ccloramphenicol + 22388Cnaphazolin nitrat (2) Từ (1) (2), ta có: Ccloramphenicol = 6,423.10−5 M { CNaphazolin nitrat = 4,550.10−5 M BÀI 4: ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL 500 mg BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO QUANG Khảo sát phổ hấp thụ paracetamol Hình 1: Phổ hấp thụ cực đại paracetamol Paracetamol có λmax1 = 2nm Đo độ hấp thụ xác định hàm lượng paracetamol A = 0,4429 A = 𝜀𝑙𝐶 C= 𝐴 𝜀𝑙 = 0,4429 715.1 = 6,194.10−4 % Nồng độ paracetamol dung dịch ban đầu bằng: 6,194.10-4.10.10.10 = 0,6194(g/l) 𝐶𝑔/𝑙 = 𝑚 𝑉 m= C.V = 0,6194.0,1= 0,06194 (g) % paracetamol = 𝑚.100 0,075 = 0,06194.100 0,075 = 82,59 % BÀI VIÊN NÉN ACID ASCORBIC Định tính C6H 8O6 + 2AgNO3 → Ag2O↓ + C6H 8O7 + 2NO A Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,10 g acid ascorbic, thêm 10 ml nước, lắc kỹ, Lọc Dịch lọc có phản ứng acid với giấy quỳ Lấy ml dịch lọc thêm 0,5ml dung dịch bạc nitrat %, xuất tủa xám đen Hình 1: phản ứng acid với giấy quỳ pH Hình 2: kết tủa Ag2O B Phương pháp sắc ký lớp mỏng Bản mỏng: Silica gel GF 254 Dung môi khai triển: Ethanol 96 % - nước (120 : 20) Dung dịch thử: Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,05 g acid ascorbic, thêm 10 ml nước, lắc kỹ lọc Dung dịch đối chiếu: Dung dịch acid ascorbic chuẩn 0,5% nước Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 15 cm Lấy mỏng để khơ ngồi khơng khí nhiệt độ phịng Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Sắc ký đồ thu dung dịch thử phải có vết tương ứng vị trí màu sắc với vết sắc ký đồ thu dung dịch đối chiếu Hình 3: trước màu Hình 4: sau màu Định lượng C6H 8O6 + I2 → C6H6O6 + 2I- + 2H+ Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình nghiền thành bột mịn Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,1 g acid ascorbic, thêm 30 ml hỗn hợp nước đun sôi để nguội dung dịch acid acetic 1M (10 : 1), lắc kỹ Thêm ml dung dịch hồ tinh bột, định lượng dung dịch iod 0,1 N(CĐ) xuất màu xanh lam bền vững ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 8,806 mg C6H 8O6 VIot (ml) V1 V2 V3 Vtb 9,6 10,5 11,1 10,4 Cách 1: niot = CM.Viot= (0,1/2).(10,4/1000)= 5,2.10-4 mol = n acid ascorbic m acid ascorbic =n.M =5,2.10-4 176= 0,09152g % acid ascorbic = (0,09152.100)/0,1= 91,52% Cách 2: 1ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 8,806 mg C6H 8O6 10,4 ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 91,5824 mg C6H 8O6 % acid ascorbic = (91,5824.100)/(0,1.103) = 91,5824% BÀI 6: KIỂM NGHIỆM THUỐC BỘT SỦI BỌT HAPACOL 150 FLU Hình thức: Thuốc bột màu vàng, khô, rời, mùi thơm Độ đồng khối lượng m1: khối lượng gói thuốc m2: khối lượng vỏ gói thuốc mthuốc = m1 - m2: khối lượng thuốc mtb = (mthuốc + mthuốc +….+ mthuốc 20)/20: khối lượng trung bình %chênh lệch= (ǀ(mthuốc- mtb)ǀ*100)/mthuốc Bảng 1: giá trị khối lượng 20 gói thuốc hapacol STT m1 (g) m2 (g) mthuốc (g) 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 2,4453 2,4377 2,4203 2,4424 2,4729 2,4316 2,4575 2,4592 2,4211 2,4427 2,4595 2,453 2,4296 2,4631 2,4516 2,4181 2,4395 2,4166 2,4321 2,4453 0,9348 0,905 0,9808 0,9634 0,9876 0,968 0,936 0,9404 0,9777 0,9275 0,9977 0,9235 0,9668 0,9172 0,9741 0,9305 0,9242 0,9614 0,9085 0,962 1,5105 1,5327 1,4395 1,479 1,4853 1,4636 1,5215 1,5188 1,4434 1,5152 1,4618 1,5295 1,4628 1,5459 1,4775 1,4876 1,5153 1,4552 1,5236 1,4833 mtb (g) % chênh lệch 1,4926 1,19 2,62 3,69 0,92 0,49 1,98 1,90 1,73 3,41 1,49 2,11 2,41 2,04 3,45 1,02 0,34 1,50 2,57 2,03 0,63 Nhận xét: khơng có đơn vị khối lượng nằm giới hạn chệnh lệch quy định ± 7% so với khối lượng trung bình khơng có đơn vị khối lượng gấp đơi giới hạn ± 14% Độ tan Hình 1: hòa tan hapacol Hòa tan hapacol nước thấy xuất bọt khí, thuốc tan hết nước tan hết phút Độ giảm khối lượng mcốc = 48,1234g Cho 1,5g thuốc vào cốc, đem sấy nhiệt độ 80oC Cân lại thuốc sau sấy khối lượng m2 = 49,621g mthuốc sau sấy = m2 – mcốc = 49,621 – 48,1234 = 1,4976g %độ giảm khối lượng = 1,5 − mthuốc sau sấy 1,5 − 1,4976 × 100 = × 100 = 0,16% 1,5 1,5 Định tính Cân 0,75g + 10ml aceton lọc lấy dịch (cho aceton bay hết) + 2ml HCl 10% đem đun sôi đèn cồn phút + 10ml H2O + giọt kali dicromat 5% màu tím (khơng chuyển đỏ) 10 Hình 2: trước thêm kali dicromat Hình 3: sau thêm kali dicromat Sau thí nghiệm nhận thấy có hàm lượng hapacol thuốc BÀI 8: VIÊN NÉN PROPRANOLOL Định tính Tiến hành chạy sắc ký mỏng với hệ dung môi dicloroethan : methanol (56:24) Hình 1: sắc ký đồ propranolol a 5,8 b 5,85 Rf = = = 0,99 Với a khoảng cách di chuyển chất phân tích, a= 5,8cm 11 b khoảng cách di chuyển dung môi, b= 5,85 cm Định lượng Lấy viên propranolol khoảng 0,04g vào bình định mức 100ml, thêm 2ml nước, lắc 10 phút, pha loãng với methanol vừa đủ đến vạch, lắc Lọc bỏ dung dịch đầu Lấy 5ml dịch lọc thành 50ml với metanol Đo độ hấp thu dung dịch bước sóng khoảng 290nm, mẫu trắng metanol Hình 2: phổ hấp thụ cực đại propranolol Sau khảo sát bước sóng cực đại propranolol hình lựa chọn bước sóng thích hợp 291,4nm A = 0,2588 A = 𝜀𝑙𝐶 C= 𝐶𝑀 = 10.𝐷.𝐶% 𝑀 𝐴 𝜀𝑙 = = 0,2588 207.1 =0,00125 mol/l 10.1.0,00125 296 = 4,22 10−5 𝑚𝑜𝑙/𝑙 Nồng độ 5ml: CM = CM.50/5 = 4,22.10-4 mol/l Số mol propranolol: n = CM.V= 4,22.10-4.5.10-3= 2,11.10-6 mol Khối lượng propranolol 5ml: mpropranolol= n.M= 2,11.10-6 296=6,25.10-4g Khối lượng propranolol 100ml: m.100/5= 6,25.10-4.100/5= 0,0125g= 12,5mg Độ tan %propranolol = 12,5 × 100 = 31,25% 40 12 ... thêm 10 ml nước, lắc kỹ lọc Dung dịch đối chiếu: Dung dịch acid ascorbic chuẩn 0,5% nước Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 15 cm Lấy mỏng để... màu Định lượng C6H 8O6 + I2 → C6H6O6 + 2I- + 2H+ Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình nghiền thành bột mịn Cân lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,1 g acid ascorbic, thêm 30 ml hỗn hợp nước... Sau thí nghiệm nhận thấy có hàm lượng hapacol thuốc BÀI 8: VIÊN NÉN PROPRANOLOL Định tính Tiến hành chạy sắc ký mỏng với hệ dung mơi dicloroethan : methanol (56:24) Hình 1: sắc ký đồ propranolol