Nghiên cứu thành phần hóa học và khảo sát một số hoạt tính sinh học của loài lycopodiella cernua (l ) pic serm và kadsura coccinea (lem ) a c sm ở việt nam TT

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI LÊ THỊ THÙY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ KHẢO SÁT MỘT SỐ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI LYCOPODIELLA CERNUA (L.) PIC SERM VÀ KADSURA COCCINEA (LEM.) A C SM.) Ở VIỆT NAM Ngành: Hóa học Mã số: 9440112 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HĨA HỌC Hà Nội - 2022 Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Thu Hương TS Nguyễn Hải Đăng Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Trường họp Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Vào hồi …… giờ, ngày … tháng … năm ……… Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Thư viện Tạ Quang Bửu - Trường ĐHBK Hà Nội Thư viện Quốc gia Việt Nam DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Le Huyen Tram, Tran Thu Huong, Le Thi Thuy, Nguyen Van Thong, Nguyen Tuan Anh, Nguyen Hoang Minh, Tran Thu Ha, Dao Anh Dung, Nguyen Phuong Thao, Phuong Thien Thuong, Duc Dat Le, Nguyen Dinh Hiep and Hee Jae Shin (2021) A new triterpenoid from the stems of Kadsura coccinea with antiproliferative activity Natural Product Research, https://doi.org/10.1080/14786419.2021.1914612 Huyen Tram Le, Thu Huong Tran, Thi Thuy Le, Van Thong Nguyen, Tuan Anh Nguyen, Hoang Minh Nguyen, Thi Minh Tran, Thi Hong Phuong Nguyen, Thu Ha Tran, Hai Dang Nguyen, Duc Dat Le, Phuoc Dien Pham, Mina Lee (2021) A new phenylethyl glycoside and a new dibenzocyclooctadiene lignan from the leaves of Kadsura coccinea (Lem.) A C Smith Phytochemistry Letters, https://doi.org/10.1016/j.phytol.2021.09.013 Vu Huong Giang, Le Thi Thuy, Pham Thi Cham, Le Ba Vinh, Ninh Khac Ban, Tran My Linh, Nguyen Chi Mai, Pham Thi Hoe, Tran Thu Huong, Nguyen Hai Dang, Hyuncheol Oh, Tran Hong Quang (2021) Chemical constituents from Lycopodiella cernua and their antiimflammatory and cytotoxic activities Natural Product Research https://doi.org/10.1080/14786419.2021.1958807 Vu Huong Giang, Le Thi Thuy, Pham Thi Cham, Le Ba Vinh, Ninh Khac Ban, Tran My Linh, Nguyen Chi Mai, Pham Thi Hoe, Tran Thu Huong, Nguyen Hai Dang, Tran Hong Quang (2021) Alkaloids and flavonoids from Lycopodiella cernua, Journal of Medicinal Materials 26 (3), 149-154 GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Từ xa xưa, người biết sử dụng thảo mộc làm thuốc trị bệnh Ngày nay, nhờ phát triển hóa học, đặc biệt lĩnh vực nghiên cứu hợp chất thiên nhiên kết hợp với ngành sinh học, dược học y học, nhà khoa học xác định nguồn gốc dược tính phương thuốc cổ truyền Trong Từ điển thuốc Việt Nam, lồi Thơng đất (Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm.) sử dụng để chữa viêm gan cấp tính, mắt đỏ sưng đau, phong thấp, đau nhức xương, loài Na rừng (Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm.) dùng để làm thuốc bổ, kích thích tiêu hóa giảm đau Tuy nhiên, đề tài nghiên cứu loài thực vật với đối tượng Việt Nam cịn hạn chế Do đó, lựa chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học khảo sát số hoạt tính sinh học loài Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm Việt Nam” Mục tiêu luận án: Nghiên cứu thành phần hóa học loài Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ức chế sản sinh NO chất phân lập nhằm tìm kiếm hoạt tính từ lồi thực vật Nội dung luận án bao gồm: Nghiên cứu phân lập hợp chất từ toàn loài Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm., từ thân Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm Việt Nam Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập Đánh giá hoạt tính ức chế sản sinh NO số hợp chất phân lập Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính ức chế sinh trưởng tế bào ung thư số hợp chất phân lập Những đóng góp luận án: Đây nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hai loài thực vật Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm Việt Nam Nghiên cứu thu kết sau: - Từ lồi Thơng đất: Thu 20 hợp chất bao gồm 05 lignan, 09 triterpenoid, 03 flavonoid 03 alkaloid Các hợp chất là: Lycocernuside E (LC1-mới), lycocernuaside A (LC2), bombasin 4O-β-D-glucopyranoside (LC3), dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside (LC4), cedrusin (LC5), lycernuic B (LC6mới), lycernuic ketone F (LC7-mới), lycernuic ketone C (LC8), lycernuic ketone B (LC9), lycoclavanol (LC10), 3-epi-lycoclavanol (LC11) methyl lycernuate B (LC12), lycernuic acid B (LC13), 3β,21β,24-trihydroxyserrat-14-en-16-one (LC14), apigenin-4′-O-(2′′O-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC15), apigenin-4′-O-(6′′O-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC16), apigenin-4′-O(2′′,6′′-di-O-trans-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC17), cernuine (LC18), lycocernuine (LC19), cermizine C N-Oxide (LC20) - Từ loài Na rừng: Thu 15 hợp chất bao gồm 07 triterpenoid, 02 lignan, 06 phenolic glycoside Các hợp chất là: Kadnanolactone H (KC1), micrandiactone H (KC2), kadcoccilactone V (KC3- mới), kadnanolactone I (KC4), kadsuracin A (KC5-mới), interiotherin C (KC6), (S)-1-phenylethyl-6-α-Larabinopyranosyl-β-D-glucopyranoside (KC7-mới), 3,4dihydroxyphenylethanol-5-O-β-D-glucose (KC8), cimidahurinine (KC9), thalictoside (KC10), icariside E3 (KC11), phloridzin (KC12), seco-coccinic acid A (KC13), seco-coccinic acid F (KC14), schisanlactone B (KC15) Trong đó, hợp chất thalictoside lần phân lập từ loài thực vật Về hoạt tính sinh học: Trong hợp chất phân lập có hợp chất thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư, ức chế sinh trưởng tế bào ung thư ức chế sản sinh NO Bố cục luận án: Luận án gồm 125 trang với 47 bảng biểu, 91 hình vẽ, 88 tài liệu tham khảo cập nhật đến năm 2021 Bố cục luận án gồm: mở đầu (02 trang), chương - tổng quan (22 trang), chương - đối tượng phương pháp nghiên cứu (06 trang), chương - thực nghiệm (09 trang), chương - kết thảo luận (75 trang), kết luận kiến nghị (02 trang), danh mục cơng trình cơng bố luận án (01 trang), tài liệu tham khảo (08 trang) NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN MỞ ĐẦU Trình bày ý nghĩa thực tiễn, mục tiêu nội dung nghiên cứu luận án CHƯƠNG TỔNG QUAN Trình bày kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi thực vật Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm Kasura coccinea (Lem.) A C Sm CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Tồn Thơng đất (Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm.) thu hái Sapa, Lào Cai, Việt Nam vào tháng năm 2017 Mẫu thực vật định danh TS Nguyễn Thế Cường, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam (VAST) Lá Na rừng (Kasura coccinea (Lem.) A C Sm.) thu hái vào tháng năm 2017, thân thu hái vào tháng năm 2018 Tam Đảo, Vĩnh Phúc Mẫu thực vật định danh PGS.TS Trần Huy Thái, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam (VAST) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp phân lập chất Sử dụng phương pháp sắc ký bao gồm: sắc ký cột (CC), sắc ký lớp mỏng (TLC) 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học chất Cấu trúc hợp chất phân lập xác định dựa vào thông số vật lý đo góc quay cực riêng kết hợp với phương pháp phổ đại phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1D, 2D phổ CD 2.2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học Hoạt tính gây độc tế bào ung thư thực theo phương pháp MTT, hoạt tính ức chế sản sinh NO thực theo phương pháp Griess đại thực bào chuột (RAW264.7 BV-2) kích thích LPS CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 3.1 Phân lập hợp chất từ lồi Thơng đất (Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm.) 3.1.1 Quy trình phân lập chất Quy trình ngâm chiết phân lập chất từ dịch chiết nước cặn E tồn thân Thơng đất tiến hành theo hình 3.1, 3.2 3.3 Hình 3.1 Sơ đồ ngâm chiết thân Thơng đất Hình 3.2 Sơ đồ phân lập dịch nước Thơng đất Hình 3.3 Sơ đồ phân lập cặn EtOAc Thông đất 3.1.2 Thông số vật lý liệu phổ hợp chất phân lập từ lồi Thơng đất Phần trình bày thơng số vật lý liệu phổ 20 hợp chất (LC1-LC20) phân lập được, có hợp chất LC1, LC6 LC7 3.3 Phân lập chất từ lồi Na rừng 3.3.1 Quy trình phân lập chất Các chất phân lập từ thân Na rừng theo hình 3.5: Hình 3.5 Sơ đồ phân lập chất từ thân Na rừng Các chất phân lập từ Na rừng theo hình 3.6: Hình 4.1.1.c Phổ 1H-NMR giãn rộng hợp chất LC1 Các liệu phổ NMR gợi ý LC1 neolignan glycoside Tương quan HMBC H-1′′ (δH 4,88) C-4 (δC 147,5) xác nhận đơn vị glucose liên kết C-4 Vị trí hai nhóm methoxy C-3 C-3′ xác định pic giao HMBC từ 3-OCH3 (δH 3,85) đến C-3 (δC 150,6), từ 3′OCH3 (δH 3,92) đến C-3′ (δC 151,1) Cấu hình tương đối gốc aglycone LC1 đề xuất erythro dựa số ghép nối bé H-7 H-8 (3J7,8 = 4,5 Hz), so sánh liệu 1H 13C-NMR với liệu neolignan lycocernuaside D báo cáo trước đây, điểm khác biệt xuất nhóm glucoside vị trí C-4 LC1 Do đó, cấu trúc LC1 xác định hình 4.1.1.g, hợp chất đặt tên lycocernuaside E 10 Hình 4.1.1.d Phổ 13C-NMR hợp chất LC1 Hình 4.1.1.e Phổ HSQC hợp chất LC1 11 Hình 4.1.1.f Phổ HMBC hợp chất LC1 Hình 4.1.1.g Các tương tác HMBC LC1 Bảng 4.1.1 Phổ NMR hợp chất LC1 hợp chất tham khảo # Vị trí δC δCa,b DEPT δHa,c độ bội, (J= HMBC Hz) 133,3 137,3 C 111,5 112,5 CH 7,14 d (1,5) 1, 4, 6, 147,5 150,6 C 146,1 147,5 C 115,2 117,6 CH 7,13 d (8,5) 119,5 120,6 CH 6,99 dd (2,0; 8,5) 2, 71,6 73,5 CH 4,97 d (4,5) 1, 2, 6, 8, 12 84,1 60,7 85,4 62,0 CH CH2 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 6′ 7′ 8′ 3-OCH3 3′-OCH3 1′′ 2′′ 3′′ 4′′ 5′′ 6′′ 153,5 111,4 149,5 130,1 113,8 123,3 196,7 26,8 55,9 56,1 131,9 112,4 151,1 154,5 115,6 124,6 199,5 26,3 56,7 56,6 102,9 74,9 78,2 71,4 77,8 62,5 C CH CH C CH CH C CH3 CH3 CH3 CH CH CH CH CH CH2 4,61 d (5,5) 3,60 dd (6,0; 12,0)/3,87 m 7,56 d (2,0) 7,10 d (8,5) 7,60 dd (2,0; 8,5) 2,57 s 3,85 s 3,92 s 4,88 m 3,48 m 3,41 m 3,41 m 3,48 m 3,70 dd (5,0; 12,0)/3,87 m 1, 7, 9, 4′ 4′, 6′, 7′ 3′, 4′ 2′, 4′, 7′ 1′, 7′ 3′ δC lycocernuaside D DMSO-d6 [J.Li et al, Fitoterapia, 2017, 119, 45-50], amethanol-d4, b125 MHz, c500 MHz # 4.2 Các hợp chất phân lập từ loài Na rừng (K.coccinea) Từ thân loài Na rừng phân lập 15 hợp chất có hợp chất kadcoccilactone V (KC3), kadsuracin A (KC5), (S)-1-phenylethyl-6-α-L-arabinopyranosylβ-D-glucopyranoside (KC7) Các hợp chất có cấu trúc sau: 13 4.2.5 Hợp chất KC5: Kadsuracin A (hợp chất mới) Hình 4.2.5.a: Cấu trúc hóa học KC5 hợp chất kadsurarin Hợp chất KC5 thu dạng chất rắn màu trắng Phổ HRESI-MS cho thấy pic ion giả phân tử m/z 572,2488 [M + NH4]+ (tính cho C30H34O10NH4, 572,2496) ứng với cơng thức phân tử C30H34O10 14 Hình 4.2.5.b Phổ HR-ESI-MS hợp chất KC5 Phổ H-NMR KC5 cho thấy proton olefinic δH 5,98 (m, H-3′′), tín hiệu doublet nhóm methyl δH 1,87 (d, J = 7,3 Hz, H-4′′) tín hiệu singlet nhóm methyl δH 1,42 (H5′′), hai tín hiệu singlet proton vòng thơm δH 6,50 (H-11) 6,74 (H-4), hai proton methylenedioxy vùng trường thấp δH 5,92 (br s; H-19a) 5,93 (br s, H-19b), hai proton olefinic sp2 δH 4,86 (br s, H-17a) 5,30 (br s, H-17b), bốn tín hiệu singlet nhóm methoxy δH 3,57 (OCH3-14); 3,75 (OCH3-2); 3,85 (OCH31); 3,91 (OCH3-3), hai nhóm oxymethine δH 6,40 (s; H-6) 5,70 (m; H-9), tín hiệu nhóm methine δH 2,82 (m; H-8), nhóm methyl bậc δH 1,24 (d; J = 7,1 Hz), liên kết với nhóm angeloyl [δH 5,98 (H-3′′); 1,87 (d; J = 7,1 Hz; H-4′′); 1,42 (s, H5′′′)], tín hiệu singlet nhóm methyl δH 1.54 (H-2′) Phổ 13C NMR KC5 cho thấy tín hiệu carbon nhóm carbonyl δC 166,2 (C-1′′) 170,4 (C-1′), 12 nguyên tử carbon không liên kết với proton [bao gồm sáu carbon liên kết với oxy δC 136,2 (C-12); 141,1 (C-1); 141,7 (C-2); 148,7 (C-13); 151,5 (C-15) 152,7 (C-3); sáu tín hiệu cịn lại δC 120,7 (C-15); 121,7 (C-16); 127,4 (C-2′′); 133,1 (C-5); 133,9 (C-10); 146,5 (C-7)]; carbon nhóm methine δC 40,6 (C-8); 139,9 (C-3′′); 102,4 (C-11) 107,4 (C-4); 79,7 (C-9) 81,4 (C-6); nhóm methylene δC 101,2 (C-19) 115,1 (C-17); nhóm methoxy δC 56,1 (OCH3-3); 59,4 15 (OCH3-2); 60,4 (OCH3-1) 60,7 (OCH3-14); nhóm methyl δC 15,7 (C-4′′); 18,6 (C-18); 19,8 (C-5′′) 20,7 (C-2′) Hình 4.2.5.c Phổ 1H-NMR hợp chất KC5 đo CDCl3 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR KC5 cho thấy diện khung dibenzocyclooctadiene với gốc angeloyl gốc acetal Dữ liệu quang phổ tương tự kadsurarin, khác biệt vị trí C-7 C-17 Trong kadsurarin, vị trí C-7 carbon khơng liên kết với hydro liên kết với nhóm hydroxyl Trong KC5, vị trí khẳng định có chứa nối đơi Thật vậy, phổ HMBC KC5 cho thấy tương tác hai proton từ H-17a/H-17b (δH 4,86/5,30) đến C-6 (δC 81,4)/C-7 (δH 146,5)/C-8 (δH 40,6), proton từ H3-18 (δH 1,24) đến C-7 (δC 46,5)/C-8 (δC 40,6)/C-9 (δC 79,7), xác nhận vị trí liên kết đơi Δ7 16 Hình 4.2.5.d Phổ 13C-NMR hợp chất KC5 đo CDCl3 Hình 4.2.5.e Phổ HMQC hợp chất KC5 đo CDCl3 17 Hình 4.2.5.f Phổ HMBC hợp chất KC5 đo CDCl3 Hình 4.2.5.g Phổ NOESY hợp chất KC5 đo CDCl3 18 Hình 4.2.5.h Phổ CD tương tác HMBC, COSY KC5 Các tương tác phổ 1H-1H NOESY proton H-4 (δH 6,74) H-6 (δH 6,40), H-9 (δH 5,70) đến H-8 (δH 2,82)/H-11 (δH 6,50) mà khơng có tương tác H-9 (δH 5,70) đến H-18 (1,24), khẳng định cấu dạng ghế thuyền xoắn vòng cyclooctadiene Từ kết luận cấu hình H-6α, H-8β, H-9β Hơn nữa, phổ CD KC5 cho thấy hiệu ứng Cotton dương vùng 212–220 nm hiệu ứng Cotton âm vùng 244 nm khẳng định cấu hình S-biphenyl Như vậy, cấu trúc KC5 làm sáng tỏ, hợp chất đặt tên kadsuracin A Bảng 4.3.5 Phổ hợp chất KC5 hợp chất tham khảo #δ #δ độ bội, Vị trí δCa,b δHa,c độ bội, HMBC C H (J = Hz) (J = Hz) 140,9 141,1 141,0 141,7 151,9 152,7 110,2 107,4 6,60 s 6,74 s 5, 6, 16 132,7 133,1 83,5 81,4 6,43 s 6,40 s 8, 16, 1′′ 148,7 146,5 43,0 40,6 2,16 q (6,8) 2,82 m 73,9 79,7 5,68 br s 5,70 m 15, 1′′ 19 10 11 135,6 102,0 133,9 102,4 6,60 s 6,50 s 12 13 14 15 16 17 135,6 148,7 151,9 120,4 121,8 110,1 136,2 148,7 151,1 120,7 121,7 115,1 - 18 19 17,1 101,0 18,6 101,2 1,27 d (6,8) 5,90 s OMe-1 OMe-2 OMe-3 OMe14 1′ 2′ 1′′ 2′′ 3′′ 4′′ 5′′ 60,4 60,9 55,9 60,5 60,4 59,4 56,1 60,7 3,90 s 3,75 s 3,95 s 3,64 s 4,86 br s/5,30 br s 1,24 d (7,2) 5,92 br s/5,93 br s 3,85 s 3,75 s 3,91 s 3,57 s 168,9 20,5 165,7 127,0 139,9 15,7 19,8 170,4 20,7 166,2 127,4 139,9 15,8 19,8 1,60 s 6,0 s 1,85 d (7,5) 1,40 s 1,54 s 5,98 m 1,87 d (7,3) 1,42 s 9, 13, 15 6, 7, ,9 12, 13 14 1’ 1′′ 1′′, 2′′, 3′′ δC, δH kadsurarin đo chloroform-d1, [Chen Y.P et al, Tetrahedron letters, 1973, 14, 4257-4260] a chloroform-d1, b100 MHz, c400 MHz # # 4.3 Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất phân lập 4.3.1.1 Kết đánh giá hoạt tính ức chế sản sinh nitric oxide (NO) Các hợp chất đánh giá hoạt tính ức chế sản sinh NO tế bào BV2 RAW264.7 kích thích LPS - Thơng đất: Các hợp chất LC3, LC5 có khả ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 21,2 ± 1,1; 28,5 ± 1,4 µM 20 - Na rừng: Hợp chất KC5, KC6 có khả ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 10,2 ± 0,66 21,7 ± 1,22 µM 4.3.1.2 Kết đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư 20 hợp chất Thông đất (LC1-LC20) thử hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư người MCF7 (ung thư vú), HepG2 (ung thư gan) SK-Mel-2 (khối u ác tính) Kết cho thấy hợp chất LC7 cho hoạt tính ức chế trung bình dịng tế bào ung thư với giá trị IC50 44,85 ± 2,16; 47,97 ± 2,53 69,64 ± 2,97 µM Hợp chất LC16 cho hoạt tính ức chế yếu dòng tế bào này với giá trị IC50 54,55 ± 3,15; 84,77 ± 4,86 92,25 ± 4,58 µM 4.3.1.3 Kết đánh giá hoạt tính ức chế sinh trưởng tế bào ung thư hợp chất Na rừng (KC1-KC4, KC13-KC15) thử hoạt tính ức chế sinh trưởng tế bào dòng tế bào ung thư HCT-15 (ung thư đại tràng), NUG-3 (ung thư dày), NCI-H23 (ung thư phổi), ACHN (ung thư thận), PC-3 (ung thư tuyến tiền liệt), MDA-MB-231 (ung thư vú) Kết cho thấy hợp chất KC15 cho khả ức chế mạnh sinh trưởng dòng tế bào ung thư phổi (NCI-H23) với giá trị IC50 1,28 ± 0,01, ức chế tốt với sinh trưởng dòng tế bào ung thư lại với giá trị IC50 2,67 ± 0,02 (HCT-15); 1,80 ± 0,02 (NUGC-3); 2,63 ± 0,01 (ACHN); 2,33 ± 0,01 (PC-3) 2,38 ± 0,02 (MDA-MB-231) µM *Nhận xét: Các hợp chất LC3, LC5, KC5, KC6 có hoạt tính ức chế sản sinh NO Về mặt cấu trúc, hợp chất lignan – nhóm hợp chất ghi nhận có hoạt tính ức chế sản sinh NO mạnh nhóm chất hữu Trong chất có khung LC2, LC3, LC4, LC5, khác biệt LC3 so với hợp chất cịn lại có mặt nhóm COCH3 vị trí C-1′ Ngồi ra, hợp chất LC5 có gốc β-D-glucoside vị trí C-4, hợp chất khác khơng có Kết gợi ý cho có mặt nhóm -COCH3 gắn với C-1′ gốc β-D- 21 glucoside gắn với C-4 ảnh hưởng đến hoạt tính ức chế NO lignan với khung Về hoạt tính gây độc tế bào, hợp chất LC7 serratane triterpenoid Khi so sánh với chất khung LC8, LC9, LC14, điểm khác biệt cấu hình vị trí C-21, LC7 nhóm β-OH hợp chất lại α-OH Kết gợi ý vai trị nhóm β-OH gắn với C-21 hoạt tính gây độc tế bào serratane triterpenoid có khung KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trong trình thực luận án này, thu kết nghiên lồi Thơng đất (Lycopodiella cernua (L.) Pic Serm.) Na rừng Kadsura coccinea (Lem.) A C Sm.) Việt Nam, cụ thể sau: Về thành phần hóa học: Đã phân lập xác định 35 hợp chất từ lồi thực vật này, đó: - Từ lồi Thơng đất: Có 20 hợp chất (LC1-LC10) với hợp chất lycocernuside E (LC1), lycernuic B (LC6) lycernuic ketone F (LC7) 18 hợp chất biết thuộc nhóm chất: lignan (LC2-LC5), serratane triterpenoid (LC8 -LC14), flavonoid (LC15LC17), cernuane triterpenoid (LC18-LC20) - Từ lồi Na rừng: Có 15 hợp chất (KC1-KC15) với hợp chất kadcoccilactone V (KC3), kadsuracin A (KC5), (S)-1phenylethyl-6-α-L-arabinopyranosyl-β-D-glucopyranoside (KC7) 12 hợp chất biết thuộc nhóm chất: nortriterpenoid (KC1KC4), lignan (KC6), phenolic glycoside (KC8-KC12), secolanostane triterpenoid (KC13-KC14), 3,4-secocycloartane triterpenoid (KC15) Về hoạt tính sinh học Các hợp chất thử hoạt tính ức chế sản sinh NO gây độc tế bào ung thư Kết cho thấy: *Hoạt tính ức chế sản sinh NO 22 20 hợp chất từ Thông đất (LC1-LC20) đánh giá hoạt tính ức chế sản sinh NO tế bào BV2 kích thích LPS Trong hợp chất LC3, LC5 có khả ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 21,2 ± 1,1; 28,5 ± 1,4 µM hợp chất từ Na rừng (KC5-KC12) đánh giá hoạt tính ức chế sản sinh NO tế bào RAW264.7 kích thích LPS Các hợp chất KC5, KC6 có khả ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 10,2 ± 0,66 21,7 ± 1,22 µM *Hoạt tính gây độc tế bào ung thư 20 hợp chất Thông đất (LC1-LC20) thử hoạt tính gây độc tế bào dịng tế bào ung thư người MCF7 (ung thư vú), HepG2 (ung thư gan) SK-Mel-2 (khối u ác tính) Hợp chất LC7 cho hoạt tính ức chế tốt dòng tế bào ung thư thử với giá trị IC50 44,85 ± 2,16; 47,97 ± 2,53 69,64 ± 2,97 µM MCF7; HepG2 SK-Mel-2 Hợp chất LC16 cho hoạt tính ức chế yếu dòng tế bào này với giá trị IC50 54,55 ± 3,15; 84,77 ± 4,86 92,25 ± 4,58 µM *Hoạt tính ức chế sinh trưởng tế bào ung thư hợp chất Na rừng (KC1-KC4, KC13-KC15) thử hoạt tính ức chế sinh trưởng tế bào dòng tế bào ung thư HCT-15 (ung thư đại tràng), NUG-3 (ung thư dày), NCI-H23 (ung thư phổi), ACHN (ung thư thận), PC-3 (ung thư tuyến tiền liệt), MDA-MB-231 (ung thư vú) Trong đó, hợp chất KC15 cho khả ức chế mạnh dòng tế bào ung thư phổi (NCI-H23) với giá trị IC50 1,28 ± 0,01, ức chế tốt với phát triển dòng tế bào ung thư lại với giá trị IC50 2,67 ± 0,02 (HCT-15); 1,80 ± 0,02 (NUGC-3); 2,63 ± 0,01 (ACHN); 2,33 ± 0,01 (PC-3) 2,38 ± 0,02 (MDA-MB-231) µM KIẾN NGHỊ Trên sở kết thu được, kiến nghị: Hợp chất KC15 cho khả ức chế sinh trưởng mạnh dòng tế bào ung thư phổi (NCI-H23) với giá trị IC50 1,28 ± 0,01, ức chế đáng kể với phát triển dòng tế bào ung thư với giá trị IC50 2,67 ± 0,02 (HCT-15); 1,80 ± 0,02 (NUGC-3); 23 2,63 ± 0,01 (ACHN); 2,33 ± 0,01 (PC-3) 2,38 ± 0,02 (MDA-MB231) µM Vì vậy, cần có nghiên cứu sâu để định hướng cho thực nghiệm in vivo Khảo sát thêm hoạt tính sinh học khác với chất phân lập nhằm tìm kiếm thêm khả ứng dụng hợp chất 24 ... (Lem .) A C Sm Việt Nam? ?? M? ?c tiêu luận án: Nghiên c? ??u thành phần h? ?a h? ?c lồi Lycopodiella cernua (L. ) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem .) A C Sm Đánh giá hoạt tính gây đ? ?c tế bào ? ?c chế sản sinh NO chất... góp luận án: Đây nghiên c? ??u thành phần h? ?a h? ?c hoạt tính sinh h? ?c hai loài th? ?c vật Lycopodiella cernua (L. ) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem .) A C Sm Việt Nam Nghiên c? ??u thu kết sau: - Từ lồi Thơng... th? ?c vật với đối tượng Việt Nam hạn chế Do đó, chúng tơi l? ?a chọn đề tài: ? ?Nghiên c? ??u thành phần h? ?a h? ?c khảo sát số hoạt tính sinh h? ?c lồi Lycopodiella cernua (L. ) Pic Serm Kadsura coccinea (Lem. )