... chính
+ 5’ pN
OH
5’ P
3 OH
5’ P
Mg
2+
enzyme
5’ P
3 OH
5’ P
3 OH
3 OH
enzyme
3 P
+ 2P
i
3 P
5’
5’
3 OH
3 OH
5’
5’
Công nghệ DNA tái tổ hợp
23
3. Brown TA. 2001. Gene ...
Công nghệ DNA tái tổ hợp
10
).
C
5’ 3
DNA polymerase
DNA
OH
+ ndNTP DNA- (
p
dN)
n
+ nPP
i
DNA
đơn/
nhóm 3 -OH tự do
3 5’
Exonuclease
5’
p
N
OH...
... 1
Phát triển màu
Công nghệ DNA tái tổ hợp
162
của gen c
L
L
của như: pPLa 231 1, pPLa 8 và pKC30.
Hình 7.5. Vector pKC30. pKC30 là plasmid có kích thước xấp ...
dạng tái tổ hợp của protease 3C từ rhinovirus của người. Protease này có
kích thước nhỏ (20 kDa) và có một tính đặc hiệu rất hạn chế. Nó được biểu
hiện như là một protein tái t...
...
5’
3
3
3
3
Công nghệ DNA tái tổ hợp
107
thành sẽ không được đẩy vào trong các tế bào mới của quá trình phân chia tế
bào. Ngoài ra, còn phải có một gốc tái bản để sao chép DNA. ... screening…).
Điểm cắt
DNA polymerase I
(a)
(b)
5’
5’
5’
5’
3
3
3
3
Vết cắt
Công nghệ DNA tái tổ hợp
111
Hình 5 .3. Hình ảnh điện di của genomic D...
... Quốc Dung
Giáo trình
Công nghệ DNA tái tổ hợp
NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh
2007
Công nghệ DNA tái tổ hợp
181
đã có những đóng góp ... V
nhân tạo xây
dựng thư viện cDNA (cDNA library).
DNA khuôn mẫu (template DNA) .
(sao chép) hoặc khuếch đại DNA (PCR)
.
DNA polymerase. mẫu
.
Công nghệ DNA tái tổ...
... trắng-thể tái tổ hợp
Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp
Công nghệ DNA tái tổ hợp
104
15- 23 kb), cosmid (45 kb) hay BAC (>100 kb).
g
(xem chương 6).
II. Tạo dòng các đoạn DNA để xây ...
cos
DNA
Đuôi
DNA
A
λ
B
Công nghệ DNA tái tổ hợp
1 03
5.1 .
. a, b, c và d trình bày sự khác nhau...
... thái
Vùng hợp nhất và tái tổ
hợp (vùng đệm)
Vùng điều hòa và
miễn dịch
Vùng sao
chép DNA
Vùng phân
giải vật chủ
Vùng điều hòa
chức năng muộn
R-cos
Công nghệ DNA tái tổ hợp
83
được ... tính.
2 .3. Biến nạp vector tái tổ hợp vào vi khuẩn/tế bào vật chủ
Sau khi tạo được vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc tiếp theo là
biến nạp nó vào tế bà...
...
DNA thứ nhất, sau đó dùng sợi này làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA
thứ hai (tương tự như giai đoạn thứ nhất và thứ hai của quá trình tổng hợp
cDNA-xem chương 6).
Giai đoạn thứ hai. Dùng DNA ... nhiệt theo chu kỳ như sau:
DNA đã biết
X
Y
5’
5’
3
3
X
Y
PCR
Tạo vòng bằng DNA
ligase
Enzyme hạn chế
Enzyme hạn chế
69
5’
3
i cDNA (5’ 3
3. 11).
.
(re...
...
27
.
Công nghệ DNA tái tổ hợp
1 43
Tổng hợp cDNA
sợi thứ hai bằng
primer-adapter
sợi đơn.Tạo ra
nhiều vị trí cắt
hạn chế ở đầu
tận cùng cDNA
CCCCCCCCCC
3
(T)
n
CAGCTGAGG
... nghệ DNA tái tổ hợp
159
Hình 7 .3. Vector pEX2. Plasmid vector này dài khoảng 5,8 kb được thiết kế để
biểu hiện đoạn DNA ngoại lai (cD...