3.1.2.1 Sơ đồ chiết xuất các phân đoạn (hình 3.1)
Hình 3.1: Sơ đồ chiết các phân đoạn Khúng khéng Dược liệu (10g)
Dịch chiết Ethanol (C)
Phân đoạn n – hexan (Hx)
Chiết nóng với Ethanol 98% (40ml)
Phân đoạn nước
Phân đoạnn-BuOH (Bu)
Lắc với Ethylacetat (20ml x 3 lần)
Phân đoạn EtOAc (Et) Phân đoạn nước
Thu hồi dung môi. Hòa trong nước (20ml)
Lắc với n – hexan (20ml x 3 lần)
Lắc vớin-BuOH (20 ml x 3 lần)
3.1.2.2 Định tính cắn phân đoạn n-hexan bằng SKLM:
- Dịch chấm sắc ký: Cắn ethanol toàn phần và cắn n-hexan thu được sau lắc phân đoạn theo sơ đồ ở hình 3.1
- Điều kiện sắc ký:
Bản mỏng có kích thước 10 x 3 cm. Thể tích chấm mỗi vết: 10μl.
Hệ dung môi khai triển: Toluen : ethyl acetat (7 : 3).
Hiện màu: Acid sulfuric 10% trong ethanol. Sấy ở 105oC/10 phút.
Soi dưới đèn tử ngoại bước sóng 254 nm, 366 nm. - Kết quả được trình bày ở hình 3.2 và bảng 3.2:
Hình 3.2: Sắc ký đồ SKLM cắn Ethanol toàn phần (C) và cắn phân đoạn
n-hexan (Hx) của Khúng khéng
Chú thích
Hình A: Quan sát ở UV 254 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình B: Quan sát ở UV 366 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình C: Quan sát ở UV 366 nm sau khi phun thuốc thử
Bảng 3.2: Kết quả SKLM cắn phân đoạn n-hexan
STT
Cắn chiết Ethanol Phân đoạn n-hexan
Rf Màu sắc Rf Màu sắc UV 366 nm sau TT AST sau TT UV 366 nm sau TT AST sau TT 1 0,11 Tím Hồng 2 0.23 Hồng Tím 0.23 Hồng Tím 3 0,34 Hồng Tím 0,34 Hồng Tím 4 0,41 Trắng Hồng 0,41 Trắng Hồng 5 0,47 Hồng Tím 0,47 Hồng Tím 6 0,53 Hồng 0,53 Hồng 7 0,57 Tím 0,57 Tím 8 0,61 Xanh Hồng 0,61 Xanh Hồng 9 0,64 Hồng Hồng 0,64 Hồng Hồng 10 0,66 Trắng 0,66 Trắng
Nhận xét: Trên sắc ký đồ quan sát dưới UV 366 nm sau khi phun thuốc thử có thể thấy ở cắn ethanol có 10 vết và ở cắn n-hexan có 9 vết có Rf và màu sắc tương đương. Quan sát dưới ánh sáng thường sau khi phun thuốc thử, ở cắn ethanol có 7 vết màu hồng đến tím và ở cắn n-hexan có 6 vết có Rf và màu sắc tương đương.
3.1.2.3 Định tính cắn phân đoạn ethyl acetat bằng SKLM (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Dịch chấm sắc ký: Cắn ethanol toàn phần (C) và cắn ethyl acetat (Et) thu được sau lắc phân đoạn theo sơ đồ ở hình 3.1
- Điều kiện sắc ký:
Bản mỏng có kích thước 10 x 3 cm. Thể tích chấm mỗi vết: 10μl.
Hệ dung môi khai triển: Ethyl acetat : methanol : nước (100 : 13 : 10).
Hiện màu: thuốc thử hỗn hợp acid boric 10% - acid oxalic 10% trong nước (tỷ lệ 2:1). Sấy ở 105oC/10 phút.
Soi dưới đèn tử ngoại bước sóng 254 nm, 366 nm. - Kết quả được trình bày ở hình 3.3 và bảng 3.3:
Hình 3.3: Sắc ký đồ SKLM cắn Ethanol toàn phần (C) và cắn phân đoạn ethyl acetat (Et) của Khúng khéng
Chú thích
Hình A: Quan sát ở UV 254 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình B: Quan sát ở UV 366 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình C: Quan sát ở UV 366 nm sau khi phun thuốc thử
Hình D: Quan sát ở ánh sáng trắng sau khi phun thuốc thử.
Bảng 3.3. Kết quả SKLM cắn phân đoạn Ethyl acetat
STT
Cắn chiết Ethanol Phân đoạn Ethylacetat
Rf Màu sắc Rf Màu sắc UV366nm sau TT AST sau TT UV366nm sau TT AST sau TT 1 0,45 Xanh Cam 0,45 Xanh Cam 2 0,73 Đỏ Xanh lá
3 0,77 Xanh Vàng 0,77 Xanh Vàng 4 0,9 Xanh Cam 0,9 Xanh Cam 5 0,95 Đỏ Xanh lá
Nhận xét: Trên sắc ký đồ quan sát dưới UV 366 nm sau khi phun thuốc thử có thể thấy ở cắn ethanol có 5 vết rõ và ở cắn ethyl acetat có 3 vết có Rf và màu sắc tương đương. Quan sát dưới ánh sáng thường sau khi phun thuốc thử, ở cắn ethanol có 5 vết màu vàng đến cam và ở cắn ethyl acetat có 3 vết có Rf và màu sắc tương đương.
3.1.2.4 Đối với cắn n-buthanol
- Dịch chấm sắc ký: Cắn ethanol toàn phần và cắn n-buthanol thu được sau lắc phân đoạn theo sơ đồ ở hình 3.1
- Điều kiện sắc ký:
Bản mỏng có kích thước 10 x 3 cm. Thể tích chấm mỗi vết: 10μl.
Hệ dung môi khai triển: Cloroform : methanol : amoniac (65:35:10).
Hiện màu: thuốc thử anisaldehyd trong ethanol. Sấy ở 105oC/10 phút.
Soi dưới đèn tử ngoại bước sóng 254 nm, 366 nm. - Kết quả được trình bày ở hình 3.4 và bảng 3.4:
Hình 3.4: Sắc ký đồ SKLM cắn Ethanol toàn phần (C) và cắn phân đoạn
n-buthanol (Bu) của Khúng khéng
Chú thích Hình A: Quan sát ở UV 254 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình B: Quan sát ở UV 366 nm trước khi phun thuốc thử.
Hình C: Quan sát ở UV 366 nm sau khi phun thuốc thử (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Bảng 3.4: Kết quả SKLM cắn phân đoạn n-buthanol
STT
Cắn chiết Ethanol Phân đoạn n-buthanol
Rf Màu sắc Rf Màu sắc UV 366 nm sau TT AST sau TT UV 366 nm sau TT AST sau TT 1 0,06 Đen Xanh đen
2 0,12 Đen Xanh đen 0,12 Đen Xanh đen 3 0,17 Tím Xanh 0,17 Tím Xanh 4 0,24 Tím Tím 0,24 Tím Tím 5 0,38 Tím Xanh 0,38 Tím Xanh 6 0,51 Tím Xanh 0,51 Tím Xanh 7 0,58 Tím Xanh 8 0,63 Tím đậm Xanh tím 0,63 Tím Xanh 9 0,70 Xanh Tím 0,70 Xanh Tím 10 0,73 Tím Xanh tím
11 0,93 Xanh đen Xanh tím 0,93 Xanh tím Xanh
Nhận xét: Trên sắc ký đồ quan sát dưới UV 366 nm sau khi phun thuốc thử có thể thấy ở cắn ethanol có 11 vết và ở cắn n-buthanol có 8 vết có Rf và màu sắc tương đương. Quan sát dưới ánh sáng thường sau khi phun thuốc thử, ở cắn ethanol có 11 vết màu xanh đến tím và ở cắn n-buthanol có 8 vết có Rf và màu sắc tương đương.