tới khả năng tạo mô sẹo phôi hóa
Các loại auxin: NAA, 2,4-D, picloram được sử dụng ở nồng độ tương ứng với các thí nghiệm trên tiếp tục để khảo sát sự tạo thành mô sẹo phôi hóa từ các mô sẹo đã được tạo ra từ các thí nghiệm trên.
3.6.2.1. Thí nghiệm 4: Nghiên cứu sựảnh hưởng của NAA tới tỷ lệ tạo mô sẹo phôi hóa.
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 công thức (CT) ứng với các nồng độ khác nhau, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi đĩa 20 mẫu. CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 6 mg/l CT3: 8 mg/l CT4: 10 mg/l CT5: 12mg/l Chỉ tiêu theo dõi:
Tỷ lệ mô sẹo phôi hóa hình thành sau các lần cấy chuyển từ môi trường DKW sang môi trường MMS, từ MMS sang MMS.
Tỷ lệ mô sẹo phôi hóa hình thành = ∑ Số mẫu hình thành mô sẹo phôi hóa
∑ Số mẫu nuôi cấy
Chất lượng mô sẹo tạo thành sau 14 ngày nuôi cấy: kích thước, màu sắc, độ nhày... Phương pháp tiến hành:
Sau khi 14 ngày nuôi cấy trong môi trường DKW, sử dụng kính hiển vi để
chọn các callus tốt, cấy chuyển sang môi trường MMS có bổ sung NAA ở 280C, cứ
2 tuần lại cấy chuyển sang môi trường MMS 1 lần. Ở giai đoạn này phôi sẽ phát triển và phân chia. Cấy chuyển qua 4 lần môi trường MMS. Quan sát và theo dõi sự
3.6.2.2. Thí nghiệm 5: Nghiên cứu sự ảnh hưởng của 2,4D tới tỷ lệ tạo mô sẹo phôi hóa.
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 công thức (CT) ứng với các nồng độ khác nhau, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi đĩa 20 mẫu. CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 6 mg/l CT3: 8 mg/l CT2: 10 mg/l CT2: 12 mg/l
Chỉ tiêu theo dõi: Giống TN 4
Phương pháp tiến hành: Tương tự TN 1, chỉ khác loại auxin bổ sung là 2,4D.
3.6.2.3. Thí nghiệm 6: Nghiên cứu sự ảnh hưởng của picloram tới tỷ lệ tạo mô sẹo phôi hóa.
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 công thức (CT) ứng với các nồng độ khác nhau, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi đĩa 20 mẫu. CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 8 mg/l CT3: 10 mg/l CT2: 12 mg/l CT2: 14 mg/l
Chỉ tiêu theo dõi: Giống TN 4
Phương pháp tiến hành: Tương tự TN 1, chỉ khác loại auxin bổ sung là
picloram.
Phương pháp xử lý số liệu
- Các số liệu được tính toán bằng phần mềm Excel. - Các số liệu phân tích là trung bình của các lần theo dõi
- Quá trình xử lý số liệu được thực hiện trên máy tính theo chương trình IRRISTART 4.0.
- Các công thức so sánh được tiến hành theo phương pháp kiểm tra sự sai khác giữa các giá trị trung bình bằng phép ước lượng và sử dụng tiêu chuẩn LSD ( Least Significant Different) ởđộ tin cậy 95%.
- Kiểm tra độ biến động của các thí nghiệm được biểu hiện qua chỉ số tiêu chuẩn CV%
Phần 4
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU