tới khả năng tạo mô sẹo
Các chồi thu được trong môi trường CAM được sử dụng làm vật liệu nghiên cứu cho ảnh hưởng của auxin tới khả năng tạo mô sẹo.
Các loại auxin: NAA, 2,4-D, picloram được sử dụng để khảo sát sự tạo thành mô sẹo.
3.6.1.1. Thí nghiệm 1: Nghiên cứu sựảnh hưởng NAA tới khả năng tạo mô sẹo
Phương pháp tiến hành:
Chuẩn bị mô sẹo : nuôi cấy đoạn thân chứa mắt ngủ trong môi trường CAM sau 2~4 ngày, dùng mũi kim tiêm nhỏ (panh nhỏ) tách chồi nách và cấy chuyển sang môi trường CIM có bổ sung NAA theo các công thức trong bố trí thí nghiệm. Nuôi cấy ở 280C trong 14 ngày.
Sau khi 14 ngày nuôi cấy, sử dụng kính hiển vi để chọn các callus tốt, cấy chuyển trên môi trường DKW có bổ sung NAA theo các công thức trong bố trí thí nghiệm. Nuôi cấy ở 280C, trong 14 ngày.
hóa
Cấy chuyấn
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 CT ứng với các nồng độ khác nhau, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi mỗi đĩa 20 mẫu. CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 6 mg/l CT3: 8 mg/l CT4: 10 mg/l CT5: 12mg/l Chỉ tiêu theo dõi:
Tỷ lệ mô sẹo hình thành sau khi nuôi cấy qua các môi trường từ môi trường
CAM sang CIM, CIM sang DKW.
Tỷ lệ mô sẹo hình thành = ∑ Số mẫu hình thành mô sẹo
∑ Số mẫu nuôi cấy
Chất lượng mô sẹo tạo thành sau 14 ngày nuôi cấy: kích thước, màu sắc,...
3.6.1.2. Thí nghiệm 2: Nghiên cứu sựảnh hưởng 2,4D tới khả năng tạo mô sẹo
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 công thức (CT) ứng với các nồng độ khác nhau của 2,4D, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi đĩa 20 mẫu. CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 6 mg/l CT3: 8 mg/l CT4: 10 mg/l CT5: 12mg/l
Chỉ tiêu theo dõi: Giống TN 1
Phương pháp tiến hành: Tương tự TN 1, chỉ khác loại auxin bổ sung là 2,4D.
3.6.1.3. Thí nghiệm 3: Nghiên cứu sựảnh hưởng picloram tới khả năng tạo mô sẹo
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn. Với 5 công thức (CT) ứng với các nồng độ khác nhau, mỗi công thức 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại cấy 5 đĩa, mỗi đĩa 20 mẫu.
CT1 (Đ/C): 0 mg/l CT2: 8 mg/l
CT3: 10 mg/l CT2: 12 mg/l CT2: 14 mg/l
Chỉ tiêu theo dõi: Giống TN 1
Phương pháp tiến hành: Tương tự TN 1, chỉ khác loại auxin bổ sung là picloram.