tím
Pha loãng 2 mẫu tinh dầu Sa nhân tím phần trên mặt đất và phần thân rễ với xylen với tỷ lệ: Tinh dầu/ xylen= 1/10 thu được dịch chấm sắc ký lớp mỏng.
Sử dụng máy chấm sắc ký để đưa dịch chiết lên bản mỏng. Triển khai sắc kí lớp mỏng các hệ dung môi khác nhau:
Hệ 1: Toluen- Aceton- Acid formic (75:20:2) Hệ 2: Toluen- Ethylacetat (93:7)
Hệ 3: Ether dầu hoả- Ethylacetat (8:2) Hệ 4: Hexan- Ethylacetat (8: 2) Hệ 5: Chloroform- Methanol (9:1)
Sau khi triển khai dịch chiết trên các hệ dung môi trên thì nhận thấy hệ 2 có khả năng tách chất tốt nhất. Sử dụng máy CAMAG REPROSTAR 3 để chụp ảnh sắc ký ở bước sóng 254nm, 366nm và sau khi phun thuốc thử hiện màu. Sử dụng phần mềm winCATS và VideoScan để phân tích hình ảnh. Sắc ký đồ dịch chấm tinh dầu khi khai triển ở hệ 2 được trình bày trong hình 3.8.
Hình 3.7: Sắc ký đồ dịch chiết Ether dầu hoả phần trên và dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan-Ethylacetat-acid acetic (12:2:1) ở:
a. UV 254nm b. UV 366nm
c. Phun thuốc thử hiện màu A1,B1,C1: Phần trên mặt đất A2,B2,C2:Phần dưới mặt đất
Hình 3.8: Sắc ký đồ tinh dầu phần trên và dưới mặt đất Sa nhân tím khai triển hệ dung môi Toluen- Ethylacetat (93: 7) ở:
a. UV 254nm
b. Phun thuốc thử hiện màu T1, T2: Phần trên mặt đất D1, D2: Phần dưới mặt đất
a b
Hình 3.9: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết của dịch chiết Ether dầu hoả phần trên mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan- Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) ở UV 254 nm.
Hình 3.10:Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết của dịch chiết Ether dầu hoả phần dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan- Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) ở UV 254 nm.
Hình 3.11:Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết của dịch chiết Ether dầu hoả phần trên mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan- Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) ở UV 366 nm
Hình 3.12:Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết củadịch chiết Ether dầu hoả phần dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan- Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) ở UV 366 nm
Hình 3.13: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết của dịch chiết Ether dầu hoả phần trên mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Hexan- Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) sau khi phun thuốc thử hiện màu.
Hình 3.14: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá các vết của dịch chiết Ether dầu hoả phần dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung
môi Hexan-
Ethylacetat- acid acetic (12:2:1) sau khi phun thuốc thử hiện màu.
Nhận xét: Sắc ký đồ, đồ thị và giá trị lượng giá các vết dịch chiết Ether dầu hoả phần trên và dưới mặt đất được phân tích bởi phần mềm VideoScan ở độ nhạy 30 cho kết quả sau: ở UV 254nm: sắc ký đồ phần trên mặt đất có 8 vết, phần dưới mặt đất có 3 vết; ở UV 366nm: sắc ký đồ phần trên mặt đất có 13 vết, phần dưới mặt đất có 6 vết; khi phun thuốc thử hiện màu: sắc ký đồ phần trên mặt đất có 9 vết, phần dưới mặt đất có 10 vết. Nhìn chung, phần trên và dưới mặt đất giống nhau ở hầu hết số vết, vị trí vết ở UV 254nm và khi hiện màu (các vết có khác nhau về cường độ màu), điểm khác là vết số 11 ở phần trên mặt đất ở UV 254nm và khi phun thuốc thử thì lên màu rõ rệt trong khi phần dưới mặt đất không có vết này. Ở UV 366nm, phần trên mặt đất hiện rõ các vết đỏ của chlorophil.
Hình 3.15: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá của các vết tinh dầu phần trên mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Toluen- Ethylacetat (93:7) ở UV254 nm.
Hình 3.16: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá của các vết tinh dầu phần dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Toluen- Ethylacetat (93:7) ở UV254 nm.
Hình 3.17: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá của các vết tinh dầu phần trên mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Toluen- Ethylacetat (93:7) sau khi phun thuốc thử hiện màu.
Hình 3.18: Sắc ký đồ, đồ thị, bảng biểu diễn lượng giá của các vết tinh dầu phần dưới mặt đất Sa nhân tím khi khai triển hệ dung môi Toluen- Ethylacetat (93:7) sau khi phun thuốc thử hiện màu.
Nhận xét: Sắc ký đồ, đồ thị và giá trị lượng giá các vết tinh dầu phần trên và dưới mặt đất được phân tích bởi phần mềm VideoScan ở độ nhạy 30 cho kết quả sau: Ở UV 254nm, sắc ký đồ phần trên mặt đất có 3 vết, phần dưới mặt đất có 1 vết. Khi phun thuốc thử hiện màu: sắc ký đồ phần trên mặt đất có và phần dưới mặt đất đều có 10 vết. Nhìn chung, phần trên và dưới mặt đất giống nhau ở hầu hết số vết, vị trí vết ở UV 254nm và khi hiện màu (các vết có khác nhau về cường độ màu), điểm khác là vết số 10 ở phần trên mặt đất ở UV 254nm và khi phun thuốc thử thì lên màu rõ rệt trong khi phần dưới mặt đất thì vết này mờ nhạt ở cả UV 254nm và khi phun thuốc thử.