4. kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.3.3. Kết quả xác định chỉ số ELD50 của chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH EG 2000.
Nh− vậy, việc bảo quản và vận chuyển không làm ảnh h−ởng đến chỉ số EID50 của chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000. Xác định đ−ợc EID50 giúp chúng tôi có đ−ợc số liệu để tính liều virus trong cấy truyền chế vacxin viêm gan vịt. Để khẳng định chắc chắn phôi bị nhiễm virus, ng−ời ta dùng nồng độ 100 đến 1000 lần liều EID50. Nh− vậy liều virus thích hợp tiêm vào phôi để chế vacxin sẽ là 103EID50/0,2ml.
4.3.3. Kết quả xác định chỉ số ELD50 của chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000. gan vịt DH - EG - 2000.
Cùng với việc xác định chỉ số EID50 của chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000 chúng tôi tiến hành xác định chỉ số ELD50, thực hiện chỉ tiêu này chúng tôi đã tiến hành 3 lần thí nghiệm trên phôi gà 10 ngày tuổi, virus đ−ợc pha loãng theo bậc 10, từ 10-1 đến 10-7, mỗi nồng độ tiêm cho 5 phôi với liều 0,2ml/phôi. Theo dõi phôi trong 96 giờ và tính ELD50 theo công thức của Reed - Muench (bảng 8).
+ Lần thí nghiệm thứ nhất theo dõi phôi chúng tôi thấy: ở độ pha loãng virus 10-1-10-2, virus gây chết 100% phôi. Các độ pha loãng tiếp theo số phôi chết giảm dần, ở 10-6 không gây chết phôi. Chỉ số ELD50 của virus đạt 10-4,33/0,2ml.
+ Lần thí nghiệm thứ hai: ở độ pha loãng virus 10-1-10-3, virus gây chết 100% phôi. ở 10-7 không còn khả năng gây chết phôi. Chỉ số ELD50 của virus đạt 10-4,42/0,2ml.
+ Lần thí nghiệm thứ ba cho kết quả t−ơng tự. Chỉ số ELD50 của virus đạt 10-4,21/0,2ml.
So sánh chỉ số ELD50 của lần thí nghiệm thứ nhất với ELD50 của lần thí nghiệm thứ hai và thứ ba không có sự sai khác với P>0,05.
Qua 3 lần thí nghiệm chúng tôi thấy chỉ số ELD50 của giống virus
vacxin là t−ơng đối ổn định, virus có chỉ số ELD50 trung bình là 10-4,32/0,2ml.
Nghiên cứu chủng virus vacxin viêm gan vịt nh−ợc độc trên phôi gà (chủng VN), Trần Minh Châu và cộng sự (1985)[5] cho biết: virus vacxin khi nuôi cấy trên phôi gà cho ELD50 từ 4-5/0,2ml.
Theo Lê Thanh Hoà và cộng sự (1984)[14], virus vacxin viêm gan vịt chủng TN của Asplin trong điều kiện Việt Nam khi nuôi cấy trên phôi gà cho ELD50 là 3,41/0,2ml.
Theo OIE (2000)[55], vacxin viêm gan vịt nh−ợc độc trên phôi gà phải có tối thiểu 103,3ELD50 cho một liều sử dụng.
Nh− vậy, sau khi xác định chỉ số EID50 và ELD50 của chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000 chúng tôi thấy sau một thời gian vận chuyển và bảo quản chủng virus viêm gan vịt nh−ợc độc DH - EG - 2000 vẫn giữ đ−ợc các đặc tính sinh học và chỉ tiêu của chủng trên phôi gà. Vì vậy có thể dùng chủng virus nh−ợc độc viêm gan DH - EG - 2000 để chế tạo vacxin phòng bệnh viêm gan vịt cho đàn vịt nuôi ở n−ớc ta.
4.4. Nghiên cứu biến đổi bệnh lý của phôi gà sau khi gây nhiễm chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000 chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000
Chủng virus nh−ợc độc viêm gan vịt DH - EG - 2000 có khả năng nhân lên trên phôi gà, gây bệnh tích và làm chết phôi, để nghiên cứu những biến đổi bệnh lý trên phôi khi nhiễm virus, chúng tôi tiến hành kiểm tra
bệnh tích đại thể trên phôi gà và bệnh tích vi thể trên tổ chức gan của phôi gà khi gây nhiễm chủng virus vacxin viêm gan vịt DH - EG - 2000.