- DIỄN GIẢI KẾT QUẢ
4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.4. Kết quả kiểm tra chỉ tiêu hiệu lực của vacxin nhược ựộc Gumboro (bằng xác ựịnh hiệu giá virus TCID 50/liều vacxin).
Vacxin ngoài chỉ tiêu thuần khiết, an toàn, còn phải có hiệu lực. đây là một chỉ tiêu quan trọng của 1 loại vacxin vì vacxin không có hiệu lực sẽ không có ý nghĩa trong phòng bệnh. Vì vậy ựánh giá hiệu lực của vacxin là một chỉ tiêu không thể thiếụ
để xác ựịnh hiệu lực của vacxin có thể dùng nhiều phương pháp: công cường ựộc, phương pháp thay thế
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 54
Gumboro, ựể xác ựịnh hiệu lực của vacxin có thể sử dụng phương pháp thay thế là: phương pháp trung hòa trên tế bào hoặc chuẩn ựộ xác ựịnh hiệu giá virus có trong 1 liều vacxin. Mổi liều vacxin phải có hiệu giá virus từ 103TCID50 trở lên.
Trong ựiều kiện ựề tài, chúng tôi ựã tiến hành chuẩn ựộ hiệu giá virus nhược ựộc Gumboro trong vacxin trên môi trường tế bào xơ phôi gà một lớp. Mỗi lô vacxin kiểm tra 3 mẫụ Mỗi mẫu vacxin ựược hoàn nguyên lại bằng nước muối sinh lý vô trùng. Pha loãng 1 liều vacxin theo cơ số 10, từ nồng ựộ 10-1 ựên 10-7. Mỗi nồng ựộ pha loãng virus gây nhiễm cho 4 lọ tế bàọ đỗi chứng 4 lọ tế bào không gây nhiễm virus. để các lọ tế bào trong tủ ấm 37oC, hàng ngày quan sát tế bào hủy hoại bằng kắnh hiển vi Olympus. Tắnh TCID50
theo công thức Reed-Muench. Kết quả thu ựược ựược trình bầy ở bảng 4.5
Kết quả ở bảng 4.5 cho thấy: *Lô vacxin 1:
- Chuẩn ựộ hiệu giá virus trong mẫu vacxin 1 cho thấy: sau khi gây nhiễm virus nhược ựộc Gumboro 72 giờ, virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.05 TCID50.
- Mẫu vacxin 2 sau khi gây nhiễm virus 72 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 103.95 TCID50.
- Mẫu vacxin 3 sau khi gây nhiễm virus 48 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.10 TCID50.
Như vậy ở lô vacxin 1, cả 3 mẫu vacxin kiểm tra ựiều ựạt hiệu giá virus quy ựịnh: lớn hơn 103 TCID50/liều vacxin.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 55
Bảng 4.5 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin nhược ựộc Gumboro bằng xác ựịnh hiệu giá virus TCID50/liều vacxin
Lô vacxin Mẫu vacxin kiểm tra độ pha loãng virus Số lọ tế bào gây nhiễm/1 nồng ựộ
Thời gian tế bào bắt ựầu có CPE
(giờ)
Hiệu giá virus TCID50/liều vacxin
Tiêu chuẩn vacxin 1 10-1 - 10-7 4 72 104.05 2 10-1 - 10-7 4 72 103.95 1 3 10-1 - 10-7 4 48 104.10 1 10-1 - 10-7 4 72 104.25 2 10-1 - 10-7 4 72 103.90 2 3 10-1 - 10-7 4 72 104.10 1 10-1 - 10-7 4 48 104.35 2 10-1 - 10-7 4 72 104.15 3 3 10-1 - 10-7 4 72 103.90 103 TCID50/liều vacxin
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 56
*Lô vacxin 2:
- Chuẩn ựộ hiệu giá virus trong mẫu vacxin 1 cho thấy: sau khi gây nhiễm virus nhược ựộc Gumboro 72 giờ, virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.25 TCID50.
- Mẫu vacxin 2 sau khi gây nhiễm virus 72 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 103.90 TCID50.
- Mẫu vacxin 3 sau khi gây nhiễm virus 72 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.10 TCID50.
Như vậy ở lô vacxin 2, cả 3 mẫu vacxin kiểm tra ựiều ựạt hiệu giá virus quy ựịnh: lớn hơn 103 TCID50/liều vacxin
*Lô vacxin 3:
- Chuẩn ựộ hiệu giá virus trong mẫu vacxin 1 cho thấy: sau khi gây nhiễm virus nhược ựộc Gumboro 48 giờ, virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.35 TCID50.
- Mẫu vacxin 2 sau khi gây nhiễm virus 72 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 104.15 TCID50.
- Mẫu vacxin 3 sau khi gây nhiễm virus 72 giờ virus ựã gây hủy hoại tế bào, hiệu giá virus trong 1 liều vacxin ựạt 103.90 TCID50.
Ở lô vacxin 3, cả 3 mẫu vacxin kiểm tra ựiều ựạt hiệu giá virus quy ựịnh: lớn hơn 103 TCID50/liều vacxin.
Như vậy, qua kiểm tra chỉ tiêu hiệu lực của 3 lô vacxin nhược ựộc Gumboro, cả 3 lô vacxin ựều ựạt về chỉ tiêu hiệu lực