Xác định trạng thái kết tinh của dược chất bằng phương pháp nhiệt lượng vi sai quét (DSC). Trước khi phân tích nhiệt, các mẫu NLC fluconazol được đông khô bằng máy đông khô Labconco qua 3 giai đoạn như sau:
- Giai đoạn 1: đông lạnh: hạ nhiệt độ xuống khoảng -70oC trong 6 giờ.
- Giai đoạn 2: làm khô sơ cấp: nâng nhiệt độ lên -15oC có hút chân không với tốc độ gia nhiệt 0,5oC/ phút, giữ tại – 15oC trong 20 giờ.
- Giai đoạn 3: làm khô thứ cấp: nâng nhiệt độ nhanh lên đến 30oC với tốc độ gia nhiệt 0,25oC/ phút, giữ tại 30oC trong vòng 8 giờ.
Khối lượng mẫu phân tích nhiệt được đảm bảo sao cho lượng FLZ trong mỗi mẫu là gần tương đương nhau nhằm tránh hiện tượng pha loãng làm giảm cường độ pic của FLZ. Kết quả cho thấy đường nhiệt của FLZ nguyên liệu có một pic thu nhiệt mạnh tại 140OC tương ứng với nhiệt độ nóng chảy của FLZ, một pic thu nhiệt nhẹ tại 100OC tương ứng với quá trình mất nước của dạng FLZ monohydrat [8]. Các pic này không xuất hiện trên đường nhiệt của các mẫu NLC fluconazol chứng tỏ có sự hòa tan/ phân tán của FLZ vào cốt lipid hoặc sự chuyển dạng FLZ từ kết tinh sang vô định hình.
Hình 3.13: Phổ nhiệt lượng vi sai quét của các mẫu fluconazol, alcol cetylic, F-NLC 0; 2; 20%
Trong các mẫu NLC fluconazol 0%, 2% và 20%, có thể do sự có mặt của Tween 40, acid oleic (có điểm chảy thấp - thể hiện ở các pic thu nhiệt tại khoảng 10 - 20OC) và fluconazol đã ngăn cản sự hình thành các tinh thể hoàn chỉnh của alcol cetylic do vậy pic thu nhiệt tương ứng với điểm chảy của alcol cetylic (60OC) bị dịch chuyển (từ 60 xuống 50OC).