hiemalis
Chúng tôi thực hiện kết tủa protease từ môi trường nuôi cấy Mucor hiemalis đã lọc loại bỏ sinh khối bằng (NH4)2S0 4 ở nồng độ 85% bão hòa và tinh chế bằng cồn tuyệt đối rồi tiến hành khảo sát ảnh hưởng của pH và nhiệt độ đến hoạt độ của pro tease Mucor hiemalis.
■ Khảo sát ảnh hưởng của pH
Tiến hành xác định hoạt độ protease được chiết tách và tinh chế từ môi trường nuôi cấy Mucor hỉemalis ở các đệm pH từ 2 đến 8. Kết quả thu được thể hiện ở bảng 3.4.
Bảng 3.4. Hoạt độ protease ở các pH khác nhau
pH 2 3 4 5 6 7 8
HđP (nKat) 32114 40143 29104 21075 9032 3011 1505
36
Nhận xét: Từ kết quả trên chúng ta có thể nhận thấy, protease Mucor hiemalis hoạt động tốt nhất trong khoảng pH 2 - 5 và hoạt độ protease đạt cao nhất ở pH 3. Hoạt độ giữ được khá cao ở pH 3 - 5, hoạt độ giảm mạnh khi pH trên 5 và protease gần như hoàn toàn mất hoạt tính ở pH trung tính và kiềm.
■ Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ.
Tiến hành xác định hoạt độ protease được chiết tách và tinh chế từ môi trường nuôi cấy Mucor hiemalis ờ các nhiệt độ: 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65°c. Kết quả thu được thể hiện ở bảng 3.5.
Bảng 3.5. Hoạt độ protease ở các nhiệt độ khác nhau
Nhiệt độ
C O 35 40 45 50 55 60 65
HđP
(nKat) 29260 32771 36283 39794 42135 38624 16386
Hình 3.5. Ảnh hưỏ'ng của nhiệt độ đến HđP
Nhận xét: Hoạt độ của protease tăng dần từ 35°c và đạt cao nhất ở
37
hơn 60°c. Từ đó ta có thể kết luận, khoảng nhiệt độ thích hợp của protease
Mucor hiemalis là 45 - 60°c.