sinh enzyme
Nguyên tắc: So sánh khả năng sinh enzyme của B. subtilis nattokhi thay đổi thành phần môi trường dinh dưỡng và giữ nguyên các điều kiện nuôi cấy khác.
a. Khảo sát ảnh hưởng của nguồn hydratcarbon
23
loại đường khác nhau: glucose, saccharose, maltose, lactose, hấp tiệt trùng. Tiến hành nuôi cấy vi khuẩn theo phương pháp ở mục 2.3.1. Sau đó, đem thử và so sánh hoạt tính enzyme của dịch lên men từ các môi trường theo phương pháp mô tả ở mục 2.3.4. Làm 3 lô ở 3 thời điểm khác nhau và lấy kết qủa trung bình.
b. Khảo sát ảnh hưởng của đậu tương và của chất cảm ứng tạo protease (casein)
Pha 50 ml các môi trường: môi trường MT2 và MT2 bổ sung riêng từng thành phần: 2% đậu tương hạt, 2% bột đậu tương, 0,5% casein vào các bình nón 100 ml, hấp tiệt trùng. Tiến hành nuôi cấy vi khuẩn như phương pháp mô tả ở mục
2.3.1. Sau đó, đem thử và so sánh hoạt tính enzyme của dịch lên men từ các môi trườngtheo phương pháp mô tả ở mục 2.3.4. Làm 3 lô ở 3 thời điểm khác nhau và lấy kết qủa trung bình.
c. Khảo sát ảnh hưởng của một số muối vô cơ
Pha 50 ml môi trường MT2 và MT2 bổ sung riêng 0,05% từng loại muối vô cơ CaCl2,MnCl2, MgSO4, hấp tiệt trùng. Tiến hành nuôi cấy vi khuẩn như phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.1. Sau đó, đem thử và so sánh hoạt tính enzyme của dịch lên men từ các môi trường theo phương pháp mô tả ở mục 2.3.4. Làm 3 lô ở 3 thời điểm khác nhau và lấy kết qủa trung bình.
2.3.3. Phương pháp chiết tách và tinh sạch protease
24