mAU
min
1 - 8.467
2 - 9.600
WVL:220 nm
Tuy nhiên pH giảm từ 2,4 xuống 2,3 thì thêm 1 lượng acid lớn, trong khi hệ
số bất đối AF giảm 1 lượng không đáng kể từ 1,62 xuống 1,59.Mặt khác: càng giảm pH thì tuổi thọ của cột cũng giảm theo vì làm tăng tốc độ thủy phân pha tĩnh, và cột Luna C8 chúng tôi đang sử dụng đã qua sử dụng từ lâu, nên chúng tôi chọn hệ pha
động là hỗn hợp MeOH: đệm phosphat 0,01M pH = 2,4 để tiếp tục khảo sát.
3.1.4.2Chọn tỷ lệ pha động
Thay đổi thành phần pha động với mục đích tách pic Captopril ra khỏi pic tạp sẵn có và chọn pha động có khả năng tách tốt nhất, chúng tôi tiến hành khảo sát hệ pha động là hỗn hợp MeOH : đệm phosphat 0,01 M pH = 2,4. Theo tỷ lệ MeOH tăng dần như sau:
Hệ I : MeOH : Đệm phosphat 0,01M pH 2,4 (60:40) Hệ II : MeOH : Đệm phosphat 0,01M pH 2,4 (65:35) Hệ III : MeOH : Đệm phosphat 0,01M pH 2,4 (70:30)
Sắc ký đồ và thông số phân tích Captopril khi chạy hệ I được ghi ở hình 3.6
Hình 3.6 : Sắc ký đồvà thông số phân tích Captopril chạy hệ MeOH : Đệm pH 2,460:40
Sắc ký đồ và thông số phân tích thu được cho ta thấy pic của Captopril và pic của tạp chất chưa tách ra khỏi được nhau (tCaptopril = 8,467 phút, ttạp chất = 9,600 phút ) và thời gian lưu của Captopril dài. Trong trường hợp này, nếu giảm tỷ lệ MeOH trong pha động thì thời gian lưu càng tăng, trong khi thời gian lưu của pic tạp đã là No. Ret.Time Width Resol. Asym.
Min Min (EP) (EP) 1 8,467 0,659 n.a. n.a. 2 9,600 1,285 n.a. n.a.
0.0 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 8.8 10.0 12.2-10 -10 20 40 60 80