Tiến hành thử độc tính cấp theo phương pháp Litchfield- Wilcoxon.
Tiến hành trên chuột nhắt trắng, các bước tiến hành cụ thể như sau:
Chuột được nhịn đói 4h trước khi uống chế phẩm thử, nước uống bình thường. Sau 4h, chuột được chia thành 6 lô (mỗi lô 8 con), dùng chế phẩm thử.
- Lô 1: uống cao TES với liều 28 g cao/kg Thiến chuột
7 ngày sau thiến
Chia lô Giết chuột, tách, cân các cơ quan sinh dục phụ Cho uống
mẫu thử 2 4 6
2 4 6 8 10 Ngày
- Lô 2: uống cao TES với liều 32 g cao/kg - Lô 3: uống cao TES với liều 34 g cao/kg - Lô 4: uống cao TES với liều 35 g cao/kg - Lô 5: uống cao TES với liều 36 g cao/kg - Lô 6: uống cao TES với liều 48g cao /kg
Mẫu thử được pha trong Na-CMC 0,5% để đảm báo thể tích mẫu thử cho uống là 0,2ml/10g chuột
Sau khi chuột nhận liều mẫu thử cuối cùng 2 giờ, chuột được cho ăn trở lại. Chuột được cho uống nước bình thường trong suốt quá trình thí nghiệm. Theo dõi chuột liên tục trong vòng 4 giờ đầu và tiếp tục theo dõi chuột trong thời gian 7 ngày sau khi uống mẫu thử. Các chỉ tiêu theo dõi, đánh giá:
- Tình trạng chung của chuột gồm hoạt động tự nhiên, tư thế, màu sắc (mũi, tai, đuôi), lông, phân, nước tiểu...
- Tỉ lệ chuột chết trong vòng 72 giờ. Khi có chuột chết, tiến hành mổ, quan sát đại thể các cơ quan phủ tạng (tim, gan, thận, phổi, lách, nhu động ruột...). Nếu cần, làm thêm vi thể để xác định nguyên nhân.