đực non thiến
Sử dụng mô hình Hershberger trên chuột cống trắng đực non thiến, khối lượng 60 – 80g, 5 – 6 tuần tuổi [45].
Chuột sau khi nuôi ổn định 5 ngày trong điều kiện phòng thí nghiệm, tiến hành các bước sau:
Bước 1: Thiến chuột: Trước hết gây mê chuột bằng ether mê, sau đó cố định chuột trên bàn cố mổ. Dùng tay vuốt dọc từ ổ bụng xuống, để lộ 2 tinh hoàn trong túi bìu. Sát trùng vùng da bìu bằng cồn iod hữu cơ 10%, dùng kéo rạch một đường giữa da bìu, bộc lộ 2 tinh hoàn, buộc chặt các động mạch tinh hoàn để tránh chảy máu. Cắt bỏ 2 tinh hoàn. Khâu vết mổ lại và cuối cùng sát trùng vùng vết mổ. Sưởi ấm cho chuột trong suốt quá trình phẫu thuật và hồi tỉnh. Chuột sau khi được thiến, được cho ăn uống bình thường trong 1 tuần.
Bước 2: Chia lô, cho uống mẫu thử, mổ tách lấy cơ quan sinh dục phụ
Chuột sau khi thiến 1 tuần được đem chia thành 4 lô, mỗi lô 7-10 con và cho uống mẫu thử như sau:
Lô 1 (Lô chứng): Uống dung môi dùng để pha mẫu thử (NaCMC 0.5%) 10ml/kg
Lô 2 (Testosteron): Tiêm dưới da dung dịch testosteron pha trong dầu oliu với liều 0.4mg/kg, thể trọng (2ml/1kg).
7 ngày nuôi ổn định
Chia lô
Giết chuột, tách, cân các cơ quan sinh dục phụ, định lượng nồng độ testosteron huyết thanh Cho uống mẫu thử 2 4 6 2 4 6 8 10 Ngày
Lô 3 (TES liều 1): Uống chế phẩm TES 6g/kg
Chuột được uống mẫu thử và tiêm testosteron liên tục trong 10 ngày. Cân chuột trước khi cho uống mẫu thử để tính liều mới nhằm có sự phù hợp giữa liều thuốc với sự tăng khối lượng chuột.
Ngày thứ 11 cân lại khối lượng chuột. Lấy máu mắt, đem ly tâm lấy huyết thanh, sau đó giết chuột bằng ether, mổ tách lấy các cơ quan sinh dục phụ gồm tuyến tiền liệt, túi tinh, tuyến cowper, cơ nâng hậu môn, quy đầu rồi đem cân các cơ quan này trên cân phân tích với sai số 0.0001mg.
Các chỉ tiêu theo dõi gồm:
Khối lượng cơ thể chuột trước và sau khi dùng thuốc.
Khối lượngtương đối của tuyến tiền liệt, túi tinh, tuyến cowper, cơ nâng hậu môn, quy đầu.
Quy trình nghiên cứu được tóm tắt ở hình: 2.3
Hình 2.3: Sơ đồ nghiên cứu hoạt tính androgen trên chuột cống đực non thiến. So sánh giá trị trung bình các thông số đánh giá ở trên giữa các lô chuột dùng mẫu thử và lô chứng để đánh giá tác dụng của mẫu thử.