Theo Johannes Kaufmann (1996) [24], ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký
sinh ở bề mặt gan, mỡ màng chài ở khoang bụng của cừu và gia súc. Gia súc nhiễm ấu sán thường không có biểu hiện triệu chứng bệnh, trừ khi nhiễm một số lượng lớn ấu trùng ở nhu mô gan, tình trạng thiếu máu và chết có thể xảy ra.
Bệnh Cysticercus tenuicollis xảy ra trên toàn thế giới, chủ yếu ở khu vực nông thôn. Tỷ lệ nhiễm ở các khu vực thay đổi rất nhiều. Dịch bất ngờ có thể xảy ra do điều kiện khí hậu có lợi cho sự tồn tại của chúng trong đồng cỏ hoặc các hoạt động của động vật hoang dã mang bệnh (Junquera P., 2013) [25].
Trong quá trình hoàn thành giai đoạn ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở KCTG, các ấu trùng 6 móc chui qua niêm mạc ruột, theo máu đến bề mặt gan, màng treo ruột, phổi, gây ra những tổn thương lớn ở các cơ quan này (Woinshet Samuel – Girma G. Zewde, 2010 [27]).
Trong gan, ấu trùng di chuyển thông qua các mô gan tới các bề mặt cơ quan (thanh mạc) trong thời gian khoảng 30 ngày. Trên bề mặt các cơ quan bụng khác nó hình thành các nang nước. Phát triển thành u nang cần 35 đến 55 ngày sau khi nhiễm bệnh. Các nang có thể lây nhiễm cho chó trong vài tháng (Junquera P., 2013) [25].
Các bệnh lý củabệnh Cysticercus tenuicollis ở dê đã được nghiên cứu vào ngày 7, 15, 30 và 60 sau khi gây nhiễm. Các tổn thương đặc trưng thể hiện vào ngày thứ 15 sau khi nhiễm bệnh bao gồm tích tụ của một số lượng lớn chất lỏng fibrin trong xoang phúc mạc và ngực. Xuất huyết cũng xuất hiện trên bề mặt gan và trong nhu mô do di cư Cysticercus tenuicollis .Các tổn thương nhỏ trong gan bao gồm các u nang với một khối lượng của fibrin và hồng cầu.Các tế bào gan bị thoái hóa chủ yếu là do sự phá hủy nhu mô.Xoang được giãn ra và ống mật bắt đầu có những thay đổi thoái hóa.Lá phổi của động vật bị giết chết vào ngày 15, thể hiện những đặc trưng của bệnh
khí thũng và xuất huyết với tác hại của Cysticercus tenuicollis.Màng phổi xuất hiện phù nề.Phế nang cho thấy sự hiện diện của dịch rỉ huyết thanh.
Cysticercus tenuicollis với số lượng lớn ký sinh gây ra viêm gan, hoại tử, thoái hóa dạng hạt, viêm phổi (Nath S. và cs, 2010) [29].
Các ấu trùng của Taenia hydatigena gây thiệt hại lớn trong chăn nuôi do tác hại bệnh lý và tỷ lệ tử vong cao (Abidi và cs, 1989) [21]. Di cư của Cysticercus trong gan có thể gây ra xuất huyết và viêm phúc mạc (Blazek và cs, 1985 [22]) .
Theo Junquera P., (2013) [25], cho đến nay chẩn đoán bệnh do ấu trùng
Phần 3
ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1. Đối tượng, vật liệu, thời gian và địa điểm nghiên cứu
* Đối tượng nghiên cứu
- Dê và chó nuôi tại một số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên. - Bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở dê.
* Vật liệu trong nghiên cứu
- Chó ở các địa phương (mổ khám thu thập sán dây)
- Dê ở các địa phương (mổ khám thu thập ấu trùng Cysticercus tenuicollis)
- Các loại mẫu dùng trong nghiên cứu:
+ Mẫu ấu trùng Cysticerscus tenuicollis thu thập từ dê. + Mẫu sán dây ký sinh ở đường tiêu hóa chó.
+ Mẫu bệnh phẩm các khí quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh. - Dụng cụ, thiết bị và hóa chất:
+ Kính hiển vi quang học, kính lúp. + Lọ đựng mẫu sán dây và ấu trùng.
+ Lọ đựng hoá chất, lamen, lam kính, đĩa petri, chậu thủy tinh, cốc thủy tinh, chén nhuộm, ống đong, giá đựng tiêu bản,...
+ Hóa chất gồm: glyxerin, axit lactic, thuốc nhuộm carmin, cồn (từ 70o
đến 100o), nước cất, xylen, baume-canada,...
* Thời gian nghiên cứu: 12/06/2014 – 25/11/2014 * Địa điểm nghiên cứu:
- Địa điểm thực hiện đề tài: một số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên: huyện Phú Lương, huyện Đại Từ và huyện Định Hóa.
- Địa điểm xét nghiệm mẫu:
+ Phòng thí nghiệm Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên.
3.2. Nội dung nghiên cứu
3.2.1. Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở dê tại một số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên
3.2.1.1. Tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại các địa phương.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê theo tuổi. - Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê theo tính biệt.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng sán Cysticercus tenuicollis ở dê theo tháng trong năm.
3.2.2.2. Nghiên cứu tương quan giữa tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê với tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên
- Thành phần và sự phân bố các loài sán dây ký sinh ở chó tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm Taenia hydatigena ở chó tại một số địa phương. - Xác định tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó với tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê.
3.2.2. Nghiên cứu bệnh học của bệnh ấu trùng Cysticercus tenuicollis
- Triệu chứng lâm sàng của dê bị bệnh.
- Vị trí ký sinh của ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê.
- Bệnh tích đại thể ở các khí quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh.
3.2.3. Đề xuất biện pháp phòng trị bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở dê
3.3. Bố trí thí nghiệm và phương pháp nghiên cứu
3.3.1. Bố trí thu thập mẫu và phương pháp xác định tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê
3.3.1.1. Bố trí thu thập mẫu
Bố trí thu thập mẫu theo phương pháp lấy mẫu phân tầng (Nguyễn Như Thanh, 2001) [16]. Mổ khám dê ở 3 huyện của tỉnh Thái Nguyên. Cụ thể như sau:
STT Địa phương (huyện) Số dê mổ khám (con)
1 Phú Lương 110
2 Đại Từ 83
3 Định Hóa 92
Tổng 285
3.3.1.2. Phương pháp xác định tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê
Mổ khám bằng phương pháp mổ khám phi toàn diện, kiểm tra nội tạng dê và thu thập ấu trùng Cysticercus tenuicollis.
Bộc lộ xoang ngực và xoang bụng dê; phát hiện ấu trùng Cysticercus
tenuicollis ký sinh trên bề mặt gan, lách, màng treo ruột, màng mỡ chài… Thu thập, đếm số lượng ấu trùng/dê và bảo quản ấu trùng trong cồn 700
(Nguyễn Thị Kim Lan, 2012) [9].
3.3.1.3. Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng sán dây Cysticercus tenuicollis gây ra ở dê
* Quy định những yếu tố cần xác định liên quan đến tình hình nhiễm ấu trùng sán dây Cysticercus tenuicollis
- Tuổi dê: Tuổi của dê được phân ra 4 lứa tuổi: ≤ 6 tháng tuổi
> 6 – 12 tháng tuổi > 12 – 24 tháng tuổi > 24 tháng tuổi
3.3.2. Bố trí điều tra và phương pháp xác định tình hình nhiễm sán dây ở chó (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.3.2.1. Thu thập mẫu ở một số xã để xác định tình hình nhiễm sán dây ở chó
Thu thập mẫu sán dây ở đường tiêu hoá của chó theo phương pháp lấy mẫu phân tầng (Nguyễn Như Thanh, 2001) [16]. Mẫu được thu thập tại các địa phương có dê được mổ khám kiểm tra ấu trùng Cysticercus tenuicollis.
3.3.2.2. Phương pháp xác định tình hình nhiễm sán dây ở chó * Phương pháp mổ khám, thu thập sán dây ở chó
Để tìm sán dây ký sinh ở đường tiêu hoá, tiến hành mổ khám chó theo phương pháp mổ khám phi toàn diện cơ quan tiêu hoá của Skrjabin (1928), thu thập mẫu sán dây ký sinh ở ruột của chó.
Sán dây sau khi thu thập được làm chết tự nhiên trong nước lã, sau khi làm sạch bằng nước cất, bảo quản trong cồn 700. Phân loại sơ bộ các loài sán dây đã thu thập được dưới kính lúp và kính hiển vi, căn cứ vào hình thái, cấu tạo của sán dây trưởng thành theo khoá định loại của Phan Thế Việt và cs (1977) [20], Nguyễn Thị Kỳ (2003) [4]. Việc xác định chính xác thành phần loài sán dây ở đường tiêu hoá chó được thực hiện ở Viện sinh thái và Tài nguyên sinh vật.
* Định loại sán dây: Định loại sán dây theo hệ thống phân loại của Schulz và Gvozdev (1970) trên tiêu bản nhuộm carmin (Phan Thế Việt và cs, 1977 [20]; Nguyễn Thị Kỳ, 2003 [4]).
- Làm tiêu bản tạm thời (làm tiêu bản trong): Sử dụng hỗn hợp dung dịch gồm: glyxerin + axit lactic + nước cất theo tỷ lệ 1:1:1. Phương pháp này có thể quan sát cấu tạo sơ bộ của đầu, giúp cho việc định loại sán dây được nhanh chóng.
- Làm tiêu bản cốđịnh:
Quy trình nhuộm như sau:
+ Chọn những mẫu đẹp nhất có cấu tạo đầy đủ (đầu, cổ, thân, đốt già) + Rửa mẫu trong nước cất với thời gian 10 – 15 phút.
+ Ép mẫu: đặt mẫu vào giữa hai lam kính để ép cho mẫu thẳng, các mẫu khác làm tương tự, sau đó đặt các mẫu chồng lên nhau, ngâm trong nước với thời gian 15 phút, sau đó mở ra từ từ.
Trường hợp mẫu tươi: thu mẫu, rửa nhẹ nhàng cho sạch, gắp từng con đặt cẩn thận lên lam kính cho thẳng rồi đặt lam kính khác lên; tiếp tục với những mẫu khác như vậy. Sau đó đặt chồng lên nhau trong một chậu nhựa có nắp đậy, cho cồn 70o vào ngập mẫu, để trong 10 ngày nhấc ra cho vào chậu nước 5 – 10 phút để sán tự bong ra, gắp cho vào cồn 70o, sau 1 tuần đem nhuộm.
+ Mẫu sán lấy ra từ cồn 700 được ngâm trong thuốc nhuộm carmin từ 10 – 15 phút, rồi chuyển lần lượt sang cồn 700
, 800, 960, 1000 với thời gian 15 – 30 phút (tùy kích thước từng mẫu); rồi làm trong bằng xylen.
+ Chuẩn bị lamen và lam kính, nhỏ 1 – 2 giọt baume-canada lên lam kính, sau đó lấy que gắp gắp sán đặt lên giọt baume-canada, đậy lamen lên. Sau một ngày lấy ra soi kính hiển vi.
+ Sau khi làm xong mẫu, điền đầy đủ thông tin về mẫu lên một đầu lam kính.
* Phương pháp xác định cường độ nhiễm sán dây Teania hydatigena
Cường độ nhiễm sán dây được xác định bằng số lượng sán dây ký sinh/chó (mổ khám, thu thập và đếm số lượng sán ký sinh ở mỗi chó).
3.3.2.3. Phương pháp nghiên cứu tương quan giữa tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê với tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó
Xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê và tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó tại từng huyện; sau đó nhập số liệu vào phần mềm Minitab 14.0 để xác định hệ số tương quan và vẽ đồ thị.
3.3.3. Phương pháp nghiên cứu bệnh học bệnh ấu trùng Cysticercus tenuicollis
- Phương pháp nghiên cứu vị trí ký sinh, hình thái, khối lượng của ấu
trùng Cysticercus tenuicollis trong dê nhiễm bệnh: Sau khi mổ khám dê, xác
định vị trí của ấu trùng Cysticercus tenuicollis, đếm số lượng ấu trùng tại các vị trí khác nhau, thu thập ấu trùng, xác định khối lượng bằng cân điện tử, quan sát và mô tả đặc điểm hình thái của ấu trùng.
- Phương pháp nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể ở các cơ quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh trên dê.
+ Triệu chứng lâm sàng được thống kê qua quan sát những biểu hiện sinh lý của dê.
+ Bệnh tích đại thể được xác định bằng cách quan sát những tổn thương ở các cơ quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh.
3.3.4. Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên
Dựa trên kết quả nghiên cứu về tình hình nhiễm sán dây Teania
hydatigena và ấu trùng sán dây Cysticercus tenuicollis xây dựng biện pháp phòng chống bệnh do ấu trùng sán dây Cysticercus tenuicollis ở dê tại một số đị phương thuộc tỉnh Thái Nguyên. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.3.5. Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu thu được được xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học (Nguyễn Văn Thiện, 2008 [17]), trên phầm mềm Minitab 14.0.
Phần 4
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng Cysticercus
tenuicollis gây ra ở dê tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên 4.1.1. Tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại một số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên
Kết quả về tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê được trình bày ở bảng 4.1 và biểu đồ ở hình 4.1
4.1.1.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại một sốđịa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên
Bảng 4.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại 3 huyện
Địa phương
(huyện) Số dê mổ khám (con)
Số dê nhiễm (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (ấu trùng/dê) Phú Lương 110 19 17,27 1 – 20 Đại Từ 83 10 12,05 1 – 13 Định Hóa 92 14 15,22 1 – 21 Tính chung 285 43 15,09 1 – 21 17,27 12,05 15,22 0 5 10 15 20
Phú Lương Đại Từ Định Hóa Huyện Tỷ lệ (% )
Hình 4.1: Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê tại 3 huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên
Kết quả bảng 4.1 và biểu đồ 4.1 cho thấy:
Trong 285 dê mổ khám ở 3 huyện: Phú Lương, Đại Từ và Định Hóa, có 43 dê nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis, tỷ lệ nhiễm chung là 15,09%. Huyện Phú Lương mổ khám 110 dê có 19 dê nhiễm, huyện Đại Từ mổ khám 83 dê có 10 dê nhiễm và huyện Định Hóa mổ khám 92 dê có 14 dê nhiễm, tỷ lệ nhiễm lần lượt là 17,27 %; 12,05 % và 15,22 %. Cường độ nhiễm chung từ 1 – 21 ấu trùng/dê: huyện Phú Lương 1 – 20 ấu trùng/dê, huyện Đại Từ 1 – 13 ấu trùng/dê và huyện Định Hóa 1 – 21 ấu trùng/dê.
Theo Trịnh Văn Thịnh (1977) [18], sự phân bố theo vùng của các loài giun, sán quyết định phần lớn tình hình nhiễm giun, sán ở gia súc.
Như vậy, điều kiện tự nhiên và xã hội có ảnh hưởng tới sự tồn tại và phát triển của các loài giun sán, trong đó có loài Taenia hydatigena và ấu trùng của nó.
Trong vòng đời của sán dây Taenia hydatigena có giai đoạn ấu trùng
Cysticercus tenuicollis. Dê bị bệnh ấu trùng do nuốt phải trứng sán dây
Taenia hydatigena. Điều này liên quan đến số lượng chó nuôi ở các địa phương. Qua khảo sát, chúng tôi thấy bà con ở huyện Phú Lương nuôi chó nhiều hơn ở Đại Từ và Định Hóa. Đó là lý do giải thích tỷ lệ nhiễm ấu trùng
Cysticercus tenuicollis ở dê tại Phú Lương cao hơn so với hai huyện còn lại (17,27% so với 12,05% và 15,22%).
4.1.1.2. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê theo tuổi
Theo Trịnh Văn Thịnh (1977) [18], tuổi của gia súc cũng là một trong những yếu tố ảnh hưởng tới tính cảm thụ đối với bệnh giun, sán. Vì vậy tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis theo tuổi cũng là một chỉ tiêu xác định dê ở lứa tuổi nào dễ nhiễm bệnh nhất để có kế hoạch phòng trị thích hợp.
Kết quả xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis theo tuổi dê được trình bày ở bảng 4.2 và biểu đồ ở hình 4.2.
Bảng 4.2. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê theo tuổi
Tuổi dê
(tháng tuổi) Số dê mổ khám (con)
Số dê nhiễm (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (ấu trùng/con) ≤ 6 41 4 9,76 1 – 9 > 6 – 12 70 11 15,71 1 – 13 > 12 – 24 83 13 15,66 1 – 16 > 24 91 15 16,48 1 – 21 Tính chung 285 43 15,09 1 – 21 9,76 15,71 15,66 16,48 0 5 10 15 20 ≤ 6 > 6 - 12 > 12 - 24 > 24 Lứa tuổi (tháng) Tỷ lệ (%)
Hình 4.2:Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở dê theo lứa tuổi (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Qua bảng 4.2 và hình 4.2 ta thấy:
Dê ở các lứa tuổi đều nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis, tuy nhiên nhiễm cao nhất là ở dê > 24 tháng tuổi (16,48%), sau đó là dê ở độ tuổi > 12 – 24 tháng tuổi (15,66%). Thấp nhất là ở dê độ tuổi dưới 6 tháng.
Dê dưới 6 tháng tuổi cơ hội tiếp xúc với môi trường sống chưa nhiều nên tỷ