Qua tham khảo tài liệu [41], tiến hành bào chế tiểu phân nano ART-PLGA/CS th o phương pháp nhũ hóa bốc hơi dung môi từ nhũ tương dầu nước. Một số thông số được cố định như au pha dầu (5 ml dung dịch DCM chứa ART 0,4% và PLGA 1%), nồng độ Tw n 80 trong pha nước là 1,5%. Cố định các điều kiện: tốc độ phối hợp pha dầu vào pha nước là 2,5 ml/phút, điều kiện siêu âm (tần số 20000Hz, cường độ 20% công suất tối đa (100W), thời gian siêu âm 5 phút), thời gian bốc hơi loại dung môi hữu cơ là 4 giờ.
C được phối hợp vào pha nước trước khi nhũ hóa (phương pháp 1 hoặc được phối hợp au giai đoạn bốc hơi dung môi (phương pháp 2 . Cụ thể như sau:
a. Phương pháp 1 Phối hợp C vào pha nước trước khi nhũ hóa - Chuẩn bị pha dầu: Hòa tan ART và PLGA vào DCM.
- Chuẩn bị pha nước: Hòa tan C trong 50 ml dung dịch acid ac tic 1% (tt tt , iêu âm cho tan hết. Hòa tan Tw n 80 vào dung dịch C đến nồng độ 1,5%.
- Giai đoạn nhũ hóa Nhỏ pha dầu vào pha nước. Nhũ tương dầu nước được đồng nhất sử dụng đầu siêu âm (Sonics & Materials, INC, Mỹ). Trong quá trình đồng nhất duy trì nhiệt độ 5-10oC bằng nước đá kết hợp khuấy từ.
- Bốc hơi dung môi Nhũ tương thu được tiếp tục được khuấy từ nhẹ nhàng nhiệt độ phòng để loại dung môi hữu cơ.
- Tinh chế và thu hồi sản phẩm: hỗn dịch nano thu được được ly tâm ử dụng ống ly tâm có màng iêu lọc (10000Da 5000 vòng phút trong 30 phút, 10oC. Phần cắn thu được được rửa 2 lần với nước cất, mỗi lần 2 ml, au đó được phân tán vào khoảng 10 ml nước sử dụng bể siêu âm.
ơ đồ quy trình bào chế được tóm tắt hình 2.1.
b. Phương pháp 2 Phối hợp CS au giai đoạn bốc hơi dung môi
- Chuẩn bị pha dầu và pha nước Tương tự phương pháp 1 nhưng thay pha nước là 50 ml dung dịch Tw n 80 1,5% trong nước cất.
- Chuẩn bị dung dịch C Hòa tan C (lượng CS thay đổi) trong 50 ml dung dịch acid acetic 1% (tt/tt), siêu âm cho tan hết, điều chỉnh pH=3,0, 4,0, hoặc 5,0 bằng dung dịch NaOH 3N.
- Giai đoạn nhũ hóa và bốc hơi dung môi Giống phương pháp 1.
- Giai đoạn hấp phụ CS: Phối hợp dung dịch CS vào hỗn dịch nano thu được, khuấy từ (400 vòng phút trong điều kiện nhiệt độ và thời gian khảo sát.
- Tinh chế và thu hồi ản phẩm Giống phương pháp 1. ơ đồ quy trình bào chế được tóm tắt hình 2.2.
Một số mẫu tiểu phân nano ART chỉ sử dụng PLGA (ART-P G được bào chế th o quy trình như mục 2.3.1.b nhưng không có giai đoạn hấp phụ CS.
Hình 2.1. Sơ đồ quy trình bào chế tiểu phân nano ART-PLGA/CS th o phương pháp 1
Nhỏ giọt
TIỂU PHÂN NANO ART-PLGA/CS
Khuấy từ liên tục 4 giờ
Ly tâm, rửa
PH NƯỚC
(Dung dịch CS+Tween 80/acid acetic)
PHA DẦU
(ART, PLGA, DCM)
HỆ DỊ THỂ
(Tiểu phân nano ART-PLGA/CS, ART tự do, Tween 80, CS tồn dư) Siêu âm, làm lạnh
NHŨ TƯƠNG
Hình 2.2. Sơ đồ qu trình bào chế tiểu phân nano ART-PLGA/CS th o phương pháp
TIỂU PHÂN NANO ART-PLGA/CS
Khuấy từ liên tục 4 giờ
Ly tâm, rửa
PH NƯỚC
(Dung dịch Tween 80 nước)
PHA DẦU
(ART, PLGA, DCM)
HỆ DỊ THỂ
(Tiểu phân nano ART-PLGA, ART tự do, Tween 80 tồn dư)
DUNG DỊCH CS
Nhỏ giọt Siêu âm, làm lạnh
NHŨ TƯƠNG
HỆ DỊ THỂ
(Tiểu phân nano ART-PLGA/CS, ART tự do, Tween 80, CS tồn dư Phối hợp