a. Thí nghiệm so sánh hiệu quả hòa tan của các hệ tự vi nhũ hóa
Đểso sánh hiệu quả hòa tan rotundin từ các hệ TVNHtiến hành qua các bước như sau:
- Bào chế các công thức TVNH với khối lượng thành phần theo thiết kế thí nghiệm.Mỗi công thức TVNH chứa 20mg RTD được pha loãng với 10 ml nước cất để tạo nhũ tương.Cho nhũ tương vào túi thẩm tích 14000 Dalton sau đó cho vào môi trường hòa tan.
- Sử dụng thiết bị thử độ hòa tan có cánh khuấy với các thông số máy: t0= 37 ± 0,5 0C
Tốc độ quay: 100 rpm
Môi trường hòa tan: 500ml dd HCl pH 1,2.
- Hút 5ml mẫu tại các thời điểm 15 phút, 30 phút, 1 giờ, 1,5 giờ, 2 giờ, 2,5 giờ, 3 giờ và lọc qua màng lọc CA 0,45µm. Sau mỗi lần hút,bổ sung 5ml môi trường.Dịch lọc thu được đem định lượng bằng phương pháp đo quang ở bước sóng 281 nm.
Hiệu quả hòa tan RTD của mỗi công thức hệ TVNH được tính theo công thức[36]: Hiệu quả hòa tan(%) = . 100
S1: Diện tích dười đường cong % DC hòa tan S0: Diện tích hình chữ nhật y100, Tcuối Tcuối là thời gian cuối cùng lấy mẫu
y100 là phần trăm DC hòa tan tối đa 100 (%)
b. Thí nghiệm so sánh khả năng cải thiện hòa tan của hệ tự vi nhũ hóa với nguyên liệu
RTD là dược chất có độ tan thay đổi theo pH, RTD tan tốt trong pH 1,2 và tan kém trong pH kiềm. Nên khi sử dụng theo đường uống, RTD khi đi từ vùng dạ dày xuống ruột, pH môi trường tiêu hóa tăng dần sang pH kiềm, độ tan của RTD giảm đi và có nguy cơ bị kết tinh lại. Thí nghiệm được thiết kế nhằm so sánh ảnh hưởng của thay đổi pH tới khả năng hòa tan DC của hệ TVNHvà nguyên liệu qua đó chứng minh được khả năng cải thiện hòa tan của hệTVNH.
Mẫu thử: Hệ TVNH tối ưu chứa 20mg RTD được đóng vào nang cứng số 0. Mẫu đối chiếu: 20mg nguyên liệu thô được đóng vào nang cứng số 0.
Tiến hành thử hòa tan nang chứa hệ TVNH và nang chứa nguyên liệu qua 2 môi trường pH 1,2 và pH 6,8. Tại thời điểm 2 giờ,môi trường pH 1,2 được thay đổi sang pH 6,8 bằng cách thêm vào 250ml dd Na2HPO4 0,40M.
Sử dụng thiết bị thử độ hòa tan có cánh khuấyvới các thông số: t0= 37± 0,50C
Tốc độ quay: 100 rpm
Thể tích môi trường hòa tan pH 1,2: 500ml Thể tích môi trường hòa tan pH 6,8: 750ml Thời gian hòa tan trong pH 1,2: 2 giờ Thời gian hòa tan trong pH 6,8: 3 giờ
Hút mẫu tại các thời điểm 15 phút, 1 giờ, 1,5 giờ, 2 giờ, 3 giờ, 4 giờ, 5 giờ. Mỗi lần hút 5ml, lọc qua màng lọc CA 0,2μm và bổ sung 5ml môi trường mới.
- Mẫu thử hệ TVNH: lấy dịch lọc thu được pha loãng 2,5 lần bằng methanol. - Mẫu nguyên liệu: dịch lọc thu được tiến hành chạy sắc kí định lượng RTD. Tiến hành chạy sắc ký định lượng RTD trong các mẫu thử hệ TVNH và mẫu nguyên liệu.