9. Tình hình nhiễm HPV tại Việt Nam và trên thế giới 1 Tình hình nhiễm HPV trên thế giớ
2.2.2.Thu thập mẫu nghiên cứu
Những đối tượng đúng tiêu chuẩn lựa chọn, tình nguyện ký cam kết tham gia nghiên cứu được lập danh sách mã hóa. Thông tin cá nhân trên phiếu phỏng vấn, kết quả khám và kết quả xét nghiệm của người tham gia được bảo mật. Tiến hành thu thập mẫu từ tháng 10 năm 2009 đến tháng 10 năm 2012.
Nội dung tiến hành thu thập mẫu nghiên cứu gồm:
* Thu thập thông tin từ phiếu phỏng vấn đã soạn sẵn: Các đối tượng tham gia trả lời phiếu phỏng vấn nhằm cung cấp các thông tin: tuổi, tình trạng hôn nhân, trình độ
học vấn, hành vi tình dục, tiền sử sản phụ khoa, tiền sử hút thuốc lá, tiền sử về các bệnh lây truyền qua đường tình dục.
* Khám sản phụ khoa:
+ Phát hiện tình trạng bệnh lý đường sinh dục trên lâm sàng: tình trạng viêm, tổn thương và phát hiện các khối u sùi.
+ Lấy bệnh phẩm cổ tử cung cho xét nghiệm tế bào học PAP smear và xét nghiệm phát hiện HPV, Clamydia trachomatis, Nesseria gonorrhoeae :
Mẫu bệnh phẩm cổ từ cung được lấy ở nửa sau của chu kỳ kinh nguyệt, không lấy mẫu khi đang có kinh để tránh mẫu bị lẫn máu. Bệnh nhân không được thụt rửa âm đạo, không được đặt thuốc trong vòng 48 giờ trước khi lấy mẫu.
Dùng bàn chải tế bào cổ tử cung (Honest Uterine Cervical Brushes Type S, Honest Medical, Tokyo, Japan) quay tròn một vòng hết bề mặt cổ tử cung. Nhanh chóng phết mỏng tế bào cổ tử cung lên lam kính và nhỏ dung dịch cồn Fixation (Rapid Fix, Muto, Tokyo, Japan) để cố định tế bào, ghi rõ mã số bệnh nhân bằng bút chì loại dùng cho lam kính xét nghiệm tế bào học.
Sau đó, nhúng chổi tế bào vào ống nghiệm Cryotube loại 2ml đã có 1ml đệm tiêu hủy tế bào (TBE buffer, 50mM Tris-HCl, 5mMEDTA, 2%SDS), quay tròn chổi trong dung dịch 2-3 vòng và rũ nhẹ chổi xuống đáy ống. Bảo quản ngay dịch chứa bệnh phẩm cổ tử cung ở -80oC.
* Lấy máu tĩnh mạch:
Lấy 7ml máu tĩnh mạch của mỗi đối tượng nghiên cứu, cho vào ống nghiệm chống đông bằng EDTA K2 DNAase/RNAase Free. Ly tâm, tách huyết tương, bảo quản ngay ở - 80oC sử dụng để phát hiện HIV, HCV, HBV.