- Lớp 1 lá mầm: 1.774 alk.
96Chiết dạng alk base bay hơ
Chiết dạng alk. base bay hơi
(nicotin…)
- làm ẩm bột dược liệu vừa đủ với kiềm thích hợp - chiết bằng phương pháp cất kéo theo hơi nước - thường dùng cho định tính, định lượng ngay.
- Sản phẩm khá tinh khiết; có khi là 1 chất duy nhất. - Ph. pháp này dễ thực hiện, rẻ tiền, sản phẩm sạch; - có tính chọn lọc cao nhưng không phổ biến.
97
hơi nước sôi
nhiệt kế và bộ tiếp nước Alk base ngưng tụ H+ loãng
cất kéo Nicotin theo hơi nước
98
Chiết các alkaloid base thăng hoa
- làm ẩm dược liệu vừa đủ với kiềm thích hợp - làm khô dược liệu (rang, sấy, phơi...)
- đun bằng nhiệt khô (cách cát...)
- thu tinh thể alk. base vừa thăng hoa, - tinh chế lại, nếu cần
Dễ thực hiện, rẻ tiền, sản phẩm khá tinh khiết
nhưng không phổ biến.
99
ống ly tâm chứa nước đá
100
• Chú ý (1)
- các alk base mạnh (N IV; pyridin; 2 Nitơ)
- các phức bền (alkaloid + tannin) Cần dùng kiềm mạnh (NaOH, CaO)
mới có thể giải phóng ra alk. base. • Chú ý (2)
- các alk. base quá yếu (cafein, reserpin…)
có thể tan / dmhc kpc (bình thường) / ROH (bất thường)
101
• Chú ý (3)
- morphin (& alk. có OH-phenol) phản ứng với kiềm tạo morphin base dạng phenolat (tan / nước)
Morphin.meconat + Ca(OH)2 o Ca.morphinat - Nếu cho NH4Cl vào, môi trường sẽ o kiềm, và
Ca.morphinat + NH4Cl o morphin p + NH4OH + CaCl2
102
Thêm nước lạnh vào dịch chiết cồn. Tiếp tục để lạnh qua đêm.
Các tạp kiểu chlorophyll sẽ tủa và được tách riêng.
Thêm (≈ 5%) Celite (Kieselguhr) vào dịch chiết cồn-nước. Khuấy đều, để lắng rồi lọc.
103
Thêm C* (n‰) vào dịch chiết cồn-nước nguội. Khuấy đều, đun nóng rồi lọc nóng.
Các tạp kiểu chlorophyll bám vào C* và được tách riêng. Cần thăm dò tỷ lệ C* cần dùng để loại bỏ tối đa tạp và mất tối thiểu alkaloid (kiểm tra bằng SKLM).
104
• Thêm Chì acetat kiềm hoặc trung tính (C ≈ 10-30%) vào dịch chiết cồn-nước (độ cồn < 25%).
• Khuấy đều, để lắng, gạn rồi lọc thu dịch lọc.
• Kết tủa chì thừa trong dịch lọc bằng Na2SO4 15% • Lọc bỏ tủa PbSO4
• Các tạp polyphenol tạo tủa phức với chì, được tách riêng
• Cần chú ý: Chì là kim loại rất độc.
105
• Acid hóa dịch chiết về pH < (pKa – 2)
Lắc và loại bỏ phần tan trong d.môi hữu cơ kém ph.cực.
• Kiềm hóa dịch chiết về pH > (pKa + 2)
Chiết alk. base bằng dung môi hữu cơ kém phân cực. Cô thu hồi dung môi hữu cơ và thu cắn alk base.
106
Mở đầu
- alk. Σ thường gồm rất nhiều chất cấu trúc #. - vài trường hợp dễ phân lập không cần sắc ký
(% lớn, thăng hoa, cất kéo, kết tủa, kết tinh ph.đoạn) - đa số trường hợp phải qua sắc ký.
vì [alk. base] kém phân cực hơn [alk. muối]
107
Kỹ thuật phân lập
- SKLM chế hóa (pTLC).
- SKC (hấp phụ, phân bố, rây phân tử, trao đổi ion)… - pHPLC, pMPLC.
- SK phân bố ngược dòng (DCCC và HSCCC) Mục đích phân lập
- thu được từng alkaloid riêng biệt, tinh khiết, - không phải artefact