Việc chẩn đoán ung thư để xác định các ca bệnh được tiến hành bằng phương pháp xét nghiệm mô bệnh học; đây là yêu cầu bắt buộc để chẩn đoán xác định ca bệnh trong nghiên cứu.
Trong một số trường hợp cụ thể do không có bệnh phẩm sinh thiết thì có thể sử dụng phương pháp chẩn đoán bằng tế bào học và lâm sàng.
Các kỹ thuật áp dụng trong nghiên cứu được trình bày cụ thể dưới đây:
2.2.3.1. Khám lâm sàng
- Tiêu chuẩn chẩn đoán lâm sàng:
+ Dấu hiệu cơ năng thường gặp nhất là ra máu âm đạo bất thường, nhất là ở phụ nữ đã mãn kinh. Thường gặp ra máu đỏ tươi, ít một, tự nhiên từng thời kỳ hay liên tục.
+ Ra khí hư có khi chỉ là khí hư như nước trong, nhưng cũng có khi lẫn mủ và hôi thối.
+ Đặt mỏ vịt thấy cổ tử cung bình thường, không chảy máu, chỉ thấy có máu từ trong ống cổ tử cung ra, giúp phân biệt với ung thư tại cổ tử cung.
2.2.3.2. Phương pháp cận lâm sàng
2.2.3.2.1. Phương pháp tế bào bệnh học
Mẫu bệnh phẩm được lấy trực tiếp từ buồng tử cung bằng phương pháp hút nội mạc tử cung: dùng một canuyn đường kính 2-3mm bằng kim loại hay chất dẻo đưa vào buồng tử cung và hút bởi một bơm tiêm, bơm bệnh phẩm lên phiến kính cố định và nhuộm sau đó được gửi về bệnh viện K để hội đồng thẩm định chẩn đoán.
2.2.3.2.2. Kỹ thuật sinh thiết nội mạc tử cung
- Chuẩn bị thiết bị: Bàn khám, đèn khám, mỏ vịt, găng, kìm sinh thiết, kẹp cổ tử cung, gạc bong, dung dịch formalin 10% đựng sẵn trong lọ (để chứa mẫu sinh thiết) có ghi nhãn, kẹp hình tim, tủ sấy dụng cụ, lọ đựng bệnh phẩm, giấy thấm
- Kỹ thuật sinh thiết:
+ Chuẩn bị phòng khám, các dụng cụ cần thiết sẵn sàng làm thủ thuật. + Giải thích cách thức tiến hành và các nguy cơ cho bệnh nhân hiểu.
+ Thường không đòi hỏi gây tê, nhưng dùng thuốc chống viêm không steroid (NSAIDs) 30 đến 60 phút trước khi thực hiện có thể giúp giảm chuột rút và đau.
+ Hướng dẫn bệnh nhân nằm theo tư thế khám phụ khoa.
+ Đặt một miếng gạc thấm dưới mông bệnh nhân thấm máu hoặc chất khử trùng. + Đi găng, khám bộ phận sinh dục ngoài.
+ Sử dụng một mỏ vịt để mở ống âm đạo và cổ tử cung, mở tử cung. Trong suốt quá trình sinh thiết nội mạc tử cung, chèn vào một thiết bị hình ống bằng chất dẻo hay kim loại ngang qua cổ tử cung vào trong tử cung để lấy ra một mảnh nhỏ của lớp mô lót bên trong tử cung.
+ Sinh thiết bất kỳ nơi nào trông có vẻ bất thường. Độ sâu của tất cả các mảnh sinh thiết ít nhất là 3mm.
+ Ghi lại những dấu hiệu phát hiện được. Vẽ lại chi tiết sơ đồ tổn thương và vị trí sinh thiết.
+ Trao đổi về những phát hiện trên và hướng dẫn cho bệnh nhân các việc cần làm sau thủ thuật
+ Cố định bệnh phẩm, dán nhãn và gửi về Khoa Giải phẫu bệnh của Bệnh viện K Hà Nội.
2.2.3.3. Kỹ thuật xử lý bệnh phẩm
- Bệnh phẩm sau khi sinh thiết, mổ, được cố định trong formol 10%
- Các bác sỹ giải phẫu bệnh sẽ phẫu tích bệnh phẩm, lựa chọn phần bệnh phẩm phù hợp để xét nghiệm.
- Bệnh phẩm sau đó được cố định và chuyển đúc trên máy chuyển Citadel- 2000 của hãng Shandon, theo quy trình hướng dẫn của nhà sản xuất.
- Sau khi được cố định và chuyển đúc, bệnh phẩm được vùi trong nến.
- Bệnh phẩm được cắt thành các lát cắt mỏng 4μm, được tẩy nến và nhuộm Hematoxylin- Eosin theo quy trình mô học thông thường.
- Kết quả được đọc trên kính hiển vi quang học thường bởi các bác sỹ giải phẫu bệnh có kinh nghiệm tại bệnh viện K Hà Nội.
2.2.3.4. Các tiêu chuẩn chẩn đoán ung thư NMTC bằng mô bệnh học
- Hình thái ác tính của tế bào
+ Nhân lớn, kích thước thay đổi, tăng chất nhiễm sắc rõ. +Màng nhân không đều, dày gồ ghề.
+ Hạt nhân lớn, không đều. + Hình nhân chia bất thường + Nguyên sinh chất ít, nhạt màu - Mất cực tính của tế bào
- Tăng sinh quá mức tế bào biểu mô tạo ra cầu nối trong lòng tuyến. Các tuyến nhập vào nhau, không có mô đệm ngăn cách.
2.2.3.5. Các biến số nghiên cứu * Các biến độc lập: - Tình trạng kinh tế-xã hội: + Độ tuổi + Trình độ văn hóa + Nghề nghiệp + Tình trạng hôn nhân
+ Việc sử dụng thẻ bảo hiểm y tế - Đặc điểm liên quan đến sinh sản: + Tuổi có thai lần đầu
+ Số con hiện còn sống + Tình trạng kinh nguyệt + Số lần sinh đủ tháng + Số lần mang thai chết lưu + Số lần bị sảy thai
+ Số lần nạo hút thai + Số bạn tình
+ Thụt tháo âm đạo
+ Từng lấy bệnh phẩm tại cơ quan sinh sản + Từng điều trị bằng hoóc-môn sau khi mất kinh + Các nhiễm trùng lây truyền qua đường tình dục + Tiền sử phẫu thuật cắt buồng trứng
+ Một số bệnh khác
- Sử dụng các biện pháp tránh thai: + Các biện pháp tránh thai thông thường + Thuốc tránh thai (viên uống, thuốc tiêm) + Biện pháp tránh thai bằng Quinacrine - Phơi nhiễm với ô nhiễm môi trường: + Phơi nhiễm với khói bếp
+ Bản thân phụ nữ hút thuốc lá, thuốc lào + Chồng hút thuốc lá, thuốc lào
* Biến phụ thuộc:
Biến phụ thuộc được xác định trong nghiên cứu này là bệnh ung thư TTC ở phụ nữ thuộc diện nghiên cứu.
2.2.3.6. Một số khái niệm trong nghiên cứu
- Nhiễm trùng cơ quan sinh dục: Đối với nhiễm trùng cơ quan sinh dục, báo cáo các nhiễm trùng lây truyền qua đường tình dục rất hiếm, bởi vậy nghiên cứu đã sử dụng một định nghĩa về các nhiễm trùng cơ quan sinh dục rộng hơn bao gồm cả viêm CTC và viêm âm đạo.
- Hút thuốc lá chủ động: Người hút thuốc lá chủ động là người tự mình hút thuốc. - Hút thuốc lá bị động: Người hút thuốc lá chủ động là người không tự mình hút thuốc nhưng hít phải khói thuốc do người khác hút, có thể ở nhà hoặc nơi công cộng.