I nul l 111 haul) hrniiL: 11 mil Hu m: l li.il rương D ai hoc KilOLi hoc tư nhicn Dai hoc Ounc ' i a la Nô
TÓ M TẮT CÁC CÔNG TRÌNH NCKH CỨA CA NHÀN
NG ÀN H: SINH HOC
1. T rịn h H ổ n g Thái, Trinh Thị Thanh Hương, Lương T huỳ Dương. Phan Thí
H à, (2002). Xenorhabcỉus sp. CA: M ột số tính chất của proteinaz naoại bìu
từ vi k h u ẩ n c ộng sinh với tuyến trùng. Tap chí Di truycn & ứng đ un. (C h u y ê n san CN SH ), tr. 1-5.
T óm tát:
P p ro tein az n goại bào c ủ a vi k h uẩn c ộng sinh với tuyến trùng {Xenorhabdus SỊ C A ) đã được x á c đ ịnh tính chất: pH thích hợp là 8,0. Các proteinaz nay kém bén nhiệt
hoạt tính chỉ c ò n ] 5% sau khi ủ ờ 60nc trong 10 phút. T ro n g số 8 ion kim loại được thử (Ca2+, M g 2+, M n 2+, C u 2+, F c 2+, C o 2+, Z n 2+, H g 2+), các proteinaz bị ức c h ế mạnh hời Hg2+, sau đ ó đ ến Z n 2+, C o 2+ và C u 2+; ngược lại, C a 2+ và M g :+ làm tăng hoạt độ proteinaz.
P ro tc in a z hi ức c h ế m ạ n h bới E D T A và PMSF. M ột số bâng proteinaz dã dược xác định b ằ n g điện di trên gel p o ly a cry lam id e có SDS có cơ chất 0 ,1 % gelatin. Mòt băng e n z y m bị ức c h ế bởi PM SF, các b ăng còn lại bị ức che bới P M SF và ức chỏ’ rrú-í phần bởi E D T A , đặc biệt, có m ột bang chính bị ức c h ế bởi cả E D T A và PMSF.
X e u o rh a h d u s sp. c \ : ch aracterization o f e x tra c e llu la r Proteinases from
e n to m o p a th o g c n ic bactcria. G cnctics and A pplications (B io tech n o lo g y N um ber. 2002). S um m ary:
I; \ l n c c ỉ l u l a i ' n r o l c i n a s o s s c c i c t c d b y c n t o m o p a i h o y c n i c h a d e n a h a w h c e.1
c h a n c l c r i A x l . T h e i r p H o p t i m u m w a s s. T h e p m l c m a s e s w e r e l ess s t abl e: . t u r , U\ r e m a i n e d a b o u t 1 s f / a l t e r m a i b a i m i l at 6( ) " ( ’ 111 10 m i n u t e s . AmoiiL! s call-in-. Ii si ci l ( C r f M 1,:' M u ’ * C i r ’ l v ' - '. Co''. 7.\r‘. I lu ' ). i hc p m k ' i i u v - ' -l i' '11L'I\ mh; ni u. \ l hv 1-1 t h e n bv Z i r Co'-' a m i C u ' ■: o n I h e c o n t r a r y . C.I ' -uni M l ’ i i ilmmm' ' ! i!k-i! a c t i\ i t \ .
by H g 2 , then by Z n 2\ C o 2+ and C u 2+- on the c o n t r a r v r - I w - ■_
. ' Lne contrary. Ca and M g : increased thcir
activity.
P ro le in a s e s w ere strongly inhibited by EDTA and PM SF Some b a n d s 01 Iho
proteinases w ere i d e n t if i e d in p o ly a c r y la m id e g e ls by in c o rp o ra tin g 0.1% gelatin in to sodium d o d e c y l s u lfate (SD S)-polyacrylam ide gel. O ne band was inhibited by PMSF. the oth e r band w as inh ib ite d by PM SF and partly by E D T A . especially, ã m jjo r h a n d
was inhibited by both E D T A and PMSF.
2. T rịnh H ổ n g T hái, Trịnh Thị T hanh Hương. Phan Thị Hà. (2002). N °hiên cứu m ọ t so tinh c h a t c u a proteinaz ngoại bào từ vi khuẩn cộng sinh với tuyên trùn°
(.Xenorhabcỉits sp. XS4). T ạp chí Di truyền & ứng dung (Chuycn san CNSH), tr.
6- 12.
Tóm tắt:
Các p ro te in a z ngoại bào của vi khuẩn cộng sinh với tuyên trùng (X eiioihabíhis
sp. XS4) đã được tinh sạch một phần q u a sắc ký trao đổi ion D E A E Sephadex AÕO. Hoạt tính p ro tein az đ ã được tìm thây ở các phân đoan k h ô n g hấp phụ trẽn cột sác ký.
P ro tein az c ủ a dịch nuôi cấy sau khi ly tâm và phấn k h ô n g hấp phu của CỘI sác ký đã được n g h iẽ n cứu tính chất: pH thích hợp củ a pro tein az bằng 8,0. Trên cư sờ nghiên cứu với các c h ấ t ức c h ế đặc hiệu, các proteina/. bị ức c h ế bới EDTA và o- phenanthroline được phân loại thuộc n h ó m proteinaz kim loại. Các p ro lein a/ này kém bền nhiệt: Sau khi ủ ở 60"C trong 20 phút, hoạt độ e n z y m chí còn 50% so với ban dấu. Trong sô 8 ion kim loai được thử (C a ~ \ M g 2+, M n 2+. F e : \ C o 2+, C u 2+, Z r r +. Mg2*). protcinaz bị ức chê m ạ n h bứi H s :+ (ức chê > 9 0 % ), sau đó đôn C u 2+ và Z i r + (ức chê 70- 80%)- trái lại các ion C a :+, M g :+ và M n 2+đã làm tũrm hoạt dỏ enzym : Điộn di trôn gel p olyacrylam id đã p hân biệt được 4 khu vực có hoạt tính protcma/., trong đó chu yêu là các proteina/. di c h u y ế n chàm . Vai 1 rò của các p r o tc m a / nay trong quá u ìn h gãy họ-nil côn trù n ” cQim đ ã tiược ihád luận.
C h a r a c l c r i / . a t i o i ì o l ' e x i r a . v l l u L i r p r o t c i n a s c s l i i - m c i i i o i i ì o p a t h o ^ o i i K I \ I , U T I , I
(X cno.halxlus sp. XS4). G cnclics and A pplieaiions < N u m h u . ,
.... f " r r secre,ed by ' " ' “ " O t o g e n i c bacteria have hoc, p“ Ĩ p ! * y a n i° " e x c h a n g e c h ro m a to Sra Ph J'. D E A E Sephadcx A-59. Z J Z
activity w as found in the u n a d so rb en . fractions o f ch rom atography column.
P rotein ases o f culture supernatant and unadsorbent fractions have been ch aracterized. p H o p tim u m o f proteinases was 8. O n the basis of inhibitor studies, the protem ases w h ic h w e re inhibited by EDTA and o -p henanthroline were classified as
m e talloproteinases. The proteinases were less stable: their activity remained about m ,
after in c u b a tin g at 60"C in 20 minutes. A m ong 8 cations tested < G r \ M g * M » > . Fe , C o , C u +, Z n , H g 2*), the proteinases were strongly inhibited by H »!* 0 9 0 % inhibition), th e n b y C u 2* and Z n * (70-80% inhibition): on the contrary. O r * M»-* and
Mn in creased activity o f the proteinases. Proteinase activity was identified in
po lyacrylam ide g e ls by incorporating 0.1% gelatin in to sodium dodecyl sult’ate (SDS)-
po lyacrylam ide gel. F o u r zones o f proteinase activity were v is u a liz e d ' in
polyacrylam ide gels in w hich there were so m e proteinase bands, mainly slow migrating p ro tein ase bands. The role o f these proteinases in entom opathogenecity of n e m ato d e-b ac teriu m c o m p le x e s was discussed.
3. T rịnh H ồ n g T hái, T rịn h Thị T hanh H ương, Lương T h u ỳ Dương, Phan Thị Hà, (2004). T h à n h phần proteinaz ngoại bào của vi k h u ẩ n cộ n g sinh với tuyên trùng
(X en o rh a b d u s sp. CA). T ạp c h í k h o a học, Đ H Q G H N (đ an g in).
T ó m tắt:
P ro te in a z n goại bào của vi khuẩn c ộng sinh với tuyến trùng (X enorhabdus sản phẩm . C A ) bị ức chê m a n h bới ED TA và PMSF. T h à n h phần proteinaz đã dươc phân tích bàng điệ n di trên gel polya cry lam d có SDS và có c ơ chất gclatụi 0,1 ty. Hoai tính p roteinaz đã dược n h ận thày ớ 3 khu vực (I, II, III) với độ di động diện di tưưng ứng b ằn ° (0 -0 .0 8 ), (0 .0 9 -0 ,2 ) và ( 0 . 2 > 0 , 3 1). H oạt tính proieina/. cua khu vực II kì manh nhâl c h ú n ° bi ức chõ bói F.DTA và PMSF. Ti'ái lại. hcii chai ức chõ nay lai khnii'j ức chè p r o te in a / cu a khu vực 1 Tuy nhiên. ProteiiKi/ cua khu vực III bị úc chõ manh bới P M S F nlurnu cŨHii bị ức chẽ mõi phan bơi 1:D I A.
O í c i o n C r + B 1:+ M ° : *. M n : '. P b : ' íl.ì l a m l ũng h o a i I.li> p r o k - i n a / cLK1 k h u vực III. tuy n h iê n ánh hường cua các ion N r \ c \ r . K-: '. c II■ < <> 1.11 ra! VCU. U m -
hướng đ ến bang 0 .3 1 . T ro n g sổ các ion kim loại dược nghién cứu. chúng to, chi,, ùm tháy ion n à o có ảnh h ư ờ ng đen bang protcinaz thuộc khu vực II Các prolcm a/ nàv được phân loại th u ộ c n h ó m proteinaz kim loại-xerin.
C o m p o s itio n o f extracellu lar proteinase produced by entom opathosenic b acteria {Xenoj h a b d u s sp. ca). J. o f Science. N atural Sciences (in press)
Summary:
X e n o rh a b d u s sp. C A , an entom opathogenic bacterium associated with the
Steinernem a c a r p o c a p s a e was isolated in V ietnam . E xtracellular proteinase of
Xenorhabclits sp .C A was strongly inhibited by ED T A and PMSF. Proteinase
com position w as an aly zed by using a sodium dodecyl sulfate polyacrylam idc gel
electrophoresis in c o rp o ra tin g 0 .1 % gelatin. P roteinase activity was identified in 3
areas (I, II, II) with relative motility of (0-0,08), (0,09-0,20) và (0,25-0.31).
respectively. P ro te in a s e activity of II was the strongest, the proteinases were inhibited by ED TA and P M SF . In contra ry, they did't inhibite the proteinases of Ỉ. However, the proteinase,s of III w ere stro n g ly inhibited by P M SF and partly inhibited by EDTA.
Ions o f C a 2+ Ba2+, M g 2+, M n 2+, Pb2+ increased the proteinase activity of III, however the e ffe c t o f N r +, C d 2\ F e 2+, C u 2+, C o 2+ was very weak. It is interested that ions of C a 2+ Ba2+, M g 2+, M n 2+ influenced on the band o f 0.25, and Pb2+ influenced only on the band o f 0.31. U n ex p ectiv ely , we did't find any m etal ions w hich effected on the protcinascs o f II. T he p roteinascs w ere classified as serine m ctalloproteinase.
4. T rịn h Thị T h a n h H ươ ng, T rịnh H ồ n g Thái, (2004). N gh iên cứu một số tính chất c í n pro tein a? n °o iú bào từ vi khuan P lio to iliíib ih ix litnitucsc eus Hp Tap ch I
kh o a học, Đ H Q C rH N (đang in).
T óm lát:
n „ l < ; l , a l „ h i s /«»«•«,•«■.•«» H p i;> VI k h u á n c o n g s in h v „ i I I , yen tr im s
Iku-nn-hMìlis bư.l.nrph.-ru I l l ’s,s. r . n / y i ì i kh. i n; . IV n M I C : s a u khi u « ) « 60"C [ r o n g 5 p h ú l . h o ạ i l i n h c n / v m c h i 0.11 S K . - . C a v | . m l , b, ức , h c m a n h M I O T A ( ứ c c h : l l i m SO' I I v à PMSI-- Hi , , h c 1,.M - w ; I T r o n g - i : i „n k n n l „ , i .1 « .*
■hũ ( M „ - \ c v \ I V . CÀ1 : ■ Ba'-\ Mg-; . I'H " . o , - Z n ' . N, . < V • ya 11, - , «...
ché hoat tính proteinaz. đãc biêt íà ion H ơ2+ |'.Y> 1
" ’ ' Hg ức chỏ m anh hoạt tính erưym (ức chõ han
- , Ba k! iL1 vực CÓ h 0 ạt tính pr0teinaz đã đươc xác đ )nh băng kỹ thuật điên di trên gcl polya crylam it có SDS và có c a chất gelatin: các p ro tein az của khu vực I có dô di dong điên di (R m ) từ 0 - 0 , 1 ; các băng khu vực II có R m từ 0,29- 0.34 và bang proteinaz cun khu vực III c ó R m = 0 ,4 6 . E D T A ức c h ế m anh các proteinaz cua khu vực I va PN1SF ức chê m ạ n h các b ãng proteinaz của cả khu vực I và II
C ác b à n g p ro te in a z c ù a khu vực I bị ức c h ế bời E D T A được phục hỏi hoại tính sau khi ù vối c á c ion N i*2, M n*; , M g « và Ca*. H oạt tính proteinaz đưạc ĩang lo„ tó i a í c ion N i+2, M n +2 và M g +2.
Dựa trên c á c n g h iê n cứu về chất ức c h ế và sự khôi phục hoạt tính bởi m ột số 1011 kim loại sau k hi bị ức chế, các bãng proteinaz của khu vực I có thể được xếp vào nhóm proteinaz kim loại -xêrin.
C h a ra c te riz a tio n o f e xtra cellular Proteinases from bacteria plw torliabdiis
lu m in e s c e n t H p. J. o f Science, N atural Sciences (in press).
S um m a ry
P h o to rh a b d u s lu m in e sc e /is H p are b acteria sy m b io tic with cnlom opalhogenic
nam atode o f H e te r o r h a b tỉitìs b a c te rio p h o ra H P88. E x tra c e llu la r protcinases of p.
Ittm inescens H p w ere ch aracterized: the pH o p tim u m was pH 8.0. The enzy m e was n u
stable at 60"C: a fte r in c u b atin g the e n z y m e at 60°c in 5 m in u tes, its activity remained 50%. The p ro tein ases w ere strongly inhibited by E D T A (> 8 0 % inhibition) and PMSF (>20% inhibition). A m o n g 12 tested mclal ions (M n*2, C a +\ F e +2. C(J’\ Ru+\
Pb+2 C o +2 Z n +2 N i+\ C u +2 and H g +:). the ions o f M n +:. C a +2, F e +: incrcated activity of the proteinase, the ions o f H e +\ C u +2. N i+\ C o ' \ P h +’ inhibited activity (if the
prolcinascs csp e c ia llv . the ion ol III! ' stronyly inhibited protcinascs (> 6 7 'i
inhibition).
T h r e e a r e a s o f p r o t e i n a s e a c t i v i t y w e r e i n t i c n t i i i e d h v c k - c t r o p h o i v s i s III ;i L v l a t m -
c o n t a i n i n g p o l y a c i y l a m k l c a c t i v i t y gel : h a n d s o f I will) i vLi l i u- in<»nlit> ( R i n j o ! (I (I. I.
bands of Ii with R m of 0.29- 0.34. and KiihI ol [II with Km (it O.Afy 11)1 A siron-h
T h e p ro tein ases o f I, w hich were inhibited by E D T A , restored iheir activity in incubating w ith m e tal ions o f N i+2, M n +2, M s +: and C a+:. The proteinase activity of III was in c re ased b y ions o f N i +2, M n +: and M g +2. On the basis of inhibitor studies and restoration of th eir activity by som e metal ions, the proteinases o f I behaved like serine m e talloproteinase.