3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.1.ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC DUNG DỊCH
NUÔI CẤY KHÁC NHAU ĐẾN SINH SẢN CỦA TẾ BÀO TINH HOÀN
Để đánh giá tác dụng và ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy khác nhau đến sự sinh sản của tế bào tinh hoàn, chúng tôi tiến hành loại bỏ lần lượt từng yếu tố sinh trưởng, sau 48 giờ nuôi cấy chúng tôi thu được kết quả như sau:
Bảng 3.1. Ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy đến khả năng sinh
sản của tế bào tinh hoàn
Yếu tố bị loại bỏ Chỉ tiêu đánh
giá Không
loại bỏ Insulin Selenit Transferrin Mitogenic
Số lượng tế
bào/mm2 794,46 196,97 357,83 410,36 95,20
Hoạt tính tế
bào (%) 100 77,63 85,77 88,51 73,61
Biểu đồ 3.1. Ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy khác nhau đến hoạt
tính và khả năng sinh sản của tế bào tinh hoàn.
(Chú thích: các chữ cái khác nhau trên mỗi cột thể hiện P < 0,05; các chữ cái giống nhau thể hiện P > 0,05)
Sau 48h nuôi cấy, không bổ sung các nhân tố thí nghiệm vào nhóm đối chứng, chúng tôi nhận thấy nhóm ITS có thể thúc đẩy khả năng sinh sản của tế bào tinh hoàn (P < 0.05, Biểu đồ 3.1). Có nhiều nhân tố ảnh hưởng đến khả năng sinh sản của tế bào tinh hoàn, nếu chỉ dùng dung dịch nuôi cấy tế bào thì khả năng sinh sản của tế bào rất thấp, đặc biệt trong trường hợp loại bỏ insulin ra khỏi môi trường nuôi cấy tế bào thì khả năng sinh trưởng của tế bào giảm đi rõ rệt, khả năng sinh sản của tế bào càng giảm đi nếu tiếp lục loại bỏ transferrin, selen ra khỏi dung dịch nuôi cấy. Tiếp tục đánh giá ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy khác nhau đến hoạt tính (MTT) và khả năng thúc đẩy sinh sản của tế bào tinh hoàn, so sánh với các nhân tố thí nghiệm khác cho thấy: dung dịch ITS có khả năng thúc đẩy khả năng sinh sản và hoạt tính của tế bào tinh hoàn, trong khi các nhân tố thí nghiệm khác có ảnh hưởng rất thấp đến khả năng sinh sản của tế bào tinh hoàn.
Huyết thanh là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến khả năng sinh sản của tế bào động vật , do vậy thay thế hoặc bổ sung huyết thanh vào môi trường nuôi cấy có khả năng thúc đẩy khả năng sinh sản của tế bào động vật. Trong nuôi cấy tế bào, cần bổ sung các yếu tố sinh trưởng mitogenic, insulin và transferrin nhằm duy trì sự sống của tế bào mầm. Loại bỏ các nhân tố thí nghiệm ra khỏi dung dịch nuôi cấy ITS cũng gây ảnh hưởng đến khả năng sinh sản của tế bào, nếu dung dịch insulin có mặt trong dung dịch môi trường nuôi cấy sẽ nhận thấy rõ ảnh hưởng của nó đến khả năng sinh sản của tế bào. Insulin có thể liên kết với các thụ thể trong màng tế bào kích hoạt các protein tyrosine kinase và tyrosine kinase protein thông qua đường dẫn truyền tín hiệu nội bào nhằm thúc đẩy sự phát triển của các tế bào thụ thể. Bên cạnh đó ta thấy, selen và transferrin cũng có vai trò quan trọng đối với khả năng sinh trưởng của tế bào tinh hoàn.