để thấy rõ mức ựộ tổn thương của một số khắ quan: ruột, gan, thận, phổiẦở lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) chúng tôi ựã tiến hành nghiên cứu bằng phương pháp mô học thông thường.
Chúng tôi tiến hành mổ khám 5 con lợn mắc bệnh có triệu chứng ựiển hình nhất. Ở mỗi mẫu nguyên con, chúng tôi tiến hành lấy các cơ quan: ruột, gan, thận, phổi, dạ dày, hạch ựể nghiên cứu. Sau khi lấy mẫu bệnh phẩm từ các cơ quan của lợn mắc bệnh, chúng tôi bảo quản trong formol 10% trong thời gian từ 1-2 tuần, sau ựó làm tiêu bản nhuộm HE.
Tiêu bản vi thể ựược chúng tôi thực hiện tại phòng thắ nghiệm Bộ môn Bệnh lý, Khoa Thú y - trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội.
Từ những mẫu bệnh phẩm thu ựược, chúng tôi tiến hành ựúc block, mỗi block chúng tôi tiến hành cắt, nhuộm tiêu bản, sau ựó soi kắnh hiển vi, ựọc kết quả bệnh tắch vi thể. Bệnh tắch vi thể ựáng chú ý nhất ở những lợn ựã nghiên cứu là những biến ựổi ở ruột, phổi, hạch lâm ba, gan và thận. Mỗi bệnh phẩm của mỗi con khác nhau ựược làm 6 block. Từ mỗi Block sau khi làm tiêu bản chúng tôi chọn ra 5 tiêu bản ựẹp nhất ựể kiểm tra bệnh tắch vi thể. Tiêu bản ựược ựể khô và quan sát dưới kắnh hiển vi quang học. Kết quả kiểm tra 150 tiêu bản thuộc 30 block của 5 lợn nói trên ựược trình bày ở bảng 3.8.
đánh giá bệnh tắch vi thể: Nếu block nào có 2 tiêu bản có bệnh tắch trở lên thì chúng tôi coi là dương tắnh.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi dựa trên những tiêu bản dương tắnh ựiển hình ựược tổng hợp ở bảng sau.
Trong ựó: n Ờ số block nghiên cứu. n (+) Ờ số block dương tắnh.
Kết quả nghiên cứu bệnh tắch vi thể ở ruột lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) ựược trình bày ở bảng 3.8 như sau:
Bảng 3.8. Kết quả nghiên cứu bệnh tắch vi thể ở ruột của lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) Tổn thương vi thể (n = 30)
Sung huyết Xuất huyết Hoại tử tế
bào Thoái hóa tế bào Thâm nhiễm tế bào viêm Lông nhung bị phá hủy Tăng sinh các nang lympho TT Cơ quan n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % 1 Tá tràng 30 100 13 43.33 18 60 30 100 15 50 23 76.67 24 80 2 Không tràng 24 80 24 80 13 43.33 30 100 18 60 30 100 18 60 3 Hồi tràng 18 60 25 83.33 6 20 24 80 15 50 23 76.67 18 60 4 Kết tràng 24 80 13 43.33 13 43.33 13 43.33 13 43.33 18 60 13 43.33
Qua bảng 3.8 cho chúng ta thấy bệnh tắch vi thể ở ruột ựã bị biến ựổi rất lớn, ựặc biệt là hiện tượng sung huyết, xuất huyết và thâm nhiễm tế bào viêm ở các block nghiên cứu. Vì ruột là cơ quan bị ảnh hưởng, tác ựộng tương ựối sớm và nhiều nhất.
Hiện tượng sung huyết ựược thể hiện ở các mạch quản giãn rộng, chứa ựầy hồng cầu. Hiện tượng này xuất hiện ở 30 block mẫu tá tràng, chiếm tỷ lệ 100%; 24 block mẫu không tràng, chiếm tỷ lệ 80%; 18 block mẫu hồi tràng, chiếm tỷ lệ 60%; 24 block mẫu kết tràng, chiếm tỷ lệ 80%.
Hiện tượng xuất huyết: đây là hiện tượng các mao mạch và mạch quản ở ruột bị tổn thương. Làm hồng cầu thoát mạch vào lòng ruột, nằm lẫn trong các chất chứa của ruột gây mất máu cho lợn bệnh. Bệnh tắch này xuất hiện nhiều nhất ở 25 block mẫu hồi tràng chiếm tỷ lệ 83.33%
Ở giai ựoạn ựầu có các yếu tố tác ựộng nhẹ, tạo ựiều kiện ựể vi rút nhân lên. Khi ựó cấu trúc ựại thể của ruột hầu như không có gì thay ựổi, chỉ có biểu mô của niêm mạc ruột thấy thoái hóa tế bào, tế bào thường mọng nước, gây phù nhẹ niêm mạc, cùng hạ niêm mạc thấy xuất huyết các mạch quản. Thoái hóa tế bào xuất hiện ở 30 block mẫu tá tràng và không tràng chiếm tỷ lệ 100%.
Ở lợn mắc bệnh nặng, bệnh tắch ựại thể rõ ràng thì biến ựổi bệnh lý diễn ra phức tạp hơn, xuất huyết và hoại tử tràn lan là biến ựổi bệnh lý ựặc trưng của bệnh. Tế bào niêm mạc ruột bị hoại tử bắt màu hồng ựều, mất cấu trúc tế bào, không phân biệt ựược phần nhân tế bào và tế bào chất. Bên cạnh ựó còn thấy lớp lông nhung của biểu mô niêm mạc ruột bị phá hủy, các tuyến tiết dịch tiêu hóa cũng không còn.
Hiện tượng thâm nhiễm tế bào viêm: Bệnh tắch vi thể chủ yếu xuất hiện ở 15 block tá tràng, chiếm tỷ lệ 50%; 18 block không tràng, chiếm tỷ lệ 60%, 15 block hồi tràng, chiếm tỷ lệ 50%, 13 block kết tràng, chiếm tỷ lệ 43.33% tổng số block. Các tế bào viêm như ựại thực bào, bạch cầu ái toan, ựa nhân trung tắnh.
Ngoài ra, khi quan sát các tiêu bản vi thể ruột ựều cho thấy rõ sự phá hủy của lông nhung ở tá tràng, không tràng và hồi tràng rất cao như ở tá tràng và hồi
tràng chiếm tỷ lệ 76.67% mẫu bệnh, ở không tràng cao nhất chiếm 100% số mẫu bệnh quan sát.
Nang lympho là nơi cư trú chủ yếu của các tế bào lympho B. Trước khi có sự kắch thắch của các kháng nguyên thì các nang này ựược gọi là nang tiên khởi. Do còn trong thời kì nghỉ nên các tế bào lympho còn nhỏ, cái nọ nằm sát cái kia tạo ra một hình thái ựặc biệt. Nhưng sau khi có sự kắch thắch của kháng nguyên thì chúng sẽ tăng sinh thành nang thứ phát chứa những tế bào tiền thân sẽ tiết ra kháng thể. Hiện tượng tăng sinh các nang lympho xuất hiện ở 24 block tá tràng, chiếm tỷ lệ 80%; 18 block không tràng, chiếm tỷ lệ 60%, 18 block hồi tràng, chiếm tỷ lệ 60%, 13 block kết tràng, chiếm tỷ lệ 43.33%.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho thấy, các tổn thương vi thể ở ruột chủ yếu của lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) là sung huyết, xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, lông nhung bị ăn mòn, tăng sinh các nang lympho và hoại tử tế bào.
Ngoài sự biến ựổi vi thể của ruột thì một số cơ quan khác cũng có sự biến ựổi, chúng tôi tiến hành nghiên cứu trên các cơ quan như: hạch ruột, gan, phổi, thận, kết quả ựược trình bày ở bảng 3.9.
Bảng 3.9. Bệnh tắch vi thể ở một số cơ quan của lợn con mắc tiêu chảy do virus (PED)
Tổn thương vi thể (n = 30)
Sung huyết Xuất huyết Hoại tử tế bào Thoái hóa tế bào Thâm nhiễm tế bào
viêm STT Cơ quan n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % n (+) % 1 Phổi 24 80 13 43.33 6 20 13 43.33 24 80 2 Gan 13 43.33 13 43.33 13 43.33 24 80 15 50 3 Hạch ruột 30 100 18 60 18 60 15 50 15 50 4 Thận 15 50 13 43.33 13 43.33 24 80 18 60
Qua bảng 3.9 chúng tôi thấy quá trình tổn thương ở hạch ruột, gan, phổi, thận chủ yếu là hiện tượng sung huyết, thâm nhiễm tế bào viêm có ở tất cả các block nghiên cứu.
+ Phổi: Sung huyết, xuất huyết và thâm nhiễm tế bào viêm chiếm phần lớn. Phổi sung huyết xuất hiện ở 24 block chiếm tỷ lệ 80%, thâm nhiễm tế bào viêm xuất hiện ở 24 block chiếm tỷ lệ 80%, sung huyết ở phổi rất rõ ràng, các mạch quản dãn rộng chứa ựầy hồng cầu. Bên cạnh ựó còn thấy phổi bị xuất huyết, hồng cầu tràn ngập trong lòng phế nang. Ngoài ra, còn thấy xuất hiện sự hoại tử tế bào, tăng sinh tế bào xơ, phù kẽ phổi nhưng chiếm tỷ lệ thấp.
+ Gan: Gan có vị trắ xung yếu và có chức năng rất phức tạp nên nó dễ bị tổn thương, diễn biến bệnh lý của gan phụ thuộc vào thời gian của các tác nhân gây bệnh vào cơ thể. Sự tổn thương của gan tập trung vào tế bào gan như thoái hóa tế bào, thâm nhiễm tế bào viêm. Tổ chức liên kết vỏ không biến ựổi nhiều, hồng cầu xuất hiện nhiều do gan bị xuất huyết nặng.
Tế bào gan bị thoái hóa không bào, trong nguyên sinh chất có nhiều khoảng trống trắng, hậu quả của quá trình rối loạn trao ựổi protein. Chúng tôi thấy dạng thoái hóa này rất phổ biến ở tế bào gan. Ở mức ựộ nhẹ các không bào tạo ra các khoảng sáng lỗ trỗ còn nhân tế bào thường không thấy biểu hiện gì. Ở mức ựộ nặng không bào lớn chiếm gần hết dung tắch của tế bào chất, lúc này nguyên sinh chất chỉ còn các vệt dựa vào màng hoặc xung quanh nhân. Nhân tế bào bây giờ bị ảnh hưởng rõ rệt, chất nhân tiêu biến ựi, xuất hiện các khoảng không bào ở trong nhân, quan sát thấy nhân to hơn bình thường có khi chỉ còn lại vỏ nhân tròn, một số trường hợp khác là thoái hóa mỡ, trong tế bào giọt mỡ tròn sáng rõ. Loại thoái hóa này thấy nhiều, cấu trúc gan bị thay ựổi, ranh giới giữa các tế bào gan không rõ. Nhân tế bào gan không còn dạng vốn có của nó mà nó thường vỡ tan ra lẫn vào tế bào chất tạo thành một hình ảnh ựồng nhất, xem trên kắnh thấy bắt màu hồng ựều với thuốc nhuộm Eosin.
Tất cả các tiêu bản gan trong nghiên cứu của chúng tôi ựều thấy có hiện tượng thâm nhiễm tế bào viêm xuất hiện ở 15 block chiếm tỷ lệ 50%, ựặc biệt là sự thoái hóa tế bào xuất hiện ở 24 block chiếm tỷ lệ chiếm 80%.
+ Hạch ruột cũng giống như ruột, luôn là nơi chịu tác ựộng tương ựối sớm và bị ảnh hưởng lớn, bên cạnh ựó hạch ruột còn tham gia vào quá trình ựáp ứng miễn dịch nên ở cơ thể lợn bệnh bao giờ cũng có biến ựổi bệnh lý ở hạch ruột. Do vậy quá trình biến ựổi bệnh lý phức tạp hơn xảy ra hiện tượng sung huyết có 30 block chiếm tỷ lệ 100%, xuất huyết có 18 block chiếm tỷ lệ 60%, hiện tượng thâm nhiễm tế bào viêm và thoái hóa tế bào có 15 block nghiên cứu chiếm 50%.
+ Thận: Khác với gan, ngoài biến ựổi bệnh lý ở trong tế bào thận như thoái hóa, hoại tử thì còn có biến ựổi ở kẽ thận như xuất huyết có 13 block chiếm tỷ lệ 43.33% và thâm nhiễm tế bào viêm có 15 block chiếm tỷ lệ 50%. Trên một số tiêu bản nghiên cứu thấy tế bào ống thận bị hoại tử, kẽ thận xuất huyết có nhiều hồng cầu tập trung, tế bào viêm thâm nhiễm chèn ép các ống thận. Có các dạng tế bào thường gặp nhất là lympho (lymphoid), tổ chức bào (histyocyte), lâm ba cầu chất, có cả sự hoại tử tế bào nhưng xảy ra ắt.
Như vậy, biến ựổi bệnh lý vi thể chủ yếu ở lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) là xuất huyết, sung huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, hoại tử tế bào ở hầu hết các cơ quan như hạch ruột, gan, thận, phổi. Sự biến ựổi vi thể ở các cơ quan ựã tác ựộng mạnh ựến quá trình tiêu hóa, hấp thu, giải ựộc, hô hấp của cơ thể, làm ảnh hưởng ựến toàn cơ thể.
Một số hình ảnh vi thể
Ảnh 7: Sung huyết hạ niêm mạc ruột HE 10x Ảnh 8: Ruột lợn mắc PED lông nhung tù ựầu nhuộm HE 10x
Ảnh 9: Ruột thấm nước phù Ảnh 10: Ruột thâm nhiễm tế bào ở hạ niêm mạc ruột nhuộm HE 10x viêm ở hạ niêm mạc nhuộm HE 10x
Ảnh 11: Lông nhung ruột bong Ảnh 12: Lông nhung ruột tù ựầu,
tróc nhuộm HE 10x thâm nhiễm tế bào viêm ở hạ niêm mạc ruột nhuộm HE 10x
Ảnh 13: Thâm nhiễm tế bào viêm Ảnh 14: Hoại tử tế bào biểu mô ruột ở kẽ tuyến ruột nhuộm HE 20x nhuộm HE 20x
Ảnh 15: Ruột lợn thâm nhiễm tế bào Ảnh 16: Gan sung huyết, hồng cầu viêm ở hạ niêm mạc nhuộm HE 20x tràn ngập vi quản xuyên tâm HE 20x
Ảnh 17: Tế bào gan thoái hóa Ảnh 18: Sung huyết phổi nghiêm mỡ nhuộm HE 20x trọng nhuộm HE 10x
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN
Qua các kết quả nghiên cứu về tình hình mắc tiêu chảy ở lợn do virus (PED) tại 3 huyện: Tiên Du, Quế Võ, Lương Tài tỉnh Bắc Ninh, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Tỷ lệ mắc tiêu chảy do virus (PED) ở lợn nuôi tại 3 huyện thuộc tỉnh Bắc Ninh khá cao. Trong các huyện ựược ựiều tra, lợn nuôi tại huyện Lương Tài có tỷ lệ mắc (20.86%), tỷ lệ chết (12.27%), tỷ lệ tử vong 58.82% cao nhất. Ở huyện Tiên Du có tỷ lệ lợn mắc (15.66%), tỷ lệ chết (7.83%) và tỷ lệ tử vong 50% thấp nhất.
2. Tỷ lệ mắc tiêu chảy ở lợn do virus (PED) ở các lứa tuổi trong thời gian theo dõi có sự biến ựộng khác nhau. Lợn 2 tuần tuổi có tỷ lệ mắc cao nhất (24.50%) và tỷ lệ mắc giảm dần ở tuần tiếp theo.
3. Tỷ lệ mắc tiêu chảy do virus (PED) theo ựiều kiện vệ sinh thú y, có sự khác nhau rõ rệt về tỷ lệ. Chăn nuôi trong ựiều kiện vệ sinh thú y kém, tỷ lệ mắc cao (26.34%). Tỷ lệ mắc bệnh giảm ở những hộ chăn nuôi trong ựiều kiện vệ sinh thú y trung bình (18.45%). đối với ựiều kiện vệ sinh thú y tốt, tỷ lệ mắc thấp (9.57%). Vậy, lợn nuôi trong ựiều kiện vệ sinh thú y kém chủ yếu ở phương thức chăn nuôi nông hộ nhỏ lẻ có tỷ lệ mắc cao nhất, giảm dần trong chăn nuôi gia trại và trang trại có ựiều kiện vệ sinh thú y tốt hơn.
4. Số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố và tỷ khối huyết cầu của lợn mắc tiêu chảy ựều tăng so với lợn ựối chứng. Số lượng bạch cầu và tỷ lệ bạch cầu ựa nhân trung tắnh, bạch cầu ái toan tăng lên rõ rệt.
5. Khi lợn con mắc tiêu chảy do vius (PED) có triệu chứng: ủ rũ, mệt mỏi, giảm ăn, ỉa chảy, phân lỏng, mùi rất tanh, màu vàng, có sữa không tiêu, nôn mửa, thở nhanh, sâu, sút cân, gầy gò.
6. Bệnh tắch ựại thể chủ yếu bao gồm: Ruột non căng phồng, có dịch bọt màu vàng trong ruột non, dạ dày căng phồng chứa dịch sữa không tiêu, gan sưng bị thoái hóa, hạch lâm ba màng treo ruột sung huyết, xuất huyết.
7. Biến ựổi bệnh lý vi thể: Lông nhung bị phá hủy, các nang lympho ở hạ niêm mạc tăng sinh, sung huyết, xuất huyết ruột, có sự thâm nhiễm của các tế bào viêm, thoái hóa, hoại tử niêm mạc ruột. Hạch lympho xuất huyết; gan tụ huyết, thoái hóa tế bào, thận, phổi sung huyết, thoái hóa tế bào.
KIẾN NGHỊ
1. Tiếp tục nghiên cứu chi tiết ựặc ựiểm dịch tễ của lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) ựể tìm ra nguyên nhân chắnh, các thiệt hại mà bệnh gây ra.
2. Nghiên cứu sâu hơn về các khắa cạnh, nguyên nhân gây nên bệnh tiêu chảy của lợn ở từng giai ựoạn phát triển. để xây dựng hoàn thiện các quy trình phòng bệnh.
3. Tiếp tục nghiên cứu thêm về những biến ựổi ựại thể, vi thể của lợn mắc tiêu chảy do virus (PED) từ ựó có bức tranh hoàn chỉnh về tổn thương bệnh lý của lợn mắc PED.
TÀI LIỆU THAM KHẢO A. Tài liệu tiếng Việt
1. Archie. H (2000). Sổ tay dịch bệnh ựộng vật. Phạm Gia Ninh và Nguyễn đức Tâm dịch, NXB Bản ựồ, Hà Nội, tr 53, 207 - 214.
2. Vũ Triệu An (1978). đại cương sinh lý bệnh học, NXB Y học, Hà Nội. 3. Vũ Triệu An (1999). Bài giảng sinh lý bệnh, NXB Y học, Hà Nội.
4. Vũ Triệu An (2000). đại cương sinh lý bệnh gia súc, NXB Y học, Hà Nội.
5. Lê Minh Chắ (1995). Bệnh tiêu chảy ở gia súc. Hội thảo khoa học, Bộ Nông nghiệp và Công nghiệp thực phẩm, Hà Nội, tr 20-22.
6. đào Trọng đạt, Phan Thanh Phượng và Lê Ngọc Mỹ (1995). Bệnh ựường tiêu hóa ở lợn, NXB Nông Nghiệp.
7. đào Trọng đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ và Huỳnh Văn Kháng (2000). Bệnh ở lợn nái và lợn con, NXB Nông Nghiệp.
8. đoàn Kim Dung (2004). Sự biến ựộng một số vi khuẩn hiếu khắ ựường ruột, vai trò của E.coli trong hội chứng tiêu chảy của lợn con, các phác ựồ ựiều trị, Luận án tiến sỹ nông nghiệp, Hà Nội.