Hình 3. . Phổ HPLC của GO với pha động:
methanol/acetonitrile/dichloromethane/acetic acid = 50:44:3:3, đầu dò UV, 330nm. (Xu và Godber, 1999) [3]
Hình 3. . Kết quả HPLC của mẫu GO chuẩn tại bước sóng 325nm và 350nm, pha động: acetonitrile/methanol/isopropanol = 50:45:5.
Tuy trong luận văn này chỉ dừng ở mức chạy HPLC với pha động là hệ 3 dung môi, tuy nhiên với kết quả thu được dựa trên thời gian tách khác nhau và số peak thu được, so sánh với bài báo Xu và Godber (1999) cho ta kết quả tương đồng.
Các peak chính xuất hiện trong thí nghiệm của Xu và Godber:
• Peak 3: Cycloartenyl ferulate
• Peak 4: 2,4- Methylene cycloartanyl ferulate
• Peak 6: Campesteryl ferulate
• Peak 8,9: Sitosteryl ferulate và Campestanyl ferulate. (không phân tách ra 2 peak riêng biệt)
Hình 3. . Kết quả HPLC của mẫu dầu GOthô (mẫu 4) tại bước sóng 325nm và 350nm, pha động: acetonitrile/methanol/isopropanol = 50:45:5.
Kết quả mẫu GO thí nghiệm và mẫu chuẩn cho kết quả tương đồng, tuy còn có một vài peak tạp (béo) còn lẫn ở phút 2-3 nhưng ở nồng độ thấp, chiếm khoảng 2.5%.
Dựa vào biểu đồ đường chuẩn của mẫu chuẩn GO và phương pháp tính diện tích trên máy tính, ta kết luận được nồng độ các peak có trong mẫu thí nghiệm, do hàm lượng các thành phần khác nhau trong mẫu GO của từng loại cám gạo là khác nhau sự chênh lệch về nồng độ các peak không ảnh hưởng đến kết quả:
Hình 3. . Biểu đồ đường chuẩn peak 1 của mẫu chuẩn GO
Hình 3. . Biểu đồ đường chuẩn peak 2 của mẫu chuẩn GO
Hình 3. . Biểu đồ đường chuẩn peak 3 của mẫu chuẩn GO
Hình 3. . Biểu đồ đường chuẩn peak 5 của mẫu chuẩn GO
Bảng 3. . So sánh với mẫu chuẩn và kết quả nồng độ mẫu GO thô (mẫu 4).
PEAK Thoi gian Standard Dien tich Nong do (ppm)
1 16.625 16.333 139649 7.831
2 18.595 18.239 361351 8.826
3 19.649 19.257 115452 12.294
4 20.92 136121
Hình 3. . Kết quả HPLC của mẫu rắn GO thu được (mẫu 4) tại bước sóng 325nm, pha động: acetonitrile/methanol/isopropanol = 50:45:5.
Bảng 3. . So sánh với mẫu chuẩn và kết quả nồng độ mẫu GO rắn sau kết tinh (mẫu 4).
PEAK Thoi gian Standard Dien tich Nong do
1 17.014 16.625 144178 8.056 2 19.049 18.595 390206 9.488 3 20.113 19.649 94148 10.209 4 21.460 254847 5 23.009 22.462 57319 9.618 6 24.161 37912
Với mẫu dầu GO thô (mẫu 4) đo HPLC là 200µl pha loãng 5000 lần với dung môi acetonitrile: methanol (1:1); Mẫu GO rắn (mẫu 4) lấy 2mg hòa vào 10ml dung môi acetonitrile: methanol (1:1) (200ppm) kết quả thu được 1 số peak lạ có thời gian lưu 2-2.5 đã được tách khỏi mẫu GO rắn so với dịch GO thô ban đầu.