Sự thay đổi hàm lượng đường và tinh bột

Hàm lượng đường trong lá bắc ở vòng lá bắc thứ ba của phát hoa Đa Lộc giảm dần qua các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa. Điều này phù hợp với việc hô hấp tăng

mạnh qua các giai đoạn tăng trưởng. Sự tăng hô hấp đã chuyển hóa đường thành năng lượng cần thiết cho các quá trình hình thành cơ quan hoa nên đã làm giảm hàm lượng

đường đáng kể (bảng 3.7; hình 3.4).

Hàm lượng tinh bột trong lá bắc thì tăng ở giai đoạn “mở phát hoa sớm” sau đó

lại giảm khi vào giai đoạn “mở phát hoa muộn”. Sự tăng lượng tinh bột cho thấy ở giai

đoạn “mở phát hoa sớm” phát hoa vẫn còn tích lũy tinh bột để chuẩn bị cho giai đoạn “mở phát hoa sớm” bộc phát hô hấp cần nhiều năng lượng hơn (bảng 3.8; hình 3.5).

Ở giai đoạn “mở phát hoa muộn” lượng đường và tinh bột đều giảm vì cường độ

Hoàng Quốc Khánh

Bảng 3.7. Hàm lượng đường của lá bắc của phát hoa Đa Lộc ở các giai đoạn tăng trưởng trong tự nhiên

Lá bắc ở các giai đoạn tăng

trưởng của phát hoa ^{Hàm lượng đường (mg/l)} Cuối nụ phát hoa 25,74 ± 0,44^c Mở phát hoa sớm 20,33 ± 0,48^b Mở phát hoa muộn 12,84 ± 0,25^a

Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05 0 5 10 15 20 25 30

Cuối nụ phát hoa Mở phát hoa sớm Mở phát hoa m uộn

Lá bắc ở các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa

H à m l ư ợ n g đ ư ờ n g ( m g /l )

Hình 3.4. Hàm lượng đường của lá bắc của phát hoa Đa Lộc ở các giai đoạn

Hoàng Quốc Khánh

Bảng 3.8. Hàm lượng tinh bột của lá bắc của phát hoa Đa Lộc ở các giai đoạn tăng trưởng trong tự nhiên

Lá bắc ở các giai đoạn tăng

trưởng của phát hoa ^{Hàm lượng tinh bột (mg/l)} Cuối nụ phát hoa 83,92 ± 1,44^b

Mở phát hoa sớm 97,83 ± 2,38^c Mở phát hoa muộn 66,42 ± 2,63^a

Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05 0 20 40 60 80 100 120

Cuối nụ phát hoa Mở phát hoa sớm Mở phát hoa muộn

Lá bắc ở các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa

H àm l ư ợ n g t in h b ộ t (m g /l )

Hình 3.5. Hàm lượng tinh bột của lá bắc của phát hoa Đa Lộc ở các giai đoạn

Hoàng Quốc Khánh

3.7. Hoạt tính của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật

Ta nhận thấy hàm lượng auxin và giberelin giảm dần qua các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa Đa Lộc. Hàm lượng auxin và giberelin giảm đến mức thấp nhất ở giai đoạn “mở phát hoa muộn”. Auxin và giberelin phối hợp hoạt động giúp tăng chiều cao vì vậy khi hàm lượng của hai chất điều hòa này giảm thì mức độ tăng chiều cao của phát hoa cũng giảm qua các giai đoạn (bảng 3.9; hình 3.6).

Ta thấy hàm lượng AAB và zeatin tăng liên tục qua các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa Đa Lộc. Hàm lượng AAB và zeatin tăng cao nhất ở giai đoạn “mở phát hoa muộn” (bảng 3.9; hình 3.6).

Bảng 3.9. Hoạt tính của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật trong các phát hoa Đa

Lộc ở ba giai đoạn tăng trưởng.

Phát hoa ở các giai đoạn tăng trưởng

Hoạt tính tương

đương (mg/l) Cuối nụ phát hoa Mở phát hoa sớm Mở phát hoa muộn

AIA 0,42 ± 0,01^b 0,28 ± 0,02^a 0,25 ± 0,04^a

AAB 0,49 ± 0,05^a 0,70 ± 0,04^b 1,05 ± 0,02^c

GA3 0,73 ± 0,02^b 0,44 ± 0,03^a 0,40 ± 0,02^a

Zeatin 0,05 ± 0,02^a 0,22 ± 0,01^b 0,26 ± 0,02^c

Các số trung bình trong hàng với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05

Hoàng Quốc Khánh

AIA AAB GA3 Zeatin

Chất điều hòa tăng trưởng thực vật

H o ạ t tí n h t ư ơ n g đ ư ơ n g ( m g /l ) Cuối nụ phát hoa Mở phát hoa sớm Mở phát hoa muộn

Hình 3.6. Hoạt tính của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật trong các phát hoa Đa Lộc ở ba giai đoạn tăng trưởng.

3.8. Sự thay đổi màu lá bắc

Bước sóng hấp thu cao nhất của dịch trích lá bắc là 560 nm

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 Bước sóng (nm) O D ( 5 6 0 n m )

Hoàng Quốc Khánh

Màu của các mẫu lá bắc (kích thước 1,5 cm x 1,5 cm) ở vòng lá bắc thứ hai

được nuôi cấy trong erlen chứa nước cất giảm rõ rệt sau 5 ngày so với các nghiệm thức khác.

Màu của mẫu lá bắc trong môi trường ANA 1 mg/l là tốt nhất sau 5 ngày nuôi cấy. Như vậy tác dụng của auxin ngoại sinh đã đem lại hiệu quả trong việc duy trì màu sắc của lá bắc. Điều này cho thấy vai trò quan trọng của auxin trong các giai đoạn tăng trưởng của phát hoa. Sự giảm auxin nội sinh đã khảo sát ở trên là một lý do khiến phát

hoa Đa Lộc mau tàn (bảng 3.10).

Bảng 3.10. Giá trị OD (560 nm) của mẫu lá bắc ở vòng lá bắc thứ hai sau 5 ngày xử lý

Nghiệm thức OD (560 nm) Trọng lượng tươi (g) Trọng lượng khô (g) Nước cất 0,025 ± 0,004 ^a 0,83 ± 0,01 ^ab 0,042 ± 0,002 ^a BA 5 mg/l 0,036 ± 0,003 ^ab 0,83 ± 0,02 ^ab 0,043 ± 0,001 ^a BA 10 mg/l 0,044 ± 0,005 ^bc 0,88 ± 0,02 ^ab 0,043 ± 0,002 ^a BA 20 mg/l 0.050 ± 0,002 ^cd 0,87 ± 0,02 ^ab 0,042 ± 0,002 ^a ANA 0,1 mg/l 0,116 ± 0,002 ^e 0,89 ± 0,01 ^bc 0,053 ± 0,002 ^bc ANA 1 mg/l 0,131 ± 0,030 ^f 0,92 ± 0,01 ^c 0,054 ± 0,003 ^c ANA 5 mg/l 0,123 ± 0,005 ^e 0,88 ± 0,02 ^bc 0,052 ± 0,003 ^bc GA3 5 mg/l 0,032 ± 0,006 ^ab 0,81 ± 0,01 ^a 0,041 ± 0,001 ^a GA3 10 mg/l 0,050 ± 0,002 ^cd 0,92 ± 0,01 ^c 0,054 ± 0,002 ^c GA3 20 mg/l 0,058 ± 0,005 ^d 0,85 ± 0,01 ^ab 0,046 ± 0,002 ^ab

Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.11. Các mẫu lá bắc ở vòng lá bắc thứ

hai trong môi trường nước cất sau 5 ngày

Ảnh 3.12. Các mẫu lá bắc ở vòng lá bắc thứ

hai trong môi trường ANA 1 mg/l sau 5 ngày

Hoàng Quốc Khánh

3.9. Nuôi cấy invitro

Đánh giá tác động của các môi trường khác nhau trong nuôi cấy in vitro dựa vào số lá bắc héo và đường kính của phát hoa.

Trong bốn nghiệm thức thì nghiệm thức có ANA 1 mg/l cho kết quả tốt nhất với số lá bắc héo ít nhất và đường kính nhỏ nhất. Điều này một lần nữa khẳng định vai trò của auxin trong sự tăng trưởng của phát hoa (bảng 3.11; ảnh 3.13; 3.14; 3.15; 3.16). Bảng 3.11. Số lá bắc héo và đường kính của phát hoa Đa Lộc trên các môi trường khác nhau sau 30 ngày nuôi cấy.

Nghiệm thức Số lá bắc héo Đường kính của phát hoa (mm) BA 1 mg/l (đối chứng) 14,42 ± 0,65^a 17,66 ± 0,32^a

BA 1 mg/l + ANA 0,1 mg/l 4,33 ± 0,33^b 17,47 ± 0,32^a BA 1 mg/l + ANA 1 mg/l 0,34 ± 0,33^c 15,47 ± 0,26^b BA 1 mg/l + ANA 10 mg/l 4,23 ± 0,33^b 17,43 ± 0,32^a

Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05.

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.13. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “mở

phát hoa muộn” sau 30 ngày nuôi cấy trên môi

trường MS có bổ sung BA 1 mg/l.

Ảnh 3.14. Phát hoa Đa Lộc ở giai đoạn “mở phát

hoa muộn” sau 30 ngày nuôi cấy trên môi trường

MS có bổ sung BA 1 mg/l và ANA 0,1 mg/l.

17,66 mm

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.15. Phát hoa Đa Lộc ở đầu giai đoạn “mở phát

hoa muộn” sau 30 ngày nuôi cấy trên môi trường MS

có bổ sung BA 1 mg/l và ANA 1 mg/l.

Ảnh 3.16. Phát hoa Đa Lộc ở giai đoạn “mở phát hoa

muộn” sau 30 ngày nuôi cấy trên môi trường MS có

bổ sung BA 1 mg/l và ANA 10 mg/l.

15,47 mm

Hoàng Quốc Khánh

3.10. Xử lý chất điều hòa tăng trưởng thực vật trên những phát hoa Đa Lộc trong

tự nhiên ở cuối giai đoạn “nụ phát hoa”

Sau khi xử lý ANA 1 mg/l lên phát hoa Đa Lộc trong tự nhiên ở cuối giai đoạn “nụ phát hoa”, ta nhận thấy sau 28 ngày số lá bắc héo là ít nhất so với các nghiệm thức khác. Biểu hiện héo của phát hoa là các lá bắc không còn đứng thẳng mà mềm rũ, các viền lá bắc bắt đầu chuyển sang màu tím (bảng 3.12; ảnh 3.18).

Việc xử lý GA3 10 mg/l và BA 10 mg/l cũng cho kết quả tốt hơn so với phun

nước cất với số lá bắc héo ít hơn (bảng 3.12; ảnh 3.19; 3.20; 3.21; 3.22).

Bảng 3.12. Số lá bắc của phát hoa Đa Lộc trong tự nhiên ở cuối giai đoạn “nụ phát hoa” bị héo sau 28 ngày được xử lý chất điều hòa tăng trưởng thực vật và phun nước cất

Nghiệm thức Số lá bắc héo sau 28 ngày xử lý

Nước cất (đối chứng) 22,53 ± 1,23^a

ANA 1 mg/l 0,45 ± 0,33^c

GA3 10 mg/l 3,67 ± 0,66^b

BA 10 mg/l 3,25 ± 0,56^b

Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05.

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.17. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý ANA 1 mg/l vào lúc ban đầu

Ảnh 3.18. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý ANA 1 mg/l sau 28 ngày

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.19. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý GA

10 mg/l vào lúc ban đầu

Ảnh 3.20. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý GA

10 mg/l sau 28 ngày

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.21. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý BA 10 mg/l vào lúc ban đầu

Ảnh 3.22. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được xử lý BA 10 mg/l sau 28 ngày

Hoàng Quốc Khánh

Ảnh 3.23. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn “nụ

phát hoa” được phun nước cất vào lúc ban đầu

Ảnh 3.24. Phát hoa Đa Lộc ở cuối giai đoạn

“nụ phát hoa” được phun nước cất sau 28 ngày

Hoàng Quốc Khánh