2.2.6.1. Xác định đường chuẩn
Dung dịnh đường D-glucose được pha theo nồng độ 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 mg/l. Lập đường chuẩn bằng cách đo hàm lượng đường ở các nồng độ đã biết.
Cho vào mỗi ống nghiệm:
1 ml dung dịch đường đã biết nồng độ
Hoàng Quốc Khánh
5 ml dung dịch acid sulfuric đậm đặc
Lắc kỹ để yên ống nghiệm trong 15 phút, và đo OD bằng quang phổ kế ở bước sóng 490 nm.
2.2.6.2. Đo hàm lượng đường tổng số và tinh bột
Lá bắc ở vòng lá bắc thứ ba ở ba giai đoạn tăng trưởng của phát hoa Đa Lộc trong tự nhiên được dùng để đo hàm lượng đường tổng số và tinh bột theo Combs và cộng sự (1987).
Nghiền 1 gam vật liệu tươi với 20 ml cồn 960, đun sôi cách thủy 15 phút, lọc lấy phần dịch. Giữ phần bã trong cốc và tiếp tục trích hai lần với 20 ml cồn 960 và hai lần với cồn 800. Hòa chung các dịch lọc với nước cất theo tỷ lệ nhất định để đo hàm lượng
đường bằng quang phổ kế ở bước sóng 490 nm. So sánh với đường chuẩn D-glucose để suy ra lượng đường trong mẫu.
Sau khi ly trích đường, sấy khô phần bã còn lại để đo hàm lượng tinh bột. Phần tinh bột trong bã được thủy phân bằng cách thêm nước cất và acid percloric (HClO4) 9,2 N theo tỷ lệ 1:1 vào phần bã khô và đun cách thủy 30 phút. Sau khi đun, hòa thêm
nước cất, để nguội và lọc lấy phần dịch. Phần bã còn lại tiếp tục trích hai lần với acid percloric (HClO4) 9,2 N và hai lần với acid percloric (HClO4) 4,6 N. Thu dịch lọc tổng cộng, hòa chung với nước cất theo tỷ lệ nhất định để đo hàm lượng tinh bột. Xác định
hàm lượng tinh bột thông qua lượng đường trong dịch trích dựa theo đường chuẩn glucose với hệ số chuyển đổi giữa tinh bột và đường là 0,9.