Câc phương phâp nghiín cứu tính thấm

Một phần của tài liệu giáo trình lý sinh học (Trang 48)

Tính thấm của tế băo vă mô lă khả năng cho câc chất đi qua măng tế băo không có tính chọn lọc (vận chuyển thụđộng) hoặc có tính chọn lọc (vận chuyển chủđộng). Để nghiín cứu tính thấm của tế băo, câc nhă khoa học thường sử dụng câc phương phâp sau:

- Phương phâp thể tích: Theo dõi thể tích của tế băo ở trạng thâi sinh lý bình thường vă thể tích của tế băo khi ở dung dịch nhược trương. Tùy mục đích vă điều kiện thiết bị mă sử dụng câc phương phâp:

* Ly tđm huyền dịch tế băo sau đó xâc định thể tích của chúng bằng hồng cầu kế. * Xâc định sự thay đổi độ trong suốt của tế băo bằng phương phâptrắc quang.

*Xâc định sự thay đổi chiết xuất của tế băo. Phương phâp thể tích chỉ có thể âp dụng để

nghiín cứu những đối tượng có kích thước lớn vă có độ bền cao trong dung dịch như tảo hay hồng cầu. Ví dụ như theo dõi tính thấm của mô cơ ếch đối với nước bằng phương phâp trọng lượng (xem thực hănh Lý sinh).

- Phương phâp sử dụng chất mău vă chất chỉ thị mău: phương phâp năy được tiến hănh bằng câch quan sât trực tiếp dưới kính hiển vi quâ trình tích luỹ câc chất có mău văo trong tế băo. Câc chất chỉ thị mău được sử dụng để nghiín cứu tốc độ thấm của câc loại axit vă kiềm khâc nhau văo trong tế băo. Nhược điểm của phương phâp năy lă khi dùng câc chất mău vă chỉ thị mău có nồng độ thấp thì khó phât hiện còn dùng nồng độ cao thì chúng trở thănh những độc tốđối với tế băo. Khi sử dụng phương phâp năy cần lưu ý câc chất có mău vă chỉ thị mău vừa phụ thuộc văo mức độ thấm của chúng văo trong tế băo lại vừa phụ thuộc văo khả năng liín kết của chúng với câc phđn tử Protein, axit amin vă câc phđn tử khâc ở trín măng hay ở trong tế băo. Ví dụ như sử dụng Xanhmetylen lă một chất có mău để nghiín cứu tính thấm một chiều của da ếch (xem thực hănh Lý sinh).

- Phương phâp phđn tích hoâ học: Đđy lă phương phâp phđn tích hoâ học câc chất có nồng độ rất nhỏở trong tế băo. Tuy nhiín với đối tượng nghiín cứu nhỏ như tế băo lại có thănh phần hoâ học phức tạp thì việc định lượng một chất năo đó lă rất khó khăn. Nhưng hiện nay đê có những thiết bị phđn tích hiện đại như mây quang phổ huỳnh quang, mây quang phổ hấp thụ nguyín tử, mây quang kế ngọn lửa... có thể xâc định chính xâc nồng

độ chất cần nghiín cứu ở nồng độ rất nhỏ. Phương phâp phđn tích hoâ học được sử dụng rất rộng rêi trong nhiều lĩnh vực trong đó có nghiín cứu tính thấm của tế băo vă mô. Ví dụ như xâc định nồng độ natri (Na) bằng mây quang phổ hấp thụ nguyín tử cho kết quả

rất chính xâc.

- Phương phâp dùng câc chất đồng vị phóng xạ đânh dấu: Trong hoâ học, ngoăi nguyín tố bình thường như Hydro (ký hiệu lă 11H) còn có nguyín tố phóng xạ như tritium (ký hiệu lă 31H). Nguyín tố tritium khâc nguyín tố Hydro ở chỗ trong hạt nhđn nguyín tử có thím hai hạt notron (n) không mang điện tích (gọi lă trung hoă điện). Chất phóng xạ lă nó luôn phât ra câc hạt có mang điện tích hoặc câc hạt không mang điện tích vă chính câc hạt khi phât ra nhờ mây đo sẽ xâc định được chất có gắn chất phóng xạ. Phương phâp sử

dụng chất phóng xạđânh dấu cho phĩp nghiín cứu tính thấm của tế băo vă mô trong một cơ thể hoăn chỉnh (invivo) vă còn dùng để nghiín cứu tiến triển của quâ trình chuyển hoâ

phóng xạ (2758Co) thay cho Coban bình thường (5927Co) để tổng hợp nín Vitamin B12, sau đó nghiín cứu quâ trình hấp thụ B12 của cơ thể sống trong khoảng thời gian xâc định.

Một phần của tài liệu giáo trình lý sinh học (Trang 48)