3.1. Ch n các thông s cho máy hplcọ ố
3.1.1.Ch n van b m m uọ ơ ẫ
Van b m m u l m t d ng c ơ ẫ à ộ ụ ụ để đưa m t lộ ương m u chính xácẫ
m u phân tích v o c t s c ký thơng qua vịng m u . Vòng m u l m t y uẫ à ộ ắ ẫ ẫ à ộ ế
t xác nh có th thay ố đị ể đổ đượi c thay đổ đượi c, tu theo lỳ ượng m u taẫ
c n b m. . Vòng m u c ng l ngun nhân gây ra s dỗng píc.ầ ơ ẫ ũ à ự
Nói chung s dỗng píc s c ký ngo i các y u t v i u ki n táchự ắ à ế ố à đ ề ệ
trong c t s c ký quy t nh cịn có các y u t khác c ng thêm v o nh vanộ ắ ế đị ế ố ộ à ư
b m m u, detecter h th ng ng d n....... Nên ơ ẫ ệ ố ố ẫ độ ộ r ng t ng c ng c a picổ ộ ủ
s c kí s do các y u t n y gây nên . Các y u t n y l nh ng y u tắ ẽ ế ố à ế ố à à ữ ế ố
không mong mu n . N u lo i tr nh ng y u t n y hay ch n ố ế ạ ừ ữ ế ố à ọ đượ đ ềc i u ki n thích h p ệ ợ để cho nó khơng b thay ị đổ ài v có giá tr nh nh t , nhị ỏ ấ ư
v y chúng ta m i có hi u su t tách t t , v píc s c ký m i ph n ánhậ ớ ệ ấ ố à ắ ớ ả
úng q trình tách trong c t s c kí. Theo tác gi Ph m Lu n [3] . th nh
đ ộ ắ ả ạ ậ à
ph n n y không ầ à được chi m h n 10% trong t ng ế ơ ổ độ ộ r ng c a píc s c kí.ủ ắ
V i m t th tích m u nh t nh nh h n th tích vớ ộ ể ẩ ấ đị ỏ ơ ể 0, thì khi m uẫ
c b m v o c t t ng thì chi u cao c a pic s c kí c ng t ng m t cách
đượ ơ à ộ ă ề ủ ắ ũ ă ộ
tuy n tính. N u lế ế ượng m u n p v o c t vẫ ạ à ộ s l n h n so v i vớ ơ ớ 0 thì chi uề
cao c a píc khơng t ng tuy n tính v i lủ ă ế ớ ượng m u m ẫ à độ ộ r ng c a picủ
t ng nhanh (dỗng píc).ă
Trong th c t phân tích HPLC, ngự ế ười ta thường b m m t lơ ộ ượng m u nh h n vẫ ỏ ơ 0.
có hi u qu tách cao nh t h van 6 chi u ng y nay có th b m
Để ệ ả ấ ệ ề à ể ơ
m u tr c ti p b ng micro-xylanh theo th tích m u mong mu n , khiẫ ự ế ằ ể ẫ ố
lượng m u nh h n kích thẫ ỏ ơ ước vịng m u thì van n y c ng r t thu n ti nẫ à ũ ầ ậ ệ
vì ta khơng ph i pha lỗng m u.ả ẫ
Trong ph n th c ngi m n y, chúng tôi ch n lo i van b m m u 6ầ ư ệ à ọ ạ ơ ẫ
chi u v vòng m u lo i 20ề à ẫ ạ µl, để ạ n p m u v o c t tách v i th tích m uẫ à ộ ớ ể ẫ
chính xác l 20à µl cho m i l n s c kí.ỗ ầ ắ
3.1.2 . i u kiên ghi pic s c kíĐ ề ắ .
ghi nh n v theo dõi k t qu c a s tách s c kí , chúng tơi ã
Để ậ à ế ả ủ ự ắ đ
dùng máy t ghi ự để ghi l i s c ạ ắ đồ tách d ng các pic s c kí , vì th c nở ạ ắ ế ầ