1. 2.1 Protease và cơ chế phản ứng thủy phân:
2.2.3.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân thích hợp đố
Tiến hành:
- Thủy phân giai đoạn đầu bằng enzyme Protamex: Ta tiến hành cân chính xác 100 (g) nguyên liệu và cho vào cốc 250ml, các cốc được đánh số thứ tự từ (1) đến (5). Tiến hành thủy phân với các thông số: Tỷ lệ Enzyme/NL thích hợp, tỷ lệ nước/NL: 30%, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên, thời gian thủy phân thích hợp.
- Thủy phân giai đoạn sau bằng enzyme Flavourzyme: sau khi lần thủy phân giai đoạn 1 xong ta tiến hành bất hoạt enzyme protamex ở nhiệt độ 900C trong thời gian 15 phút. Sau khi đã bất hoạt enzyme protamex xong và chờ nhiệt độ hỗn hợp đạt khoảng 500C ta tiến hành thủy phân ở các thông số: Tỷ lệ enzyme/NL thích hợp, thời gian 3 giờ, pH tự nhiên, nhiệt độ thủy phân: 400C, 450C, 500C, 550C và 600Ctương ứng vào các cốc được đánh số thứ tự từ (1) đến (5)
- Bất hoạt enzyme: sau khi thủy phân giai đoạn 2 xong ta tiến hành bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong thời gian 15 phút.
- Lọc: Dịch thủy phân được lọc qua ray lọc, mục đích tách phần bã lọc(xương, vãy…) ra khỏi dich lọc
- Ly tâm: Dùng máy ly tâm để ly tâm dịch lọc, ta tiến hành ly tâm ở 5000(V/P) trong thời gian 30 phút, ở nhiệt độ thường. Sau khi ly tâm tách riêng dịch đạm thủy phân protein và phần cặn ly tâm.
- Xác định các thông số: Dịch đạm thủy phân protein được đem đi phân tích xác định hiệu suất thu hồi nito, hàm lượng Nitơ acid amin, hàm lượng ammoniac.
* Từ đó chọn nhiệt độ thủy phân thích hợp đối với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân
2.2.3.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân thích hợp đối với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân. với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân.
Hình 2.9: Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân thích hợp đối với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân.
Nguyên liệu đã làm nhỏ, đem đông lạnh Rã đông Mẫu3: 3giờ Mẫu2: 2 giờ Mẫu1: 1giờ Mẫu4: 4giờ Mẫu5: 5giờ Mẫu6: 6giờ Bất hoạt enzyme Lọc tách xương Ly tâm
Xác định hiệu suất thu hồi nito,
Nito axid amin, Nito amoniac.
Xác định thời gian thủy phân
enzyme Flavourzyme thích hợp.
Cặn ly tâm
Thủy phân bằng enzyme protamex, tỷ lệ
enzyme/NL thích hợp, nước/NL= 1:3, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên, thời
gian thủy phân thích hợp.
Thủy phân bằng enzyme Flavouyme, tỷ lệ
enzyme/NL thích hợp, nhiệt độ thủy phân
thích hợp,pH tự nhiên, thời gian thủy phân:
Dịch đạm thủy phân protein
Phần bã lọc
* Thuyết minh quy trình:
Mục đích: Bố trí thí nghiệm nhằm xác định thời gian thủy phân thích hợp đối với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân nhằm nâng cao chất lượng dịchđạm thủy phân protein
Tiến hành:
- Thủy phân giai đoạn đầu bằng enzyme Protamex: Ta tiến hành cân chính xác 100 (g) nguyên liệu và cho vào cốc 250ml, các cốc được đánh số thứ tự từ (1) đến (6). Tiến hành thủy phân với các thông số: Tỷ lệ Enzyme/NL thích hợp, tỷ lệ nước/NL: 30%, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên, thời gian thủy phân thích hợp.
- Thủy phân giai đoạn sau bằng enzyme Flavourzyme: sau khi lần thủy phân giai đoạn đầu xong ta tiến hành bất hoạt enzyme protamex ở nhiệt độ 900C trong thời gian 15 phút. Sau khi đã bất hoạt enzyme protamex xong và chờ nhiệt độ đỗn hợp đạt khoảng 500C ta tiến hành thủy phân ở các thông số: Tỷ lệ enzyme/NL thích hợp, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên, thời gian thủy phân: 1 giờ, 2 gờ, 3 giờ, 4 giờ, 5 giờ và 6 giờ tương ứng vào các cốc được đánh số thứ tự từ (1) đến (6)
- Bất hoạt enzyme: sau khi thủy phân giai đoạn 2 xong ta tiến hành bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong thời gian 15 phút
- Lọc: Dịch thủy phân được lọc qua ray lọc, mục đích tách phần bã lọc(xương, vãy…) ra khỏi dich dịch lọc
- Xác định các thông số: Dịch đạm thủy phân được đem đi phân tích xác định hàm lượng nitơ tổng số, nitơ acidamin, xác đinh giá trị hiệu suất thu hồi Nito.
* Từ đó, chọn thời gian thủy phân thích hợp đối với enzyme Flavourzyme cho quá trình thủy phân