- Pratylenchus coffeae: Phân bố rộng khắp thế giới Gây hại nghiêm trọng ở cà phê, chuối, các cây họ cam chanh và nhiều loài cây trồng khác Ở nước ta,
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5.8 Thử nghiệm tính ñối kháng của một số chủng nấm có tính ñối kháng cao trong ñiều kiện nhà lướ
cao trong ñiều kiện nhà lưới
* Chuẩn bị thí nghiệm:
- Đất ñược xử lý bằng cách trải mỏng, phơi nắng trong 3- 5 ngày ñể tiêu diệt bớt vi sinh vật (ñể tăng ñộ thông thoáng cho ñất có thể trộn với tỷ lệ 2 phần ñất + 1 phần cát + 1 phần hữu cơ sạch), cho vào các chậu bằng nhựa PE có kích thước 20cm X 20cm, trồng 8-10 cây cà phê/chậu. Chăm sóc và nuôi dưỡng cà phê cho tới giai ñoạn cây ñược 2 lá thật thì sử dụng làm thí nghiệm.
- Chuẩn bị tuyến trùng: ly trích tuyến trùng từ vỏ quả ñậu phộng và rễ cà phê ñem nhân nuôi và giữ làm thí nghiệm.
- Chuẩn bị nấm ký sinh: nhân nuôi nấm trên môi trường cấp 1 và cấp 2, sử dụng nấm ở môi trường nhân nuôi cấp 2 ñể làm thí nghiệm.
- Phương pháp lây bệnh nhân tạo: Lây bệnh nhân tạo bằng cách tưới dịch tuyến trùng ñã ly trích vào các chậu cây cà phê con, sau ñó tưới nguồn nấm ký sinh ñã sàng lọc ñược vào các chậu này.
- Theo dõi khả năng gây bệnh của tuyến trùng cho cây cà phê con và ñánh giá khả năng ñối kháng và ký sinh của nấm dựa vào mức ñộ gây hại và chỉ tiêu sinh trưởng của cây.
* Sơ ñồ bố trí thí nghiệm: các công thức thí nghiệm như sau. STT Công thức Ký hiệu Thành phần Cách xử lý
1 Công thức 1 CT1 ĐC Không xử lý tuyến trùng và nấm
2 Công thức 2 CT2 TT Xử lý tuyến trùng không xử lý nấm
3 Công thức 3 CT3 TT + C07
Pratylenchus coffeae lây trước 2 tuần, sau ñó lây
C07
4 Công thức 4 CT4 TT + T7 Pratylenchus coffeae lây trước 2 tuần, sau ñó lây T7
5 Công thức 5 CT5 C07 Tưới nấm C07
6 Công thức 6 CT6 T7 Tưới nấm T7
Tổng số cây thí nghiệm: 6 CT x 10 cây/ CT x 5 lần nhắc lại = 300 cây. Chủng nấm T7 và C7 với lượng bào tử 109 bào tử/ ml.
Mật ñộ tuyến trùng chủng vào ñất: 1000 -> 1200 con/ kg ñất.
* Chỉ tiêu theo dõi: Quan sát, ñánh giá khả năng ñối kháng của nấm với tuyến trùng thông qua các chỉ tiêu sinh trưởng và phát triển, chỉ số bệnh của cây cà phê con.
+ Chỉ tiêu sinh trưởng:
- Chiều cao cây (cm) sau khi xử lý chủng nấm 2, 4, 6, 8 tuần. - Chiều dài rễ (cm) sau khi xử lý chủng nấm 2, 4, 6, 8 tuần.
- Trọng lượng tươi và khô của cây sau khi xử lý chủng nấm 2, 4, 6, 8 tuần. - Trọng lượng tươi và khô của rễ sau khi xử lý chủng nấm 2, 4, 6, 8 tuần. + Chỉ số bệnh:
- Tỷ lệ % rễ cây bị nhiễm tuyến trùng ở mỗi công thức thí nghiệm. - Số lượng tuyến trùng/50g ñất.
- Số lượng tuyến trùng/5g rễ cây cà phê. * Phương pháp theo dõi:
- Chiều cao cây (cm):. - Số lá.
- Tỷ lệ % rễ cây bị nhiễm tuyến trùng: số rễ bị hại/tổng số rễ ñược ñếm. - Mật ñộ tuyến trùng Pratylenchus spp. trong ñất: Đếm số lượng tuyến trùng có trong 50g ñất/1 CT.