4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
1.2.1.Khái niệm
Vector tách dòng còn gọi là phƣơng tiện vận chuyển gen. Vector tách dòng thƣờng là các phân tử ADN có kích thƣớc nhỏ, cho phép cài (gắn) các gen cần thiết, có khả năng tái bản không phụ thuộc vào sự phân chia của tế bào. Vector tách dòng phải có khả năng tồn tại trong tế bào vật chủ qua nhiều thế hệ, ít gây biến đổi bộ gen của tế bào vật chủ. Các vector tách dòng phải mang các gen ”tín hiệu” để dễ dàng nhận biết các tế bào mang vector tái tổ hợp.
Mục đích của việc tách dòng là để thu nhận đƣợc gen hay một trình tự ADN tinh sạch với hàm lƣợng lớn.
Vector tách dòng có 3 đặc tính cơ bản: Có khả năng xâm nhập vào tế bào.
Có điểm mở đầu để tái bản, tức là có khả năng tái bản tích cực, không phụ thuộc vào sự sao chép của bộ gen tế bào chủ.
Các thể biến nạp phải dễ dàng đƣợc chọn lọc và sinh trƣởng tốt trên môi trƣờng đặc. Khả năng chọn lọc đƣợc mã hóa bởi các gen chọn lọc, thƣờng có đặc tính kháng với chất kháng sinh.
Ngoài ra, vector tách dòng sẽ đƣợc xem là càng mạnh khi có thêm các ƣu điểm sau đây:
Có kích thƣớc nhỏ để có thể thu nhận đƣợc tối đa lƣợng ADN, dễ xâm nhập vào tế bào vi khuẩn và sao chép nhanh.
Tồn tại đƣợc qua nhiều thế hệ trong tế bào vi khuẩn và ít gây xáo trộn đối với quá trình trao đổi chất của tế bào chủ.
Mang các vị trí nhận biết duy nhất của nhiều loại enzyme giới hạn và vị trí đó nằm trong các gen chọn lọc.
Trong số các loại vector hiện có thì plasmid đƣợc sử dụng phổ biến nhất do dễ dàng nhân lên trong tế bào vi khuẩn và có kích thƣớc nhỏ (1kb - 200kb). Các thế hệ plasmid ngày càng đƣợc cải tiến và mang các đặc tính mới, tạo điều kiện thuận lợi cho việc tách dòng.