Phụi đƣợc thu hoạch bằng phƣơng phỏp khụng phẫu thuật vào ngày thứ 7 sau khi phối giống. Ứng với giai đoạn phụi dõu và phụi nang.
PMSG CIRD 5 ml Oestradiol Ngày 1 5 9 12 13 15 Theo dừi động dục phối giống 21 Thu phụi PGF2α Rỳt CIRD
Đõy là giai đoạn của phụi thớch hợp cho việc, bảo quản và cấy truyền phụi.
a. Chuẩn bị thu phụi
- Kiểm tra lại tất cả cỏc dụng cụ cần thiết cho quỏ trỡnh giội rửa. - Đƣa bũ vào giỏ cố định tại địa điểm chuẩn bị sẵn, chỳ ý để hai chõn trƣớc cao hơn hai chõn sau, để tạo điều kiện dễ dàng khi thao tỏc.
- Khỏm và xỏc định vị trớ, hỡnh dỏng, kớch thƣớc (đặc biệt là độ dài) của tử cung trong cơ thể bũ. Xỏc định số lƣợng thể vàng và nang trứng trờn buồng trứng.
- Dung dịch dội rửa 1.000ml/bũ (500ml/1 sừng tử cung) đó đƣợc chuẩn bị sẵn, đƣợc ngõm hoặc giữ ấm 370C. Nối cỏc hệ thống ống catheter vào bỡnh chứa dung dịch thu phụi PBS, dung dịch dộii rửa với bỡnh chứa (thụng thƣờng dựng bỡnh 500ml cho 1 sừng tử cung).
- Vệ sinh cho bũ, đặc biệt là phần õm hộ, hậu mụn, đuụi.
- Tiờm phong bế gõy tờ vựng đuụi bằng novocain để giảm bớt sự co thắt của trực tràng, bộ phận sinh dục và sự vận động của bũ.
b. Tiến hành thu phụi
- Lau khụ, sạch õm hộ bũ, sau đú lau lại bằng cồn 700, nhẹ nhàng đƣa catherter vào, qua õm đạo, cổ tử cung đến sừng tử cung cỏch ngó ba từ 3-5cm. Sau đú bơm 20-25ml khụng khớ vào búng khớ nhằm cố định catherter trong tử cung. Sau khi đó cố định catherter trong sừng tử cung cỏch ngó ba từ 3-5cm, nối catherter với hệ thống ống cho dung dịch dội rửa vào và ra. Tiến hành đúng khoỏ dung dịch chảy ra, mở khoỏ chảy vào cho dung dịch chảy tới sừng tử cung, khi sừng tử cung đó đầy dung dịch, đúng khoỏ vào và xoa nhẹ nhàng sừng tử cung để phụi và cỏc nang trứng ra ngoài đƣợc dễ dàng hơn sau đú mở khoỏ ra, dung dịch chảy ra sẽ đƣợc hứng vào bỡnh thu phụi. Lƣợng dung dịch mỗi lần vào và ra khoảng 20-50ml, tuỳ kớch thƣớc tử cung và vị trớ búng khớ. Lặp lại 8-10 lần, lƣợng dung dịch dội rửa chảy vào và ra cho mỗi sừng khoảng 400-500ml, cú thể dựng bơm tiờm bơm 20-30ml dung dịch vào, sau khi xoa nhẹ sừng tử cung, nƣớc sẽ tự chảy ra hoặc ta hỳt ra.
- Sau khi đó giội rửa xong một bờn sừng tử cung, rỳt catherter ra ngoài và tiến hành thu phụi với sừng thứ hai nhƣ sừng trƣớc.
- Sau khi lấy phụi tiờm 25mg PGF2α vào bũ cho phụi nhằm phỏ thể vàng để bũ nhanh chúng trở lại chu kỳ động dục mới, và thụt vào tử cung một lƣợng dung dịch Lugol 1% để chống viờm nhiễm, giỳp tử cung nhanh chúng trở lại bỡnh thƣờng.
c. Soi tỡm phụi, đỏnh giỏ phõn loại phụi
Sau khi giội rửa, dung dịch thu phụi nhanh chúng đƣợc đƣa về lọc qua cốc lọc phụi và soi tỡm phụi. Phụi đƣợc tỡm dƣới kớnh hiển vi soi nổi cú độ phúng đại từ 12-24 lần. Nhƣng để đỏnh giỏ, phõn loại chớnh xỏc, phụi cần phải đƣợc phúng đại > 64 lần. Phụi đƣợc đỏnh giỏ theo giai đoạn phỏt triển (phụi 2, 4, 8, 16 tế bào, phụi dõu, phụi nang) và chất lƣợng nhƣ loại A, B, C và D theo mức độ tốt xấu của phụi.