định lƣợng của phƣơng phỏp
2.2.2.1. Đỏnh giỏ độ đỳng của phộp đo
Dung dịch vitamin C chuẩn được pha chế bằng cỏch: cõn chớnh xỏc trờn cõn phõn tớch 0,5015 g vitamin C của Mecrk (M= 176,13; độ tinh khiết 99,7%), hũa tan trong bỡnh định mức 500 mL bằng một lượng nước cất siờu sạch, lắc đều cho vitamin C tan hết rồi định mức bằng nước cất siờu sạch đến vạch định mức ta được dung dịch vitamin C cú nồng độ1000mg/L. Cỏc dung dịch cú nồng độ nhỏ hơn được pha chế từ dung dịch này.
Để đỏnh giỏ độ đỳng của phộp đo, chỳng tụi tiến hành phõn tớch mẫu chuẩn của vitamin C với giỏ trị nồng độ là 50 ppb trong cỏc điều kiện tối ưu đó khảo sỏt được. Mẫu được xỏc định bằng phương phỏp thờm chuẩn, mỗi lần thờm 0,025 mL dung dịch vitamin C 50 ppm.
2.2.2.2. Đỏnh giỏ độ chụm của phộp đo
Để đỏnh giỏ độ chụm của phộp đo chỳng tụi tiến hành ghi đo đường Von- Ampe hoà tan anot của dung dịch vitamin C chuẩn 50 ppb trong cỏc điều kiện tối ưu đó khảo sỏt, chuẩn bị và lặp lại phộp đo 10 lần với 10 mẫu như nhau.
*Phương sai :
Phương sai được tớnh theo cụng thức (2.1) khi số giỏ trị thực nghiệm khi n 30 (một số tài liệu tớnh khi n 20):
n 1 i 2 i 2 X x k 1 S (2.1) Trong đú: S2
là phương sai của đại lượng ngẫu nhiờn X
X là giỏ trị trung bỡnh cộng của đại lượng ngẫu nhiờn X xi là giỏ trị của X ở lần đo thứ i (i = 1 n).
n là số giỏ trị của đại lượng ngẫu nhiờn X.
k là số bậc tự do. Khi n 30 (một số tài liệu tớnh khi n 20) k= n-1
* Độ lệch chuẩn
Độ lệch chuẩn của một tập số liệu là giỏ trị căn bậc hai trị số phương sai của nú theo cụng thức (2.2):
S = s2 (2.2)
Trong đú: S là độ lệch chuẩn của đại lượng ngẫu nhiờn X.
* Độ sai chuẩn (độ lệch chuẩn của giỏ trị trung bỡnh)
Độ sai chuẩn bằng độ lệch chuẩn chia cho căn bậc hai của số giỏ trị kết quả thực nghiệm.
n S
sX (2.3) Trong đú: S là độ lệch chuẩn của đại lượng ngẫu nhiờn X
n là số giỏ trị của đại lượng ngẫu nhiờn X
* Khoảng chớnh xỏc tin cậy
Khoảng chớnh xỏc tin cậy được tớnh theo cụng thức (2.4): X( ,k) = X- = t( ,k). SX (2.4)
Trong đú: X( ,k) là khoảng chớnh xỏc tin cậy là độ tin cậy thống kờ
k là số bậc tự do của tập số liệu thực nghiệm
X
S là độ sai chuẩn
*Sai số tương đối
xi X xi μ xi μ
ε .100 .100 = .100
μ
X X (2.5)
Trong đú: là sai số tương đối của đại lượng ngẫu nhiờn X.
xi là giỏ trị thứ i của đại lượng ngẫu nhiờn X ( i = 1 n).
X là giỏ trị trung bỡnh cộng của đại lượng ngẫu nhiờn X. là giỏ trị thực của đại lượng ngẫu nhiờn X.
2.2.2.3. Giới hạn phỏt hiện (Limit of Detection - LOD) Cú 2 cỏch tớnh LOD, cụ thể là:
+ Cỏch 1: Tiến hành thớ nghiệm để lập phương trỡnh đường chuẩn, từ đú xỏc định Sy (độ lệch chuẩn của tớn hiệu y trờn đường chuẩn) và chấp nhận Sy = Sb. Như vậy GHPH là nồng độ của chất phõn tớch cho tớn hiệu bằng 3Sy. Từ phương trỡnh đường chuẩn tớnh được nồng độ của chất phõn tớch. Cỏch này cú thể tiến hành nhanh nhưng khụng thật chớnh xỏc vỡ đó chấp nhận sự phụ thuộc của tớn hiệu vào nồng độ mà thụng thường cỏc đường chuẩn lập ra thường cú khoảng nồng độ cỏch xa GHPH.
+ Cỏch 2: Tiến hành n thớ nghiệm xỏc định nồng độ mẫu chuẩn, thu được cỏc giỏ trị ybi (i = 1, 2,..., n), từ đú tớnh toỏn cỏc đại lượng giỏ trị trung bỡnh X , độ lệch chuẩn Svà GHPH theo cỏc cụng thức: X = n ybi (2.6) S= 1 ) ( 2 n bi X y (2.7) Trong đú: n là số lần đo n-1 là số bậc tự do.
Nếu nồng độ mẫu chuẩn là C thỡ GHPH được tớnh theo cụng thức (2.8)
LOD = X S C. . 3 (2.8)
2.2.2.4. Giới hạn định lượng (Limit Of Quantity - LOQ):
Giới hạn định lượng được xem là nồng độ thấp nhất của chất phõn tớch mà hệ thống định lượng được với tớn hiệu phõn tớch khỏc cú ý nghĩa định lượng với tớn hiệu mẫu trắng (hay tớn hiệu nền) và đạt độ tin cậy 95%. Thường người ta chấp nhận tớnh giới hạn định lượng theo cụng thức (2.9):
LOQ = B S . 10 3 LOD (2.9)
B là độ dốc của đường chuẩn, cũng chớnh là độ nhạy của phương phỏp. S là độ lệch chuẩn của tớn hiệu y trờn đường chuẩn
Giới hạn định lượng bằng 3 lần giới hạn phỏt hiện hoặc bằng 9 lần độ chờnh lệch chuẩn của mẫu trắng.