Trên cơ sở các điều kiện tối ƣu đã khảo sát, từ các kết quả thực nghiệm thu đƣợc chúng tôi đề xuất quy trình phân tích các đồng loại WHO-PCB trong mẫu môi trƣờng nhƣ sau:
57
Mẫu nước: Đong 4 lít mẫu nƣớc vào bình, thêm dung dịch chuẩn 13C-PCB. Khuấy đồng thể 3 lần, mỗi lần 150 ml DCM, thời gian khuấy 5 phút, tốc độ khuấy 8.000 vòng/phút. Để tách lớp hoàn toàn, hút lấy phần dung môi DCM vào phễu chiết. Dung môi chiết cho chảy qua phễu lọc chứa Na2SO4 để làm khan vào bình tam giác. Lọc gạn dịch chiết qua giấy lọc vào bình quả nhót, tráng 2 lần, mỗi lần 5 ml n- hexan, dịch chiết thu đƣợc cất quay chân không đến 1 ml.
Mẫu đất, trầm tích: Cân 20 g mẫu, gói trong giấy lọc, đặt vào ống chứa mẫu của bộ soxlet. Thêm dung dịch chuẩn 13C12-PCB. Đong 130 ml dung môi toluen vào bình cầu 250 ml, thêm vài viên đá bọt, chiết soxlet trong 10 giờ với chu kỳ chảy tràn dung môi 5 - 10 lần/giờ. Dịch chiết thu đƣợc, gạn lọc vào bình quả nhót, tráng bình cầu, phễu và giấy lọc 2 lần, mỗi lần 5 ml n-hexan, cất quay chân không dịch chiết thu đƣợc đến 1 ml.
Làm sạch sơ bộ: Dịch cô mẫu sau phân đoạn tách chiết đƣợc bổ sung 80 ml n-hexan và làm sạch sơ bộ lần lƣợt bằng H2SO4 96%, NaCl 5%; KOH 17%; Làm khan bằng Na2SO4 để loại nƣớc trong ít nhất 2 giờ.
Cột đa lớp, cột nhôm ôxít: Cho dịch chiết sau làm sạch qua cột “đa lớp” (Na2SO4 (1 cm)/ SiO2 tẩm KOH (2-3 cm)/ 3 lớp ((Na2SO4 (1 cm)/ SiO2 tẩm H2SO4 (5-7cm)). Rửa giải bằng 100 ml n-hexan, cô dung dịch sau cột đến 30 ml. Qua cột nhôm ôxít (4g), các đồng loại WHO-PCB sẽ đƣợc rửa giải bằng 30 ml hexan : diclometan (95:5).
Phân tích trên GC/MS: Cô dung dịch sau cột nhôm ôxít đến 2 ml; chuyển sang ống nghiệm nhọn đáy, làm bay hơi dung môi, rửa ống nhọn đáy 2 lần, mỗi lần 50µl n- hexan, để bay hơi đến vạch định mức 20µl, bơm 1,0 µl lên GC/MS.
Sơ đồ quy trình phân tích 12 chất đồng loại WHO-PCB trong mẫu đất trầm tích, nƣớc đƣợc chỉ ra ở hình 3.7.
58 Hình 3.7. Sơ đồ quy trình phân tích WHO-PCB trong đất, trầm tích, nƣớc
CHUẨN BỊ SƠ BỘ MẪU
(phơi, nghiền, xác định trọng lƣợng khô, bảo quản...)
MẪU ĐẤT, TRẦM TÍCH
Chiết Soxlet
THÊM CHẤT NỘI CHUẨN
13C12- PCB
Gạn lọc, làm khan bằng Na2SO4 cô quay, tách lấy dung dịch chiết mẫu
Chuyển dung môi thành n- Hexan
LÀM SẠCH MẪU
Dung dịch H2SO4, NaCl, KOH Làm khan bằng Na2SO4 Cột sắc ký “đa lớp” Cột nhôm oxit
Tách lấy phân đoạn PCB Cô đuổi, bay hơi dung môi đến 20µl
MẪU NƢỚC
Khuấy đồng thể
PHÂN TÍCH TRÊN GC/MS
59