Hoạt tính chống ung thƣ của các dịch chiết đƣợc sàng lọc trên dòng ung thƣ vú (MCF-7) và ung thƣ gan (SK-Hep-1) ở ngƣời
76
3.3.1.Kết quả sàng lọc trên dòng ung thƣ gan ngƣời SK-Hep-1 và ung thƣ vú MCF-7
Trên hai phép thử khá phổ biến sàng lọc hoạt chất chống ung thƣ trên hai dòng tế bào ung thƣ là dòng tế bào ung thƣ vú MCF-7 (human breast adenocarcinoma) và ung thƣ gan ác tính SK-Hep-1 (human liver adenocarcinoma). Kết quả sàng lọc đƣơ ̣c trình bày trên bảng sau:
Bảng 3.4: Kết quả sàng lọc chống ung thư gan và ung thư phổi qua phép thử MCF- 7 và SK-Hep-1 của Glypetelotine, kết quả đợt 1/2011.
(CI -concentration inhibitory %)
Name Origin SK-Hep-1
cytotoxicity (CI%)
MCF-7 cytotoxicity ug/ml
CI% ug/ml CI%
glypetelotin Glycosmis petelotii 0.1 7.606 0.1 -1.71 1 9.975 1 -0.18 10 12.54 10 8.166
Kết quả cho thấy có khả năng ức chế 8-12% cả hai loại ung thƣ phổi và ung thƣ vú.
3.3.2.Sàng lọc trên phép thử Wnt
Phƣơng pháp thử hiện đại nhất trong sàng lọc hoạt chất chống ung thƣ, dựa trên các tín hiệu protein Wnt. Kết quả cho thấy:
Bảng 3.5: Kết quả sàng lọc hoạt tính trên Wnt
Stt Code Wnt signaling
21 VHKC-0021 0.35
77
3.4. Kết luâ ̣n:
Từ cành và lá cây cơm rƣơ ̣u (Glycosmis petelotii) đã phân lâ ̣p đƣợc hai alkaloid demethyglypetelotine và glypetelotine , trong đó demethylpetelotine là mô ̣t hơ ̣p chất mới, lần đầu đƣợc phân lâ ̣p. Ngoài ra đã phân lập và xác định cấu trúc của các chất β – Sitosterol, Axit oleic.
Đã đánh giá hoa ̣t tính của các chất khảo sát , trong đó có di ̣ch chiết MeOH của
Glycosmis petelotii và các dịch phân bố, tác dụng gây giãn mạch động mạch chuột
đã loại bỏ lớp tế bào nội mô (-EC) và gây co nhờ dung dịch K60; tác dụng gây giãn mạch động mạch chuột đã loại bỏ lớp tế bào nội mô (-EC) và gây co nhờ dung dịch phenylephrine; tác dụng gây giãn mạch động mạch chuột, còn lớp tế bào nội mô (+EC) và gây co nhờ dung dịch phenylephrine và tác dụng gây giãn mạch động mạch chuột, đã loại bỏ lớp tế bào nội mô (-EC) và gây co nhờ dung dịch K60.
Kết quả khảo sát bƣớc đầu cho thấy di ̣ch chiết MeOH và các di ̣ch phân bố của
cây Glycosmis petelotii có hoạt tính tốt với các thử nghiệm trên , đă ̣c biê ̣t là di ̣ch
phân bố trong Clorofom.
Đánh giá hoạt tính gây đô ̣c tế bào ung thƣ của các dịch chiết đƣợc sàng lọc trên dòng ung thƣ vú (MCF-7) và ung thƣ gan (SK-Hep-1) ở ngƣời. Thử sàng lọc trên Wnt/b-catenin signalling pathway.
78
Bảng 3.6: Bảng tổng hợp các hợp chất phân lập được từ cây cơm rượu Glycosmis petelotii trong khuôn khổ luận văn:
MC -340
Demethylglypetelotine (lần đầu tiên đƣơ ̣c phân lâp)
NH CH2 CH2 N S CH3 CH3 O H H H H H 4 5 6 7 8 9 1 3 1' 2' 3' 4' 5' 6' 7' 2 MC – 339 ( MC – 308) Glypetelotine HO 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 19 11 12 13 14 15 16 17 18 20 22 23 24 28 29 25 27 28 21 GPH1 -Sitosterol OH O GPH2 Axit oleic
79
KẾT LUẬN:
Nhƣ vâ ̣y sau thời gian thƣ̣c hiê ̣n luâ ̣n văn với đề tài : " Đóng góp mới về nghiên cƣ́u thành phần hóa ho ̣c loài cơm rƣơ ̣u (Glycosmis petelotii) ở Việt Nam'' tôi đã hoàn thành nhƣ̃ng mu ̣c tiêu sau:
1. Tổng quan các tài liê ̣u tron g nƣớc và ngoài nƣớc có liê n quan đến cây Glycosmis
petelotii, thành phần hóa học của chi, hoạt tính sinh học của các h ợp chất phân lâ ̣p
tƣ̀ chi Glycosmis, giớ i thiê ̣u về cây Glycosmis petelotii.
2. Đã xây dƣ̣ng đƣơ ̣c quy trình chiết xuất và phân lâ ̣p các chất tƣ̀ căn chiết cây
Glycosmis petelotii.
3. Đã phân lâ ̣p và xác đi ̣nh cấu trúc hóa ho ̣c đƣơ ̣c 4 hơ ̣p chất: demethyglypetelotine, glypetelotine, axit oleic, β-sitosterol, trong đó alkaloid demethyglypetelotine là dẫn xuất lần đầu tiên đƣơ ̣c phân lâ ̣p tƣ̀ thƣ̣c vâ ̣t.
4. Đã đánh giá tác dụng gây giãn mạch động mạch chuột của các dịch chiết có dịch chiết MeOH và di ̣ch phân bố của mô ̣t số loài ho ̣ Rutaceae . Trong đó di ̣ch phân bố trong Clorofom của lá cây Glycosmis petelotii có tác dụng mạnh.
Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ của chất glypetelotine đƣợc sàng lọc trên dòng ung thƣ vú (MCF-7) và ung thƣ gan (SK-Hep-1) ở ngƣời. Thử sàng lọc trên Wnt/b-catenin signalling pathway.
80
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tài liệu tiếng Việt:
1. Đỗ Tất Lợi (2001), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB y học, Hà Nội, tr.142-143.
2. Đỗ Huy Bích và các cộng sự (2006), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, NXB Khoa học và kỹ thuật, Tập 1, tr. 542.
3. Mai Hù ng Thanh Tùng (2012), Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài Khổ sâm mềm (Brucea mollis Wall. ex Kurz) và Cơm rƣợu trái hẹp (Glycosmis stenocarpa (Drake) Guillaum) ở Việt Nam , Luận án tiến sĩ , Viê ̣n Hóa Ho ̣c.
4. Nguyễn Mạnh Cƣờng (1999), Nghiên cứu thành phần hóa học cây Cơm rƣợu
(Glycosmis petelotii Guill.), cây Vù Hƣơng (Cinnamonmum balansae Lecomte) và
cây Mạy Châu (Carya tonkinensis Lecomte) ở Việt Nam, Luận án tiến sĩ khoa học, Viện Hóa học.
5. Nguyễn Nghĩa Thìn, Đỗ Thị Thu Hà (1998), Nghiên cứu thuốc dân tộc của đồng bào dân tộc Dao thôn Hợp nhất, xã Ba vì, tỉnh Hà tây, Tạp chí dược học, số 8, tr. 5-7.
6. Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Viê ̣t Nam , Xuất bản lần thƣ́ 2, NXB Khoa học và công nghệ kĩ thuật, Tâ ̣p 2, Tr. 1286.
7. Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, NXB Khoa học và kỹ thuật, Tập 2, Tr. 1286.
Tài liệu tiếng anh:
8. Arruda, M.S.P., Fernandes, J.B., Silva, M.F.D.G.F.D., Vieira, P.C., Pirani, J.R., 1992, Quinolone alkaloids from Zanthoxylum actifolium, Phytochemistry 31, 3617–3619.
9. Bhattacharyya, J. and Pakrashi S.C (1979), The identity of glycophymine and glycosminine: an alkaloid of Glycosmis arborea ( Roxb.) DC., Heterocyclea, 12, 929 – 31.
10. Bhattacharyya, P. and B.K., (19), Glycophylone: a new quinolone alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Chem. Ind. ( London), 9, 352.
11. Bhattacharyya, P., Sarkar, T., Chakraborty, A. and Chowdhury, B.K. (1984), Structure and synthesis of Glycozoliol, a new carbazole alkaloid from Glycosmis
81
12. Bhattacharyya, P. and Choudhury, B.K., (1985), J. Nat. Prod,48,465.
13. Bhattacharyya, P., Chakrabartty, P. K., and Chowdhury, B. K (1985), Glycozolidol, an antibacterial carbazol alkaloid from Glycosmis pentaphylla,
Phytochemistry, 24, 882-3.
14. Bhattacharyya, P., Chowdhury, B. K Glycolone, (1985), Glycozolidol, a quinolone alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry, 24, 634-5.
15. Bhattacharyya, P., Chowdhury, B.K., 1985. 2-Methoxy-3-methylcarbazole from Murraya koenigii. Ind. J. Chem. Sect. B: Org. Chem. Incl. Med. Chem. 24B, 452.
16. Blatter C. (1975), Indian Medicinal Plants, Calcutta, 470.
17. Bovey, F, A. (1969), Nuclear Magbetic Resonance Spectrocopy, Academic Press, New York, p. 122, 138, 159
18. Braulio M. Fraga (1998), Natural sesquiterpenoids, Nat. Prod. Rep., (1), 73-92. 19. Chakravarty, D. P. (1966), Glycozoline, a carbarzole derivative from
Glycosmis pentaphylla (retz) DC., Tetrahedron Letters, 6, 661 – 4.
20. Chakraborty, D. P. (1966), Science and Culture, 32, 181 – 2.
21. Chakravarty, A.K., Das, B., Masuda, K., and Ageta, H. (1996), Tetracyclic triterpenoids from Glycosmis arborea, Phytochemistry, 42, 1109-13.
22. Chatterjee A. and Majumdar S. H. (1952), Science and Culture, 17, 306-307. 23. Chkravarti N., and Chakravarti S. C. (1952), J. Proc. Inst. Chemists (India), 4, 96-104. 24. Chou T. C., Tzeng C.C., Wu T. S., Watanabe K. A., Su T. L. (1989), Inhibition of cell growth and marcromolecular biosynthesis of human promyelocytic leukemic cells by acridone alkaloids, Phytotherapy Research, 3, 237-242.
25. Choudhury, B. K., Mustafa, A., Garba, M. and Bhattacharyya, P. (1988), Phytochemistry, 26, 2138.
26. D. S. Bhakuni, N. C. Gupta, Sheo Satish, S.C. Sharma, Y. N. Shukla and J. S. Tandon (1971), Chemical constituents off Actinodapne augustfolia, Croton sparsiflorus, Duabanga sonneratiodes, Duabanga sonneratiodes, Glycosmis mauritiana, Hedyotis auricularia, Lyonia ovalifolia, Micromelum pubescens, Pyrus
pashia and Rhododendron niveum, Phytochemistry, 10(9), 2247 – 2249.
27. Das, B. P. and Chowdhury,. D. N (1978) , Glycosolone: A new quinolone alkaloid from Glycosmis pentaphylla (Retz) . DC., Chem. Ind. ( London), 8, 272, 273.
82
28. Fujioka, H., Nishiyama, Y., Furukawa, H., and Kumada, N. (1989), In vitro
and in vivo activities of Atalaphilinine and related acridone alkaloids against Rodent
Malaria, Antimicrob. Agents Chemother., 33, No. 1, 6 – 9.
29. Greger, H., Hofer, O., Zechner, G., Hadacek, F., and wurz, G. (1993), Different types of sulphur – containing amides from Glycosmis cf. Chlorosperma,
Phytochemistry, 32, 933 – 6.
30. Greger, H., Hofer, O., Zechner, G., Hadacek, F., and wurz, G. (1994), Sulphones derived from methylthiopropenic acid amides from Glycosmis
angustifolia, Phytochemistry, 37, 1035 – 10.
31. Greger, H., Zechner, G., Hofer, O., and Vajrodaya, S., (1996), Bioactive amides from Glycosmis species, J. Nat. Prod., 59, 1163 – 8.
32. Hans-Joachim Knolker and Kethiri R. Reddy (2002), Isolation and Synthesis of Biologically Active Carbazole Alkaloids, Chem. Rev., 102, 4303-4427.
33. Hofer O., Zechner G., Vajrodaya S., Lutz G., and Greger H. (1995), New anthranilic and methylsulfonylpropenoic acid amides from Thai Glycosmis species,
Liebigs Ann., 10, 1789-1794.
34. Hofer, O., Zechner, G., Wurz, G., Hadacek, F., and Greger, H., Ritigalin (1995), A new thiocarbonic imide from Glycosmis species, Monatsh. Chem., 126, 365-8.
35. Hinterberger S., Hofer O., and Gerger H. (1994), Synthesis and corrected structure of sulphur-containing amides from Glycosmis species: sinharines, penimides and illukumbins, Tetrahedron, 50, 6279-6286.
36. Ito C, Kon do Y, Wu TS, Furukawa H. (2000), Chemical constiuents of
Glicosmis citrfolia (Willd.) Lindl. Structures of four new acridones and three new
quinplone alkaloids, Chem Pharm Bull, 48(1), 65-70.
37. Ito, C.; Itoigawa, M.; Sato, A.; Hasan, C. M.; Rashid, M. A.; Tokuda, H.; Mukainaka, T.; Nishino, H.; Furukawa, H. (2004), Chemical Constiuents of
Glycosmis arborea: Three new carbazole alkaloids and their biological Activity, J.
Nat. Prod., 67(9), 1488-1491.
38. Junsong Wang, Hongping he, Yuemao Shen and Xiaojiang hao (2005), Sulfur-containing and dimeric flavanols from Glycosmis montana, Tetrahedron
Letters, 46(1), 169-172.
39. Junsong Wang, Xianwen, Yingtong Di, Yuehu Wang, Yuemao Shen, and Xiaojiang Hao (2006), Isoflavone Diglycosides from Glycosmis pentaphylla, J.
83
40. Junsong Wang, Yingtong Di, Xianwen Yang, Shunlin Li, Yuehu Wang, Xiaojiang Hao (2006), Hydroquinone diglycoside acyl esters from the stems of
Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry, 67, 486-491.
41. Junsong wang, Yongtang Zheng, Thomas Efferth, Ruirui Wang, Yuemao Shen and Xiaojiang Hao, 2005, Indole and carbazole alkaloids from Glycosmis montana
with weak anti-HIV and cytoxic activies, Phytochemistry, 66(6), 697-701.
42. Joseph P. Michael (2001), Quinoline, quinazoline and acridone alkaloids, Nat.
Prod. Rep., 18(5), 543-559.
43. Joseph P. Michael (2003), quinoline, puinazoline and acridone alkaloids, Nat. Priod. Rep., 20, 476-493.
44. Kamaruzzman Chakraborty, Shyamali Roi and D. P. Chakraborty (1989), Mupamine from Glycosmis pentahylla, Phyamali Roi and D. P. Chakraborty (1989), Mupamine from Glycosmis pentaphylla, 28(2), 677-678.
45. Kumar, O., and Das, B. P. (1986), Homo-glycosolone: a new puinolone alkaloids from Glycosmis pentahylla (Retz) DT., Chem. Ind. (Lon don), 19, 669-70. 46. Kumar, V., Reisch, J., and Wickramasinghe, A. (1989), glycomaurin and Glycomaurrol, new carbazole alkaloids from Glycosmis mauritiana (Rutaceae) Bark, Aust. J. Chem., 42, 1375-9.
47. Mauri Lounasmaa, Arto Tolvanen (2000), simple indole alkaloids and those with a nonrearranged monoterpenoid unit, Nat. Prod. Rep., 17, 175-191.
48. Mester, J. (1983), Ch. 3 in " Chemistry and chemical Taxonomy of the Rutales ", Ed. Wateman, P.D. and Grundon, M.F., Academic Press, London, 31-96. 49. Mukherjee, S., Mukherjee, M. and Ganguly, S. N. (1983), Glycozolinene, a carbazole derivative from Glycosmis pentaphylla, phytochemistry, 22,1064-5.
50. Nguyen Manh Cuong. Walter C. Taylor and Tran Van Sung, glypetelotine (1999), a sulphur-containing indole alkaloid from Glycosmis petelotii, Phytochemistry, 52(8),1711-1714.
51. Nguyen Manh Cuong, Tran Quang Hung, Tran Van Sung and Walter C. Taylor (2004), A New Dimeric Carbazole Alkaloid from Glycosmis stenocarpa Roots,
Chem. Pharm. Bull. 52(10) 1175-1178.
52. Norio Aimi, Hiroyuki Hoshino, Masashi Nishimura, Shin-ichiro Sakai, and Joju Haginiwa (1990), Chaboside - First natural glycocamptothecin found from
Ophiorrhiza pumila, Tetrahedron Letters, 3(36), 5169-5172.
53. Naoko Negi, Yu Jinguji, A Kaori Ushijima, A Shinobu Ikeda, A yuko Takemura, A Motoharu Ju- Ichi , Tian – Shung Wu, Chihiro Ito and Hiroshi
84
Furukawa (2004), A new dimeric acridone alkaloids from Glycosmis citrifolia, . Chem. Pharm. Bull. 52 (10) 1175 – 1178
54. Ono. T . Ito, C., and Furukawa, H. (1995), Two new acridone alkaloids from
Glycosmis species, J. Nat. Prod. 58, 1629 – 31
55. Otmar Hofer, Harald Greger, Brigitte Lukaseder, Srunya Vajrodaya and Markus Bacher (2000), Prenylated sulfonyl amides from Glycosmis species, phytochemistry, 54(2), 207-213.
56. Parkrashi, S. C., Bhattacharyya, J., and Tomson, L. F. (1963), Tetrahedron, 19.1011-26.
57. Perry, L. M. (1980), Medicinal plants of East and Southeast Asia: Attributed Properties and Uses, The MIT Press Cambridge, Massachusetts, 366.
58. Rastogi, K., Kapil, R. S. and Popli, S. P. (1980), phytochemistry, 19,945. 59. Ran Xu, Gia C. Fazio and Seiichi p. T. Matsuda (2004), On the origins of triterpenoid skeletal diversity, Phytochemistry, 65(3), 261-291.
60. Sarkar, m. and Chakaraborty, D. P. (1979), Glycophymoline, a new minor quinazoline alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry, 18,694-5.
61. Sarka, M. and chakraborty, D. P. (1977), Some minor constituents from
Glycosmis pentaphylla, phytochemisry, 16, 2007-8.
62. Sarkar, M., Kundu, S. and chakraborty, D. P., phytochemistry (1978), 17, 2145-6.
63. Sarot Cheenpracha , Surat Laphookhieo, 2011, Alkaloids and amides from
Glycosmis macrophylla, Phytochemistry Letters 4, 187–189
64. Srunya Vajrodaya, Markus Bacher, Harald Greger and Otmar Hofer, (1998), Organ-specific chemicel differences in Glycosmis trichanthera, phytochemistry, 48(5), 897-902.
65. P. Silambujanaki, CH. Bala Tejo Chandraa, K. Anil Kumarb, V. Chitraa, (2011) Wound healing activity of Glycosmis arborea leaf extract in rats, Journal of Ethnopharmacology 134 (2011) 198–201
66. Sikhibhushan D. (1936), Chemical examination of Glycosmis pentaphylla and the constitution and synthesis of its active principle, Proc. Acad. Sci. United Province Agra. Oudh., India, 5, 55-6. Chemical Abstracts, 30, 1061.
67. P.S. Sreejitha, Russel Royna Mascarenhasb, R.J. Praseejaa, V.V. Ashaa, 2012, The apoptosis inducing effect of Glycosmis pentaphylla (Retz.) Correa and its influence on gene expression in hepatocellular carcinoma cell line, Hep3 B, Journal Ethnopharmacology 139, 359– 365.
85
68. Swingle, W.T. (1938), J. Wash. Acad. Sci., 28, 530.
69. Talapatra B., Chaudhuri M. K., and Talapatra S. K. (1975), Coumarins of
Glycosmis cyanocarpa Spreng: Selenium dioxide oxidation of dihydro &
tetrahydro-xanthyletins, Indian J. Chem., 13, 835.
70. Tawanun Sripisut, Thunwadee Ritthiwigromb, Trinop Promgool, Kulsiri Yossathera, Suwanna Deachathai, Wong Phakhodee, Sarot Cheenpracha, Surat Laphookhieo,(2012), Glycopentaphyllone: The first isolation of hydroperoxyquinolone from the fruits of Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry Letters 5 (2012) 379–381.
71. Waterman, P. D. (1983), Ch. 15 in "Chemistry and Chemical Taxonomy of the Rutales", (Ed. Waterman, P. D. and Grundon, M.F.), Academic Press, London, 392.
72. Willis, J. E. (1973), A Dictionary of the Flowering Plants and Ferns, Cambridge University Press, London.
73. Wu. T. S. and ., Furukawa, H., Kuoh, C. S and Hus, K. S. (1983), Acridon alkaloids. Part 91. Chemical constituents of Glycosmis citrifolia ( Willd.) Lindl. 74. Structure of novel linear pyranoacridones, furoacridones, and other new acridone alkaloids. J. Chem. Soc. Perkin Trana. 1.8, 1618 – 8.
75. Wu. T. S. and ., Furukawa, H. (1982), Acridon alkaloid III. Structure of Glycofoline, a new mototerpenoid acridon alkaloid from Glycosmis citrifolia ( Willd.) Lindl., Heterocycle., 19, 825 – 7
76. Wurz, G., Hofer, O., and Greger, H. (1993), Structure and synthersis of phenaglydon, a new quinolone derived phenanthridine alkaloid from glysosmis cyanocarpa, Nat. Prod. Lett., 3, 177-82.
77. Wu, T.S., Chang, F.C., and Wu, P.L. (1995), Flavonoids, amidosulfoxides and an alkaloid from the leaves of Glycosmis citrifolia, Phytochemistry, 39, 1453-1457.
78. Zhang Dianxiang, Thomas G. Hartley (2008), Glycosmis Correa, Ann. Mus.
Natl. Hist. Nat. Fl. China 11, 80–83.
Trang wed: 79. http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Rutaceae&list=familia 80. http://vi.wikipedia.org/wiki/Ancaloit 81. http://dethi.violet.vn/present/show/entry_id/7539952 82. http://www.zipcodezoo.com/plants/names/Plants-SN-G-0039. 83. Agriviet.com/file/1-Danh-muc-thuc-vat-viet-nam/
86
PHỤ LỤC: DƢ̃ LIỆU PHỔ PHỤ LỤC 1: PHỔ CỦA MC – 340
87
88
89
90
91 PHỔ 1
92 PHỔ 1