4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.1.3. Mô cơ cá giò 14 ngày sau khi tiêm các loại vắc xin và nhũ dầu
Ở ựộ phóng ựại x100 sẽ quan sát ựược vùng viêm. độ phóng ựại x400 quan sát ựược ổ viêm. Ở ựộ phóng ựại x1000 quan sát ựược ổ viêm và các lớp tế bào miễn dịch xung quanh ổ viêm.
4.1.3.1. Mô cơ cá giò 14 ngày sau khi tiêm các loại vắc xin và nhũ dầu ở ựộ phóng ựại x100
Hình 4.14. Mô cơ cá giò 14 ngày sau khi tiêm nhũ dầu, x100, giọt dầu (O) Sau 14 ngày tiêm nhũ dầu, mô cơ vẫn còn hiện diện rải rác một số giọt dầu (O) nhỏ (Hình 4.14). Một số sợi cơ bị ựứt gãy, xơ nát. Tổ chức mô học không bị biến ựổi nhiều, ựại ựa số các sợi cơ có cấu trúc bình thường.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 35
Hình 4 .15.Mô cơ cá giò 14 ngày sau khi tiêm vắc xin V1,V4-1,V4-2,V6, x100 (Giọt dầu (o))
Sau 14 ngày tiêm 4 loại vắc xin xuất hiện vùng mô bị biến ựổi rộng lớn ngay dưới da chắnh là vùng viêm bắt màu tắm ựậm thuốc nhuộm Hematocylin. Tại vùng viêm tổ chức mô học bị phá hủy hoàn toàn, không còn hiện diện của sợi cơ. Ngoại vi vùng viêm là mô cơ bình thường bắt màu hồng thuốc nhuộm Eosin. Mô cơ bị biến ựổi mạnh sau 14 ngày tiêm.
Sau 14 ngày tiêm vắc xin V6 nhận thấy vùng viêm rộng hơn so với 7 ngày tiêm rất nhiều. điều này chứng tỏ khả năng gây viêm của vắc xin V6 sau 14 ngày tiêm mới diễn ra mạnh nhất.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 36
4.1.3.2. Biến ựổi mô cơ 14 ngày sau khi tiêm các loại vắc xin và nhũ dầu, x400
Hình 4.16.Mô cơ cá giò 14 ngày sau khi tiêm nhũ dầu (ựối chứng), x400 (Giọt dầu (o), vùng cơ bị rách nát, mất liên kết ( ))
Qua quan sát trên tiêu bản mô cơ 14 ngày sau khi tiêm nhũ dầu (Hình 4.16), nhận thấy ắt có sự biến ựổi, hoại tử hơn so với 7 ngày sau khi tiêm nhũ dầu. Mô cơ bắt màu hồng của Eosin, các sợi cơ xếp song song, một số ắt bị ựứt gãy và không có hiện tượng hoại tử nghiêm trọng. Trong cơ chỉ còn xuất hiện rải rác rất ắt giọt dầu, lượng tế bào máu tập trung tới ựây cũng ắt hơn.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 37
Hình 4.18. Biến ựổi mô cơ 14 ngày sau khi tiêm vắc xin V6, x400
Hình 4.19. Biến ựổi mô cơ 14 ngày sau khi tiêm vắc xin V4-1, x400
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 38
Quan sát tiêu bản mô cơ cá giò sau khi tiêm 4 loại vắc xin ở ựộ phóng ựại lớn hơn thấy mô cơ biến ựổi rõ, xuất hiện các ổ viêm có kắch thước lớn. Dòng tế bào máu tập trung dày ựặc và xâm nhập vào bên trong giọt dầu.
Sau 14 ngày tiêm vắc xin V4-2 ổ viêm xuất hiện bé hơn so với tiêm 3 loại vắc xin kia. Xung quanh ổ viêm vẫn quan sát ựược dấu hiệu của sợi cơ ựang tồn tại (Hình 4.20). Khác hẳn với tiêm 3 loại vắc xin V1,V4-1 và V6 ổ viêm kắch thước lớn và xung quanh ổ viêm tập trung dày ựặc dòng tế bào máu và không còn sự hiện diện của sợi cơ. Sợi cơ bị phá hủy hoàn toàn (Hình 4.17; Hình 4.18; Hình 4.19).
4.1.3.3. Các lớp tế bào xuất hiện trong vùng tiêm sau 14 ngày tiêm các loại vắc xin và nhũ dầu, x1000
Ớ Lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm nhũ dầu, x1000
Hình 4.21. Lớp tế bào trong mô cơ sau 14 ngày tiêm nhũ dầu, x1000 hồng cầu (e), bạch cầu (WBC)
Sau 14 ngày tiêm nhũ dầu, các sợi cơ và tơ cơ bị nát, xơ rách và xen kẽ với các tế bào máu. Tuy nhiên, các loại tế bào máu không còn tạo thành ựám dày ựặc bao quanh giọt dầu như 7 ngày sau khi tiêm nhũ dầu. Ở ựộ phóng ựại lớn
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 39
hơn có thể quan sát thấy lượng rất ắt các tế bào như hồng cầu, các bạch cầu xen kẽ giữa những sợi cơ (Hình 4.21).
Ớ Lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm vắc xin V1, x1000
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 40
A & B: Quan sát ở ựộ phóng ựại lớn hơn (x1000) thấy xuất hiện tế bào ựại thực bào (M) có kắch thước lớn, bắt màu nhạt của thuốc nhuộm và quan sát thấy tạo thành các lớp tế bào rõ rệt xung quanh. Mật ựộ ựại thực bào khá nhiều. đại thực bào có chức năng thực bào (bắt, nuốt và tiêu hóa các kháng nguyên lạ). đại thực bào còn có khả năng trình diện kháng nguyên.
C, D: Dòng tế bào ựang xâm nhập vào trong giọt dầu nhưng chưa lấp kắn ựược khoảng trống. Mặc dù vậy, cũng ựã hình thành nên lớp tế bào khá rõ rệt.Tại vùng cơ bị biến ựổi là vùng viêm. Xung quanh ổ viêm tập trung dày ựặc tế bào bạch cầu và rải rác một số tế bào hồng cầu.
E, F: Có nhiều Lympho bào nhân lớn bắt màu tắm ựậm của Hematocylin. Lympho bào có vai trò thực hiện ựáp ứng miễn dịch. Việc tăng Lympho bào sẽ tăng khả năng sinh kháng thể chống trả lại sự xâm nhập của kháng nguyên.
Ớ Các lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm vắc xin V6, x1000
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 41
Quan sát ở ựộ phóng ựại lớn hơn thấy rõ nhiều giọt dầu bị dòng tế bào xâm nhập và chiếm hết diện tắch bên trong.
C: Ổ viêm bắt màu tắm của Hematocylin, có sự xuất hiện dày ựặc của các tế bào máu và phân lớp rõ rệt, H&E; x1000.
Lớp 1: Các vi khuẩn, bạch cầu, ựại thực bào, tổ chức hoại tử ựang bị tiêu diệt tạo thành ựám dịch dạng keo ựặc không phân biệt rõ các loại tế bào.
Lớp 2: Lớp tế bào ựại thực bào bắt màu thuốc nhuộm nhợt nhạt. Nhận thấy, lớp tế bào này tập trung nhiều và dày hơn so với 7 ngày sau khi tiêm vắc xin.
Có những ổ viêm chỉ có 2 lớp (Hình 4.23B) là lớp 2 và lớp 3. Lớp 1 gồm các vi khuẩn, tổ chức hoại tử ựã bị ựại thực bào tiêu diệt hết.
Lớp 3: Lớp tế bào gồm các loại bạch cầu ngăn cách không cho ổ viêm lan rộng, chủ yếu là dòng Lympho bào có nhân lớn bắt màu tắm của Hematocylin
(Hình 4.23B,C).
Sau 14 ngày tiêm vắc xin V6 vùng viêm lan rộng hơn, ựặc biệt các dòng tế bào ựã xâm nhập vào trong giọt dầu phân chia làm 3 lớp rõ rệt. Lớp tế bào bạch cầu ựa nhân cùng với các tế bào vi khuẩn bị các ựại thực bào tiêu diệt. Tiếp ựó là lớp ựại thực bào dày ựặc bao quanh làm nhiệm vu tiêu diệt các bạch cầu và vi khuẩn bằng con ựường nội tế bào. Ở giai ựoạn này xuất hiện dòng Lympho bào ở ngoài cùng của ổ viêm với mật ựộ nhiều là hàng rào bảo vệ ngăn cách với mô lành.
Ớ Lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm vắc xin V4-1, x1000
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 42
Ổ viêm bắt màu tắm của Hematoxylin, có sự xuất hiện dày ựặc của các tế bào máu bao vây, xâm nhập giọt dầu.
A, B: Các lớp tế bào tạo thành vòng bao quanh vùng viêm, có nhân bắt màu của Hematocylin, bao vây, cô lập và tiêu diệt tác nhân lạ.
Lớp 1: Các vi khuẩn, bạch cầu, ựại thực bào, tổ chức hoại tử ựang bị tiêu diệt tạo thành ựám dịch keo dạng ựặc.
Lớp 2: Lớp tế bào ựại thực bào bắt màu thuốc nhuộm nhợt nhạt. Nhận thấy, lớp tế bào này chưa xuất hiện sau 7 ngày tiêm vắc xin.
Lớp 3: Gồm các tế bào bạch cầu ngăn cách không cho ổ viêm lan rộng.
Hình 4.25.Lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm vắc xin V4-1, x1000 C: Dựa vào hình dạng, khả năng bắt màu của từng lớp tế bào mà chia làm 4 lớp tế bào:
Lớp 1: Các vi khuẩn, bạch cầu, ựại thực bào, tổ chức hoại tử ựang bị tiêu diệt tạo thành ựám dịch keo dạng ựặc.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 43
Lớp 2: Vùng các tác nhân ựang bị bao vây, ựang bị tiêu diệt không nhìn rõ tế bào. Chủ yếu là các tế bào bạch cầu sau khi làm nhiệm vụ thực bào, mảnh vụn vi khuẩn sẽ bị tiêu diệt.
Lớp 3: Lớp tế bào ựại thực bào bắt màu thuốc nhuộm nhợt nhạt. Lớp tế bào này dày và nhiều so với 7 ngày sau khi tiêm vắc xin. Tế bào ựại thực bào có nhiệm vụ bắt giữ, tiêu hóa kháng nguyên lạ thành mảnh peptid ựể tiến hành trình diện kháng nguyên.
Lớp 4: Gồm các tế bào bạch cầu nhân lớn bắt màu tắm ựậm của Hematocylin. Chủ yếu là dòng Lympho bào bao quanh ngăn cách giữa vùng viêm và vùng lành. Lympho bào có nhiệm vụ thực hiện ựáp ứng miễn dich, sinh kháng thể.
14 ngày sau khi tiêm vắc xin V4-1, vùng viêm lan rộng số lượng các loại tế bào ựược tập trung ựến ổ viêm nhất là ựại thực bào, Lympho bào và bạch cầu. Chúng tạo thành ựường viền bắt màu tắm của Hematocylin, không cho ổ viêm lan rộng xâm nhập vào các vùng cơ bình thường xung quanh.
Ớ Lớp tế bào trong ổ viêm sau 14 ngày tiêm vắc xin V4-2, x1000
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ....... 44
A: Sự phân lớp tế bào trong ổ viêm.
Lớp 1: Các vi khuẩn, bạch cầu, ựại thực bào, tổ chức hoại tử ựang bị tiêu diệt tạo thành ựám dịch keo dạng ựặc.
Lớp 2: Lớp tế bào ựại thực bào bắt màu thuốc nhuộm nhợt nhạt. Các tế bào này có khả năng thực bào những tế bào chết, vi khuẩn và các sản phẩm trong quá trình viêm, có nhiệm vụ trình diện kháng nguyên cho tế bào có thẩm quyền miễn dịch. Lớp này dày hơn so ở 7 ngày tiêm vắc xin.
Lớp 3: Gồm các tế bào bạch cầu nhân lớn bắt màu tắm ựậm của Hematocylin. Lớp tế bào này bao quanh ngăn cách giữa vùng viêm và vùng lành.
B: Quá trình tiêu diệt tác nhân la trong ổ viêm sắp kết thúc, lúc này không còn thấy lớp 1 mà thay vào ựó là lớp 2 rất dày. Dòng tế bào ựại thực bào (M) dày ựặc và chiếm diện tắch lớn trong ổ viêm.
C,D: Hình ảnh tế bào ựại thực bào và tế bào Lympho tạp trung nhiều tại ổ viêm. Sau 14 ngày phản ứng viêm vẫn ựang xảy ra mạnh như ở 7 ngày tiêm.