Phương pháp xác định sô lượng tê bào

Một phần của tài liệu luận văn tốt nghiệp ngành công nghệ sinh học: khảo sát khả năng tăng sinh khối của nấm men Rhodotorula (Trang 29 - 31)

Cú theơ các bước được tiên hành như sau: 3.1.2 Khạo sát đoơ thuaăn cụa giông.

3.2.1.Phương pháp xác định sô lượng tê bào

Cách tiên hành:

Đaịt lammen sách phụ leđn khu vực buoăng đêm.

Laĩc đeău dịch nâm men và dùng ông nhỏ giĩt hút dịch nâm men đã pha loãng, bỏ đi vài giĩt đaău roăi cho vào khe buoăng đêm, tránh táo bĩt khí.

Đaịt buoăng đêm vào bàn kép cụa kính hieơn vi, dùng kép cô định buoăng đêm. Dùng vaơt kính ×10 đeơ đieău chưnh sơ boơ sau đó chưnh kính với vaơt kính ×40 tìm máng ođ đêm ở khu vực buoăng đêm. Ta tiên hành đêm 4 ođ lớn ở 4 gôc và 1 ođ ở giữa.

Cách tính: Sau khi đêm được sô tê bào nâm men trong 5 ođ lớn, ta tính ra sô lượng tê bào trong 1 ml mău theo cođng thức.

Sô tê bào/1ml mău =

a: Sô tê bào trung bình có trong moơt ođ nhỏ 4000: Sô quy đoơi từ 1/4000 mm3 thành 1 mm3 1000: Sô quy đoơi từ 1 mm3 thành ml

H: Heơ sô quy đoơi

3.2.1.2.Xác định gián tiêp sô lượng tê bào baỉng cách đêm sô lượng khuaơn lác phát trieơn tređn mođi trường thách đĩa.

Cách tiên hành: Dùng pipet hút 1 ml dịch nâm men đã nuođi ở chai đã nuođi cây ở các thời đieơm mà ta muôn đêm sô lượng tê bào roăi cho vào ông nghieơm đã chứa sẵn 9 ml nước muôi sinh lý 9‰. Tiêp túc pha loãng dịch huyeăn phù này ở các noăng đoơ khác nhau, 10-2, 10-3...Tiên hành cây mău ở các noăng đoơ pha loãng vào các đĩa petri, theo phương pháp cây gát hay đoê đĩa(laịp ba). Tiên hành trong đieău kieơn vođ trùng. Chú ý ở phương pháp cây gát ta chư cây 0,1 ml

a×4000×1000 H

còn ở phương pháp đoê đĩa cây 1ml trước khi theđm mođi trường đã làm nguoơi vào.

Đaịt các đĩa đã cây ở nhieơt đoơ phòng và đêm sô khuaơn lác sau 24-48 giờ.

Cách tính: Sau khi đêm được sô khuaơn lác trung bình trong moơt đĩa petri ở moơt đoơ pha loãng nhât định ta quy veă sô lượng tê bào có trong 1 ml nguyeđn mău theo cođng thức.

Sô tê bào/1ml nguyeđn mău = xD V

n

n: Sô khuaơn lác trung bình trong moơt đĩa petri ở moơt đoơ pha loãng nhât định V: Theơ tích dịch mău đem cây

D: Heơ sô pha loãng.

Một phần của tài liệu luận văn tốt nghiệp ngành công nghệ sinh học: khảo sát khả năng tăng sinh khối của nấm men Rhodotorula (Trang 29 - 31)