- Phỏng vấn
- Thăm khỏm lõm sàng và lấy bệnh phẩm làm xột nghiệm - Tiến hành xột nghiệm và đỏnh giỏ kết quả
- Những bệnh nhõn cú xột nghiệm C.trachomatis dương tớnh sẽ được điều trị và làm lại xột nghiệm sau điều trị, bệnh nhõn cú xột nghiệm C.trachomatis õm tớnh và khụng bị viờm nhiễm đường sinh dục dưới sẽ hẹn chụp phim tử cung vũi trứng.
2.2.4.1. Phỏng vấn (Phụ lục 1)
• Hành chớnh: Họ và tờn, tuổi, địa chỉ, trỡnh độ học vấn, nghề nghiệp.
• Tiền sử:
- Tiền sử phụ khoa: Tiền sử nhiễm trựng đường sinh dục, tiền sử đau vựng hạ vị, tiền sử mổ can thiệp vựng tiểu khung, vựng bụng. Tuổi giao hợp lần đầu tiờn.
- Tiền sử sản khoa: PARA (Số lần sinh đủ thỏng; Số lần sinh thiếu thỏng; Số lần nạo, hỳt, sẩy thai, thai lưu, chửa ngoài tử cung; Số con sống hiện tại), tiền sử đặt DCTC, tiền sử thai kỳ lần cuối, thời gian vụ sinh, loại vụ sinh.
• Cỏc triệu chứng cơ năng hiện tại: Ra khớ hư, đau bụng khi gia hợp, ra mỏu sau giao hợp, đỏi buốt, đỏi dắt...
2.2.4.2. Khỏm phụ khoa (phụ lục 2): Nhằm đỏnh giỏ tỡnh trạng viờm đường sinh dục gồm:
Viờm õm hộ: Quan sỏt và đỏnh giỏ + Viờm đỏ, sẩn ngứa
+ Sựi + Loột AH
Viờm õm đạo: Đặt mỏ vịt và đỏnh giỏ. Bỡnh thường niờm mạc õm đạo cú màu tớm nhạt, cú ớt dịch
Cổ tử cung:
+ Viờm đỏ, phự nề. + Viờm trợt.
+ Chảy mỏu.
+ Xung huyết, chạm vào dễ chảy mỏu. + Lộ tuyến CTC.
+ Polyp, sựi.
Khớ hư:
+ Số lượng khớ hư:
- Nhiều: Ra tự nhiờn, thấm ướt băng vệ sinh, thay băng > 1 lần/ngày. - Vừa: Dịch ra tự nhiờn, thấm băng, thay băng vệ sinh 1 lần/ngày. - Ít: Đặt mỏ vịt mới thấy. + Tớnh chất dịch, màu sắc: - Khớ hư trong - Khớ hư đục - Khớ hư nhầy mủ Thăm õm đạo kết hợp nắn bụng
Lấy bệnh phẩm: Lấy bệnh phẩm bằng 2 tăm bụng:
Tăm bụng thứ 1: Lấy bệnh phẩm ở cựng đồ sau để soi tươi với NaCl 0,9% tỡm nấm, tricomonat, G.Vaginalis, mật độ vi khuẩn, tế bào.
Tăm bụng thứ 2: Lấy ở cổ tử cung sử dụng chẩn đoỏn Chlamydia.
2.2.4.3. Xột nghiệm tỡm Chlamydia
Xột nghiệm tỡm Chlamydia bằng kỹ thuật: Miễn dịch sắc ký
Tất cả bệnh nhõn đều được làm xột nghiệm miễn dịch sắc ký để tỡm khỏng nguyờn LPS của C.trachomatis
Xột nghiệm được tiến hành tại Phũng xột nghiệm Vi sinh, Bệnh viện Phụ sản Trung Ương. Áp dụng phương phỏp miễm dịch enzyme sắc ký, phỏt hiện chọn lọc khỏng nguyờn C.trachomatis, bằng test thử nhanh dBest One Step CT test Strip của hóng AmeriTek (Mỹ). Đõy là phương phỏp kết hợp kết dớnh khỏng thể đơn dũng và khỏng thể đa dũng để tỡm khỏng nguyờn Lipopolysaccharides (LPS) của C.trachomatis. Bộ thử hoạt động giống như que thử thai nhanh, 2 vạch cú nghĩa là bạn đó nhiễm C.trachomatis, một vạch là õm tớnh [29].
• Nguyờn lý xột nghiệm:
Khỏng thể khỏng LPS đơn dũng cú gắn chất màu và khỏng thể khỏng LPS đa dũng (dờ) được gắn vào vạch thử nghiệm ở thanh thử để xỏc định khỏng nguyờn LPS của cỏc dũng C.trachomatis. Khỏng thể khỏng IgG chuột đa dũng gắn ở vạch kiểm tra.
Khi nhỏ mẫu bệnh phẫm đó được xử lý bằng dung dịch chiết tỏch LPS vào ụ trũn của thanh thử, hỗn dịch chảy qua giấy thấm, LPS được bắt giữ bởi khỏng thể đơn dũng LPS và chất tạo màu tạo thành phức hợp miễn dịch khỏng nguyờn- khỏng thể. Phức hợp này gắn với khỏng thể khỏng LPS đa dũng ở vạch thử nghiệm và hỡnh thành vạch màu tớm đỏ. Chất kết hợp màu thừa sẽ tạo phản ứng ở vạch kiểm tra với khỏng thể khỏng IgG chuột tạo thành vạch màu tớm đỏ thứ 2, điều này chứng tỏ thuốc thử hoạt động tốt [51].
• Lấy bệnh phẩm:
Lấy ở cổ tử cung sử dụng chẩn đoỏn Chlamydia. Trước khi lấy dựng bụng lau sạch nhầy ở CTC. Đưa tăm bụng vào lỗ trong CTC khoảng 1,5cm, xoay và miết mạnh cho phần tăm bụng chạm vào thành CTC trong khoảng 10-30 giõy để lấy tế bào biểu mụ ống CTC. Lấy tăm bụng ra chỳ ý khụng để tăm bụng chạm vào thành õm đạo [3],[13].
• Bảo quản bệnh phẩm:
Bệnh phẩm nếu khụng được làm xột nghiệm ngay thỡ bảo trong điều kiện 2-8C.
Hỡnh 2.1: Vật liệu xột nghiệm [47]
• Vật liệu xột nghiệm:
Bộ test dBest One Step CT test Strip của hóng AmeriTek bao gồm: Que test, bảng hướng dẫn, dụng cụ lấy bệnh phẩm, dung dịch đệm xột nghiệm, ống nhựa để chứa dung dịch đệm và bệnh phẩm
• Tỏch chiết mẫu:
− Tất cả bệnh phẩm được đặt ở nhiệt độ phũng trước khi làm test
− Đỏnh dấu ống nghiệm cho mỗi bệnh nhõn và đặt lờn giỏ đỡ
− Nhỏ 6 giọt dung dịch đệm A vào ống nghiệm, đặt que tăm bụng vào và xoay nhẹ tăm bụng khoảng 15 giõy để trộn đều húa chất. Ủ ở nhiệt độ phũng khoảng 3 phỳt.
− Cho tiếp vào ống nghiệm 6 giọt dung dịch B, xoay nhẹ tăm bụng trong vũng 15 giõy.
− Vắt tăm bụng bằng cỏch ộp và miết vào thành ống nghiệm. Vứt bỏ tăm bụng.
phũng mà khụng ảnh hưởng đến kết quả.
• Thực hiện test:
− Bỏ que test ra khỏi vỏ bao.
− Nhỳng que test vào dung dịch bệnh phẩm. Chỳ ý khụng để que ngập quỏ vạch tối đa.
− Đọc kết quả trong vũng 15 phỳt. Khụng đọc kết quả sau 15 phỳt.
• Đỏnh giỏ kết quả test:
Hỡnh 2.2: Kết quả test
Khi bắt đầu cú phản ứng, sẽ cú một vạch màu xuất hiện ở phớa trờn của vạch kết quả vạch này được gọi là vạch Control (Vạch C). Vạch màu thứ 2 phớa dưới của thanh thử sẽ chỉ kết quả của test (Vạch T)
− Kết quả dương tớnh: Cú 2 vạch màu tại vị trớ kiểm chứng (C) và thử nghiệm (T)
− Kết quả õm tớnh: Chỉ cú một vạch màu ở vạch kiểm chứng (C)
− Kết quả khụng cú giỏ trị: Khụng thấy vạch hồng nào xuất hiện hoặc chỉ xuất hiện vạch hồng ở vạch (T). Khi đú cần làm lại xột nghiệm.
* Hạn chế của test:
Mặc dự test tương đối chớnh xỏc trong việc phỏt hiện ra C.trachomatis. Tuy nhiờn vẫn cú tỷ lệ rất thấp là dương tớnh giả (Mỏu nhiều trờn que bệnh phẩm cú thể làm cho kết quả dương tớnh giả). Cũng như cỏc xột nghiệm chẩn đoỏn khỏc, chẩn đoỏn xỏc định phải kết hợp khỏm lõm sàng và xột nghiệm
cận lõm sàng.
2.2.4.4. Chụp phim tử cung – vũi tử cung
Chụp phim TC – VTC là phương phỏp thăm dũ tỡnh trạng ống CTC, buồng tử cung và hai VTC nhờ bơm chất cản quang.
* Chỉ định: sau khi sạch kinh 2 đến 5 ngày, khụng cú viờm nhiễm,
khụng rong kinh, rong huyết.
* Đỏnh giỏ phim chụp:
− Đỏnh giỏ buồng tử cung: Cỏc dị tật ở buồng tử cung, u xơ dưới niờm mạc, polyp buồng tử cung, dớnh buồng tử cung, niờm mạc buồng tử cung.
− Đỏnh giỏ VTC: Đỏnh giỏ độ thụng của VTC, vị trớ tắc dớnh VTC hoặc ứ dịch VTC.
2.3. Phõn tớch và xử lý số liệu
− Làm sạch số liệu trước khi nhập liệu
− Sử dụng phần mềm thống kờ SPSS 16.0 để phõn tớch số liệu.
− Cỏc số liệu thu thập được phõn tớch và tớnh toỏn dựa vào cỏc phương phỏp thống kờ y học thụng thường như tỷ lệ %, giỏ trị trung bỡnh...
− So sỏnh bằng Test khi bỡnh phương, Student Fisher. Xỏc định mức độ tin cậy của cỏc kết quả nghiờn cứu bằng cỏch tớnh chỉ số OR, tỡm mối liờn quan giữa cỏc yếu tố bằng giỏ trị p.
2.4. Thời gian
Trong đú, thời gian thu thập số liệu là thỏng 2 - 8 năm 2012.
2.5. Khớa cạnh đạo đức
− Kế hoạch nghiờn cứu được sự đồng ý của đối tượng nghiờn cứu với sự tự nguyện tham gia của chị em vào nghiờn cứu sau khi hiểu rừ mục đớch nghiờn cứu, cú quyền rỳt khỏi nghiờn cứu bất cứ lỳc nào.
− Những người bị mắc bệnh sẽ được điều trị, người chưa mắc bệnh sẽ được tư vấn phũng bệnh. Cam kết giữ bớ mật cho người cung cấp thụng tin và cỏc vấn đề riờng tư của đối tượng nghiờn cứu.
− Nghiờn cứu này chỉ nhằm phục vụ sức khỏe bệnh nhõn, ngoài ra khụng cú mục đớch nào khỏc.
Chương 3
KẾT QUẢ NGHIấN CỨU