Xác định hàm lượng đường tổng (TCVN 4295:2009)
Nguyên tắc
Trong môi trường kiềm, đường lactoza phản ứng với dung dịch Fehling I và Fehling II tạo ra một lượng kết tủa Cu2O tương đương. Lượng Cu2O này sẽ phản ứng với lượng Fe3+ để sinh ra một lượng Fe2+ tương đương. Lượng Fe2+ sinh ra bằng dung dịch chuẩn KMnO4 0,1 N trong môi trường H2SO4 điểm tương đương nhận được khi dung dịch xuất hiện màu hồng nhạt.
Nguyên liệu và hóa chất
-Dung dịch nước thanh long -Na2CO3 bão hòa
-Pb(CH3COO)2
-Na2HPO4 bão hòa -KMnO4 1/30 N -Fehling I -Fehling II
-Dung dịch Fe2(SO4)3 trong H2SO4
-Chỉ thị phenolphatalein.
Quy trình
Chuẩn bị dung dịch thí nghiệm.
Cân 5-10g nghiền nhỏ với bột thủy tinh hay cát sạch và 30 ml nước cất nóng 70 – 800C. Sau đó chuyển toàn bộ vào bình định mức dung tích 1000ml đun cách thủy ở nhiệt độ 70-800C trong 35-45 phút, kết tủa protein và tạp chất bằng 2-5 ml dung dịch Pb(CH3COO)2 10%. Tiếp theo loại bỏ lượng Pb(CH3COO)2 còn dư bằng Na2HPO4 bão hòa, và để yên hỗn hợp trong 10 phút, sau đó thêm nước cất vào tới vạch định mức. Sau đó đem lọc lấy dung dịch trong, dung dịch được dùng cho thí nghiệm tiếp theo.
Tiến hành thí nghiệm.
-Lấy 10 ml dung dịch cho vào bình cầu 500 ml.
- Sau đó thêm 10 ml dung dịch Fehling (5 ml dung dịch Fehling I và 5 ml dung dịch Fehling II).
- Đun sôi dung dịch trong 3 phút.
-Sau đó để lắng tạo kết tủa, và đem lọc vào becher. -Rửa bình và phễu lọc bằng nước cất nóng 3 lần.
-Hòa tan kết tủa đồng vào bình bercher bằng cách cho một lượng nhỏ dung dịch Fe2(SO4)3 trong môi trường H2SO4.
-Chuẩn độ dung dịch thu được bằng KMnO4 1/30 N cho đến khi xuất hiện màu hồng nhạt bền trong 20-30 giây.
-Tính lượng KMnO4 dùng để chuẩn độ. -Làm mẫu trắng bằng nước cất tương tự.
Công thức tính.
Hàm lượng đường khử tính theo công thức sau 𝑋 = 𝑎 ∗ V1 ∗ 100
𝑉 ∗ 𝑤 ∗ 1000 Trong đó:
-X: Hàm lượng đường khử tính theo %.
-a: số gam glucose tìm được khi tra bảng ứng với số ml KMnO4 1/30 N để chuẩn độ mẫu thí nghiệm trừ đi số ml KMnO4 1/30 N chuẩn độ ở mẫu đối chứng.
-V: Dung tích bình định mức (ml)
-V1: lượng dung dịch lấy để xác định lượng đường khử (ml) -W: lượng mẫu thí nghiệm
-1000: Hệ số đổi gam thành mg.
Đánh giá kết quả
- Kết quả thử nghiệm là trung bình cộng của 2 lần được thực hiện song song.
Xác định độ ẩm bằng phương pháp sấy tới khối lượng không đổi (TCVN 7040:2002)
Nguyên tắc
Dùng sức nóng làm bay hơi nước hết trong mẫu. Cân trọng lượng trước và sau khi sấy khô, từ đó tính ra phần trăm nước có trong mẫu.
Cách tiến hành
Lấy cốc thủy tinh có đựng 10-20g cát sạch và một đũa thủy tinh bẹt đầu, đem sấy ở 100 – 1030C cho đến khi trọng lượng không đổi. Để nguội trong bình hút ẩm và cân trọng lượng chính xác đến 0.0001g. Sau đó cho vào cốc khoảng 10g mẫu. Cân tất cả ở cân phân tích với độ chính xác như trên. Dùng que thủy tinh trộn đều dàn thành một lớp mỏng, sau đó cho tất cả vào tủ sấy ở 100 – 1030C, sấy cho đến
khi trọng lượng không đổi, thường tối thiểu là 6 giờ. Trong thời gian sấy, cứ sau 1 giờ lại dùng đũa thủy tinh nghiền nhỏ các phần vón cục, sau đó dàn đều và tiếp tục sấy. Sấy xong, làm nguội trong bình hút ẩm 20 – 25 phút và đem cân ở cân phân tích với độ chính xác như trên.
Cho lại vào tủ sấy trong 30 phút, lấy ra làm nguội trong bình hút ẩm và đem cân như trên với khối lượng không đổi. Kết quả giữa hai lần cân liên tiếp không được cách nhau quá 0.5g cho mỗi gam mẫu.
Tính kết quả:
Độ ẩm theo phần trăm tính theo công thức:
X = (m1 – m2 ).100/( m1 -m) Trong đó:
m: trọng lượng cốc cân, cát và đũa thủy tinh (g).
m1: trọng lượng cốc cân, cát, đũa thủy tinh và của mẫu trước khi sấy (g). m2: trọng lượng cốc cân, cát đũa thủy tinh và của mẫu sau khi sấy (g). Sai lệch giữa hai lần xác định song song không được lớn hơn 0,5%. Kết quả cuối cùng là trung bình của 2 lần lặp lại song song.
Tính chính xác đến 0.01%.
Xác định hàm lượng đạm bằng phương pháp Kjeldahl (TCVN 7598: 2007)
Nguyên tắc:
Tất cả các dạng nitơ có trong cơ thể hay trong các mô được gọi là nitơ tổng số. Nitơ có trong thành phần amino acid của protein là nitơ protein. Nitơ không có trong thành phần của protein như các muối vô cơ, acid nitric, các amino acid tự do, các peptid, ure các dẫn xuất của ure,…là nitơ phi protein.
Nitơ tổng số = nitơ protein + nitơ phi protein
Trước tiên mẫu phải được vô cơ hóa bằng H2SO4 đặc ở nhiệt độ cao và có chất xúc tác. Các phản ứng của quá trình vô cơ hóa xảy ra như sau:
Oxi tạo thành trong phản ứng lại oxi hóa các nguyên tố khác. Các phân tử chứa nitơ dưới tác dụng của H2SO4 tào thành NH3.
Cách xác định lượng đạm. - Vô cơ hóa mẫu.
Cân khoảng 5-10 gam thanh long tươi đã được nghiền nhỏ cho vào ống Kjeldahl, thêm 10 ml H2SO4 đậm đặc, cho thêm xúc tác là hỗn hợp K2SO4 và CuSO4 với tỉ lệ 9:1. Mỗi lần 3 mẫu thật và 3 mẫu trắng.
Sau đó cho vào bình kjeldahl để vô cơ hóa mẫu.
- Định đạm bằng máy kjeldahl
Mẫu sau khi vô cơ hóa xong, đưa vào máy kjeldahl để định đạm đồng thời lấy một erlen để thu mẫu.
Mẫu sau đó đem đi chuẩn độ trực tiếp bằng HCL 0,1 N, khi chuẩn độ thì cho thêm chỉ thị Methyl Red.
Công thức tính:
Số gam protein có trong Vml mẫu (V1 – Vt)*0.01*14/V (g/ml)
Trong đó: V1 là thể tích HCl 0,1 N chuẩn độ mẫu thực (ml) Vt là thể tích HCl 0,1 N chuẩn độ mẫu trắng (ml)
V là thể tích mẫu vô cơ hóa
0.01là nồng độ HCl 0,1 N pha loãng ra 10 lần.
Xác định độ pH
- Được xác định bằng máy pH kế + Giải đo: 0-14.
+ Xuất sứ: EU – ASIA.
- Cách tiến hành: Lấy mẫu cho vào Becher và đem đi đo bằng máy đo pH.
Xác định hàm lượng chất khô: sử dụng khúc xạ kế Atago 0-30%
Dùng khúc xạ kế để đo hàm lượng chất khô có trong nước thanh long Dùng nước cất lau sạch mặt kính của khúc xạ kế.
Sau đó nhỏ một giọt nước cất lên giữa mặt kính của khúc xạ kế. Để kiểm tra có ở vạch 0 hay không.
Sau đó ta nhỏ giọt nước mẫu lên mặt kính và đọc kết quả.