Mục đích của khảo sát này nhằm xác định mật độ vi khuẩn coliforms trong dịch tăng sinh nhằm để làm cơ sở cho việc gây nhiễm vào trong các khảo sát tiếp theo.
Chủng vi khuẩn thuần C1 và C2 trên môi trường TSA được cấy sang môi trường canh Tryptone ủ ở 370C trong thời gian từ 24 - 48 giờ. Pha loãng dịch canh khuẩn theo phương pháp pha loãng dãy thập phân, bắt đầu từ 100 đến 10-9. Xác định mật độ vi sinh vật trong các nồng độ pha loãng khác nhau bằng phương pháp đổ đĩa môi trường TSA. Thí nghiệm được thực hiện trên 4 nồng độ pha loãng liên tiếp. Mỗi khảo sát được lặp lại 3 lần. Kết quả định lượng, giới hạn định lượng trên môi trường VRB được thể hiện qua bảng 4.2.
Bảng 4.2. Kết quả định lượng các chủng thuần C1 và C2 trong các độ pha loãng
Kết quả định lượng (CFU/ml)
10-6 10-7 10-8 10-9
C1
Lần 1 KXĐ 231 18 0
Lần 2 KXĐ 136 5 0
Lần 3 KXĐ 164 8 0
Mật độ tế bào trung bình (CFU/ml) KXĐ 177 10 0
C2
Lần 1 190 13 0 0
Lần 2 86 7 0 0
Lần 3 112 9 0 0
Mật độ tế bào trung bình (CFU/ml) 129 10 0 0
Ghi chú: KXĐ: không xác định
Kết quả thể hiện trên Bảng 4.2 cho thấy các chủng C1 và C2 có tốc độ tăng trưởng khác nhau khi tăng sinh trong cùng thời gian trong môi trường canh Trypton. Sau khi tăng sinh qua đêm ở nhiệt độ 370C chủng C1 có mật độ vi khuẩn đạt khoảng 1,7 x 109 CFU/ml, trong khi chủng C2 đạt mật độ thấp hơn, khoảng 1,3 x 108 CFU/ml. Kết quả này làm cơ sở cho việc dự đoán mật độ vi khuẩn trong canh thang sau khi tăng sinh sử dụng cho việc gây nhiễm vào mẫu trong các thí nghiệm tiếp theo.