1.1. Cơ sở khoa học
1.1.2. Một số chỉ tiêu đánh giá số lượng và chất lượng tinh dịch bò đực
Thể tích (V) là tổng số ml tinh dịch của một lần lấy tinh (ml/lần). Thể tích tinh dịch liên quan chặt chẽ tới giống, tuổi, chế độ chăm sóc, chế độ dinh
dưỡng, kích thước dịch hoàn, mùa vụ, mức độ kích thích tính dục trước khi lấy tinh, phản xạ nhẩy giá và kỹ thuật khai thác tinh. Ở bò đực lượng xuất tinh bình quân thường là 5-6 ml, (dao động 2-12 ml hoặc hơn). Nếu lấy tinh hai lần thì thể tích tinh dịch thu được lần lấy thứ hai thường cao hơn lần lấy đầu.
Trong thực tế sản xuất, không phải tinh dịch của lần lấy tinh nào cũng đạt tiêu chuẩn pha chế và đông lạnh (Hoàng Kim Giao và Nguyễn Thanh Dương, 1997) [16]. Chỉ có những lần lấy tinh qua kiểm tra đánh giá có hoạt lực tinh trùng ≥ 70 %, nồng độ tinh trùng ≥ 800 triệu tinh trùng/ml, kỳ hình tinh trùng
< 20 % vv... mới đủ tiêu chuẩn pha chế và đông lạnh. Còn nếu không đạt tiêu chuẩn thì loại bỏ ngay.
1.1.2.2. Hoạt lực tinh trùng
Hoạt lực tinh trùng (A) là sức sống hay sức hoạt động của tinh trùng, nó có tầm quan trọng đặc biệt trong pha loãng tinh dịch và khả năng thụ thai của tinh trùng. Tinh trùng ở phụ dịch hoàn không hoạt động nhưng khi ra ngoài cơ thể được tinh thanh hoạt hoá nên đã hoạt động với tất cả sức sống của mình. Tuỳ theo sức sống mà tinh trùng sẽ vận động theo một trong ba phương thức (Trần Tiến Dũng và cs, 2002) [13]
- Tiến thẳng: là sự vận động của tinh trùng mà phương thức vectơ vận động ổn định.
- Xoay vòng: là vận động của tinh trùng mà phương của vectơ luôn bị thay đổi.
- Lắc lư: là sự vận động của tinh trùng nhưng hầu như không có vectơ vận động, không thay đổi vị trí tương đối của chúng.
Chỉ có tinh trùng vận động tiến thẳng mới có khả năng tham gia quá trình thụ tinh. Do vậy người ta đánh giá chất lượng tinh dịch thông qua ước lượng tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng hoặc mức "sóng động’’ của mặt thoáng vi trường tinh dịch do hoạt lực của tinh trùng tạo nên.
Trong sản xuất tinh bò đông lạnh thì chỉ những tinh nguyên tươi có hoạt lực của tinh trùng từ 70 % trở lên mới được đưa vào pha chế và sản xuất.
1.1.2.3. Nồng độ tinh trùng
Nồng độ tinh trùng (C) là số lượng tinh trùng có trong một ml tinh dịch (tỷ/ml). Ở bò đực nồng độ tinh trùng khoảng 200 triệu - 3.200 triệu tinh trùng/ml, trung bình 1.200-1.500 triệu tinh trùng/ml (American Breeders Service, 1991) [38] nếu nồng độ tinh trùng đạt ≥ 800 triệu/ml thì đủ tiêu chuẩn pha chế và đông lạnh.
Số lượng tinh trùng sản sinh ra hàng ngày có liên quan chặt chẽ tới độ lớn của dịch hoàn, những bò đực có dịch hoàn lớn sẽ sản xuất số lượng tinh trùng lớn hơn những bò có dịch hoàn nhỏ (Joel, 2008) [55]. Ngoài ra, sự sản sinh tinh trùng cũng biến động nhiều qua các cá thể bò đực, lứa tuổi cũng như giữa các giống. Bò đực Bos indicus có nồng độ tinh trùng lớn hơn bò đực Bos taurus (Brito và CS, 2002) [44]. Laing và CS (1988) [58] cho biết, bò đực có nồng độ tinh trùng giao động từ 0,5 - 2,5 tỷ/ml.
Có nhiều cách xác định nồng độ tinh trùng, nhưng hiện nay nồng độ tinh trùng được xác định bằng máy so màu rất nhanh và chính xác. Phương pháp này dựa trên nguyên tắc là: Tinh dịch có nồng độ tinh trùng khác nhau sẽ tạo nên các mức độ mờ đục khác nhau, làm cho độ sáng đến tế bào quang học có kết quả khác nhau và được chuyển thành dòng điện tích làm lệch kim điện kế, nhờ chương trình cài đặt sẵn máy tự động tính toán và hiện thông số nồng độ tinh trùng khá chính xác. Nếu ta nhập dữ liệu thể tích tinh dịch và hoạt lực tinh trùng thì máy có thể tính toán cho ta thông số về lượng môi trường cần pha, số lượng cọng rạ có thể sản xuất được. Nồng độ tinh trùng có ý nghĩa khoa học thực tiễn, nó xác định số lượng tinh trùng trên một lần lấy tinh, phân loại tinh dịch, quyết định loại bỏ hay sử dụng cho các công đoạn sau. Nồng độ tinh trùng (C) khi phối hợp với V và A cho biết tổng số tinh trùng hoạt động tiến thẳng của lần xuất tinh đó (Hà Văn Chiêu, 1999) [11].
Tổng số tinh trùng hoạt động tiến thẳng = VAC, từ thông số này giúp ta xác định được số liều tinh có thể sản xuất, số lượng môi trường pha loãng cần sử dụng.
1.1.2.4. Màu sắc tinh dịch
Tinh dịch bò thường có màu trắng đục, trắng sữa hay trắng ngà. Màu sắc tinh dịch phụ thuộc vào nồng độ tinh trùng cũng như sự hiện diện của các chất khác. Tinh dịch có màu trắng đục, trắng sữa hoặc trắng ngà, thường có nồng độ tinh trùng cao, màu trắng trong, loãng là tinh dịch có nồng độ tinh trùng thấp. Tinh dịch có màu xanh hoặc xám thường có lẫn mủ, có màu cà phê hay màu nâu, thường do lẫn máu hay sản phẩm viêm của đường sinh dục (Hà Văn Chiêu, 1999) [11].
1.1.2.5. pH tinh dịch
pH của tinh dịch do nồng độ ion H+, nếu nồng độ H+ cao thì tinh dịch toan tính, pH trong trường hợp này có liên quan đến năng lực đệm, khả năng sống sót và năng lực thụ tinh của tinh trùng. pH tinh dịch có thể xác định bằng máy đo pH hoặc dùng giấy đo pH. pH của tinh dịch bò thường dao động trong khoảng 6,2-6,8.
Theo Hoàng Kim Giao và Nguyễn Thanh Dương (1997) [16], tinh dịch bò có pH 6,2-6,8, theo Lobos (1970)[60], pH của tinh dịch bò là 6,2-6,9, các trường hợp ngoại lệ là do nguyên nhân khách quan gây ra. pH tinh dịch có ý nghĩa quan trọng trong việc xác định bước đầu chất lượng tinh dịch. Độ pH kết hợp với các đặc điểm khác sẽ gúp cho người chăn nuôi đực giống quyết định loại thải hay sử dụng tinh dịch vừa mới khai thác được.
1.1.2.6. Tinh trùng kỳ hình
Trong điều kiện bình thường, tinh trùng có hình dạng đặc trưng cho mỗi loài, nếu vì một lý do nào đó trong quá trình sinh tinh, hoặc xử lý tinh dịch, tinh trùng có hình thái khác thường như giọt bào tương bám theo, biến
dạng hay khuyết tật ở đầu, đuôi như: đầu méo, to, hình quả ké, hai đầu, đuôi gấp khúc, hai đuôi, đuôi xoăn, có giọt bào tương, thể đỉnh phù, tháo rời, vỡ vv... Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình được tính bằng %, được xác định bằng cách đếm. Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình phụ thuộc vào nhiều yếu tố như giống, điều kiện nuôi dưỡng, thời tiết, bệnh tật, di truyền kỹ thuật sử lý tinh dịch vv...
Kỳ hình tinh trùng có thể xảy ra trong 3 trường hợp (Lê Bá Quế, 2007) [24].
- Trường hợp 1: là do quá trình sinh tinh bị tổn thương - Trường hợp 2: xẩy ra khi tinh trùng đi qua dịch hoàn phụ
- Trường hợp 3: xẩy ra khi tác động bên ngoài khi lấy tinh, khi kiểm tra chất lượng tinh, khi cân bằng và đông lạnh tinh dịch.
Nếu kỳ hình ở trường hợp 1 và 2 cao thì tỷ lệ thụ tinh thấp và những bò đực này nên loại thải. Nếu trường hợp 3 cần hạn chế những nguyên nhân gây ra kỳ hình bằng cách thực hiện nghiêm các quy trình kỹ thuật qua các khâu khai thác tinh, đánh giá chất lượng tinh dịch và sản xuất tinh đông lạnh.
Hình 1.6. Các dạng kỳ hình của tinh trùng bò
Trong đó:
A. Acrosom lồi (dạng phổ biến) I. Phản xạ xa tâm
B. Acrosom lồi (dạng hạt) J. Đuôi gập đôi (đoạn giữa bị gãy) C. Đầu quả lê (nghiêm trọng) K. Đuôi gập đôi (đoạn giữa uốn cong
mạnh)
D. Đầu quả lê (vừa phải) L. Giọt bào tương gần tâm E. Đầu quả lê (nhẹ) M. Giọt bào tương xa tâm F. Không bào nhân N. Dạng quái lạ (nghiêm trọng) G. Khiếm khuyết vòng miện O. Dạng quái lạ (vừa phải) H. Đầu tách rời P. Tinh trùng bình thường 1.1.2.7. Tỷ lệ tinh trùng sống
Tỷ lệ tinh trùng sống liên quan chặt chẽ đến tỷ lệ thụ tinh của tinh trùng. Dựa vào nguyên lý màng của tinh trùng chết hoặc đang chết có khả năng cho các chất nhuộm màu thấm qua, do sự rối loạn tính thẩm thấu của màng tinh trùng. Trong khi đó những tinh trùng sống màng tinh trùng không cho các chất nhuộm màu thấm qua nên không bắt màu khi nhuộm. Bằng cách này người ta đã sử dụng thuốc nhuộm màu Eosine 5 % để nhuộm tinh trùng chết rồi đếm chúng trên kính hiển vi và tính tỷ lệ sống, chết.
1.1.2.8. Tổng số tinh trùng tiến thẳng/lần khai thác
Tổng số tinh trùng tiến thẳng/lần khai thác VAC (tỷ/lần) là chỉ tiêu tổng hợp của cả 3 chỉ tiêu V, A và C (là tổng số tinh trùng tiến thẳng trong một lần xuất tinh). Qua đó có thể đánh giá được năng xuất đực giống thông qua số liều tinh sản xuất trong một lần khai thác, tổng số liều tinh của đực giống trong một năm. Chỉ tiêu VAC cao thì phẩm chất tinh dịch tốt.